Firstly, a sum of 30 mL of primer D

Firstly, a sum of 30 mL of primer DNA (1 mM), 2 mL of of sodium phosphate buffer (1 M, pH 5.5) and 2 mL of TCEP solution (30 mM) were mixed, which was then incubated for 1 h at room tempera- ture. The mixture was purified by Amicon-10 K for 10 times using buffer A (0.1 M NaCl, 0.05% Tween-20, 0.1 M sodium phosphate buffer, pH 7.3). Then, in order to conduct invertase conjugation, 1 mg of sulfo-SMCC was added into 400 mL of invertase solution (dissolved in buffer A), which was incubated for 1 h on a roller. The obtained mixture was purified through centrifugation and Ami- con-100 K using Buffer A by 10 times. Finally, the obtained sulfo- SMCC-activated invertase was mixed with the primer DNA, which was incubated for 48 h at room temperature. The mixture was purified by Amicon-100 K for 10 times using Buffer A.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ประการแรก ผลของ mL 30 พื้นดีเอ็นเอ (1 mM), mL 2 ของของโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (1 M ค่า pH 5.5) และ 2 mL TCEP โซลูชัน (30 mM) ถูก ผสม ที่ถูก incubated สำหรับ h 1 ที่ห้องอุณหภูมิ-ture แล้ว ส่วนผสมที่บริสุทธิ์ โดย Amicon-10 K ครั้งที่ 10 ใช้บัฟเฟอร์การ (0.1 M NaCl, 0.05% Tween-20, 0.1 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.3) เพื่อดำเนินการ invertase conjugation, 1 มิลลิกรัมของ sulfo SMCC ถูกเพิ่มเป็น 400 mL invertase โซลูชัน (ละลายในบัฟเฟอร์ A), ซึ่งถูก incubated สำหรับ h 1 บนลูกกลิ้งด้วย ได้รับส่วนผสมที่บริสุทธิ์ centrifugation และอามิ-คอน-100 K ใช้บัฟเฟอร์ A 10 ครั้ง สุดท้าย invertase sulfo-SMCC-เรียกใช้งานที่ได้รับถูกผสมกับรองพื้น DNA ซึ่งถูก incubated สำหรับ 48 h ที่อุณหภูมิห้อง ส่วนผสมที่บริสุทธิ์ โดย Amicon-100 K ครั้งที่ 10 ใช้บัฟเฟอร์อ.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ประการแรกผลรวมของ 30 มิลลิลิตรของดีเอ็นเอไพร (1 มิลลิเมตร) 2 มิลลิลิตรของโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (1 M, ค่า pH 5.5) และ 2 มิลลิลิตรของการแก้ปัญหา TCEP (30 มิลลิเมตร) ได้รับการผสมซึ่งถูกบ่มแล้วเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่ ห้องอุณหภูมิ Ture ส่วนผสมที่บริสุทธิ์โดย Amicon-10 K สำหรับ 10 ครั้งโดยใช้บัฟเฟอร์ (0.1 M NaCl, 0.05% Tween-20, 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ค่า pH 7.3) จากนั้นในการที่จะดำเนินการผันอินเวอร์ 1 มิลลิกรัมของ Sulfo-SMCC ถูกเพิ่มเข้าไปใน 400 มิลลิลิตรของสารละลายอินเวอร์ (ละลายในบัฟเฟอร์) ซึ่งถูกบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมงบนลูกกลิ้ง ส่วนผสมที่ได้มาบริสุทธิ์ผ่านการหมุนเหวี่ยงและ Ami- Con-100 K ใช้บัฟเฟอร์โดย 10 ครั้ง สุดท้ายที่ได้รับ sulfo- อินเวอร์ SMCC เปิดใช้ผสมกับดีเอ็นเอไพรเมอร์ซึ่งได้รับการบ่มเป็นเวลา 48 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง ส่วนผสมที่บริสุทธิ์โดย Amicon-100 K สำหรับ 10 ครั้งโดยใช้บัฟเฟอร์ A.

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

คือ ผลรวมของ 30 ml รองพื้น DNA ( 1 มิลลิเมตร ) 2 กรัมของโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( 1 M pH 5.5 ) 2 มิลลิลิตรเกี่ยวกับ โซลูชั่น ( 30 มม. ) มาผสม ซึ่งถูกบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ณ ห้องสีฝุ่น - ture . ผสมส่วนผสมที่บริสุทธิ์ โดย amicon-10 K 10 ครั้งใช้บัฟเฟอร์ ( 0.1 M NaCl , 0.05 % tween-20 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.3 ) จากนั้น เพื่อดําเนินการเปรียบเทียบ ,1 มิลลิกรัม sulfo smcc เพิ่มเป็น 400 มิลลิลิตรของสารละลายเย็น ( ละลายในบัฟเฟอร์ ) ซึ่งถูกบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมง บนลูกกลิ้ง นำส่วนผสมที่บริสุทธิ์และผ่าน 3 มิ - con-100 K ใช้บัฟเฟอร์เป็น 10 ครั้ง ในที่สุด , ได้รับ sulfo - smcc งานเย็นผสมกับรองพื้น ดีเอ็นเอ ซึ่งถูกบ่มเชื้อเป็นเวลา 48 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้องผสมส่วนผสมที่บริสุทธิ์ โดย amicon-100 K 10 ครั้งใช้บัฟเฟอร์ .