The ACE inhibitory activity of TRMH

The ACE inhibitory activity of TRMHs was measured according
to Sentandreu and Toldrá [28]. This assay is based on the ability of ACE
to hydrolyze the internally quenched fluorescent substrate oaminobenzoylglycyl-
p-nitro-L-phenylalanyl-L-proline (Abz-Gly-Phe-
(NO2)-Pro). A sample solution (50 μl) was mixed with 50 μl of
150 mM Tris-base buffer (pH 8.3) containing 3 mU/ml of ACE, then
themixturewas preincubated for 10 min at 37 °C. The reaction was initiated
by the addition of 200 μl of 150mMTris–HCl buffer (pH 8.3) containing
1.125 M NaCl and 10 mM Abz-Gly-Phe-(NO2)-Pro and
preincubated 10min at 37 °C. Finally the reactionmixturewas incubated
for 45min at 37 °C. The generation of fluorescence due to the release
of o-aminobenzoylglycine (Abz-Gly) by the action of ACE was measured
using excitation and emission wavelengths of 355 and 405 nm, respectively.
ACE inhibition is expressed as percentage. The test was carried
out in triplicate.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มีวัดตามกิจกรรม inhibitory ACE ของ TRMHsSentandreu และ Toldrá [28] ทดสอบนี้เป็นไปตามความสามารถของเอการ hydrolyze ดับภายในพื้นผิวเรืองแสง oaminobenzoylglycyl-p-nitro-L-phenylalanyl-L-proline (Abz-Gly -เพ -(NO2) -โปร) ปัญหาตัวอย่าง (50 μl) ถูกผสมกับ μl 50 ของ150 mM ฐานทริบัฟเฟอร์ (pH 8.3) มี 3 หมู่/ml ของ ACE แล้วthemixturewas preincubated 10 นาทีที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส จุดเริ่มต้นของปฏิกิริยาโดยการเพิ่ม μl 200 150mMTris – HCl มีบัฟเฟอร์ (pH 8.3)1.125 M NaCl และ 10 มม. Abz-Gly -เพ- (NO2) -โป และpreincubated 10 นาทีที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ในที่สุด reactionmixturewas ได้รับการกก45 นาทีที่ 37 องศาเซลเซียส การสร้างสารเรืองแสงเนื่องจากการปล่อยของ o-aminobenzoylglycine (Abz Gly) โดยการกระทำของเอมีวัดใช้ความยาวคลื่นกระตุ้นและปล่อยของ 355 และ 405 nm ตามลำดับยับยั้ง ACE จะแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ ดำเนินการทดสอบในลข้อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กิจกรรมการยับยั้ง ACE ของ TRMHs
วัดตามไปSentandreu และToldrá [28] การทดสอบนี้จะขึ้นอยู่กับความสามารถของเอซในการย่อยสลายสารตั้งต้นเรืองแสงดับภายใน oaminobenzoylglycyl- พีไนโตร-L-phenylalanyl-L-โพรลีน (ABZ-Gly-ของปรากฏการณ์(NO2)-Pro) วิธีการแก้ปัญหาของกลุ่มตัวอย่าง (50 ไมโครลิตร) ผสมกับ 50 ไมโครลิตรของ150 มิลลิบัฟเฟอร์ Tris ฐาน (pH 8.3) ที่มี 3 MU / มิลลิลิตร ACE แล้วthemixturewas preincubated เป็นเวลา 10 นาทีที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ปฏิกิริยาที่ได้ริเริ่มขึ้นโดยนอกเหนือจาก 200 ไมโครลิตรของ buffer 150mMTris-HCl (pH 8.3) ที่มี 1.125 M โซเดียมคลอไรด์และ 10 มิลลิ Abz-Gly-ของปรากฏการณ์ (NO2)-Pro และpreincubated 10 นาทีที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส สุดท้าย reactionmixturewas บ่มสำหรับ 45min ที่ 37 ° C รุ่นของการเรืองแสงอันเนื่องมาจากการเปิดตัวของ o-aminobenzoylglycine (Abz-Gly) โดยการกระทำของเอซได้รับการวัดโดยใช้การกระตุ้นและการปล่อยความยาวคลื่น355 นาโนเมตรและ 405 ตามลำดับ. ยับยั้ง ACE จะแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ การทดสอบที่ได้รับการดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า