1.IntroductionThe expression of rec

1.Introduction
The expression of recombinant products is an essential method for producing target proteins and one of the most important unit processes for production of therapeutic protein and structural study [1–6]. There are different expression systems for producing recombinant protein in biotechnology industry. Expression in mammalian cells produces active recombinant proteins that have posttranslation modification but expression by this system is time consuming and expensive. Although bacteria still represent a convenient production system, most of recombinant polypeptides produced in prokaryotic hosts undergo misfolding or incomplete folding processes that usually result in their accumulation as insoluble aggregates, which called inclusion bodies [7–9]. All these studies of recombinant protein expression in Escherichia coli showed that inclusion body formation is the rule rather than the exception. In vitro refolding is required for obtaining active protein from inclusion body aggregates which consist of four main steps: inclusion body isolation, solubilization, refolding, and purification. Because of high density of IBs, they separated easily by centrifuge. After isolation of the IBs, the proteins contained in the inclusion bodies need to be solubilized, usually by high concentration of denaturing agents such as
urea or guanidinium chloride (Gn-HCl). Then, solubilized IBs are subjected for refolding in specified conditions. Refolding of proteins from inclusion bodies is influenced by different factors including solubilization method, removal of the denaturant, and assistance of refolding by co-solute or additives. The refolding condition is critical in order to obtain acceptable amounts of active protein. It has been known that additives, especially low molecular weight compounds, may significantly enhance the yield of the refolding process. In many cases, inclusion body protein can only be successfully refolded by making use of these effects.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

1.บทนำนิพจน์ของ recombinant ผลิตภัณฑ์เป็นวิธีการสำคัญสำหรับการผลิตโปรตีนเป้าหมายและหนึ่งในกระบวนการหน่วยสำคัญที่สุดสำหรับการผลิตโปรตีนรักษาและศึกษาโครงสร้าง [1-6] มีระบบการแสดงออกจึงแตกต่างกันสำหรับการผลิต recombinant โปรตีนในอุตสาหกรรมเทคโนโลยีชีวภาพ นิพจน์ในเซลล์ที่เลี้ยงลูกด้วยนมผลิตโปรตีน recombinant active ที่มี posttranslation modification แต่นิพจน์ โดยระบบนี้จะใช้เวลานาน และมีราคาแพง แม้ว่าแบคทีเรียยังคงแสดงถึงระบบการผลิตที่สะดวก ส่วนใหญ่ของ recombinant ไทด์ผลิตใน prokaryotic โฮสต์ผ่าน misfolding หรือกระบวนการพับไม่สมบูรณ์ที่โดยปกติส่งผลให้การสะสมเป็นผลรวมที่ไม่ละลายน้ำ ซึ่งรวมเรียกว่าร่างกาย [7-9] การศึกษาเหล่านี้ทั้งหมดของนิพจน์ recombinant โปรตีนใน Escherichia coli พบว่า ก่อตัวรวมร่างเป็นกฎมากกว่าที่เป็นข้อยกเว้น Refolding ในหลอดทดลองจะต้องได้รับโปรตีนที่ใช้งานอยู่จากมวลรวมร่างกายซึ่งประกอบด้วยขั้นตอนหลักสี่: แยกการรวมร่าง solubilization, refolding และ purification เนื่องจากความหนาแน่นสูงของ IBs พวกเขาแยกได้ง่าย ๆ โดยการหมุนเหวี่ยง หลังจากแยกกับ IBs โปรตีนที่มีอยู่ในร่างกายรวมต้องจะ solubilized มักจะ โดยความเข้มข้นสูงของ denaturing แทนเช่นยูเรียหรือ guanidinium คลอไรด์ (Gn HCl) แล้ว solubilized IBs อยู่ภายใต้การ refolding ในสภาพ specified Refolding ของโปรตีนจากร่างกายรวมได้รับอิทธิพลจากปัจจัยต่าง ๆ จึงแตกต่างกันรวมทั้งวิธีการ solubilization, denaturant กำจัด และความช่วยเหลือของ refolding โดยร่วมละลายหรือสารเติมแต่ง สภาพ refolding เป็นสิ่งสำคัญเพื่อให้ได้จำนวนโปรตีนใช้งานยอมรับ มันได้รับทราบว่า สาร โดยเฉพาะอย่างยิ่งต่ำน้ำหนักโมเลกุลสาร significantly อาจเพิ่มผลผลิตของกระบวนการ refolding ในหลายกรณี โปรตีนร่างกายรวมสามารถเท่านั้นจะสำเร็จ refolded โดยการใช้ effects เหล่านี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

1.
การแสดงออกของผลิตภัณฑ์ - 6] มีดิมีFF ระบบการแสดงออกต่างกันสำหรับการผลิตโปรตีนในอุตสาหกรรมเทคโนโลยีชีวภาพ การแสดงออกในเซลล์สัตว์ผลิตโปรตีนที่ใช้งานที่มี Fi ไอออนบวก แต่การแสดงออกโดยระบบนี้จะใช้เวลานานและมีราคาแพง แม้ว่าแบคทีเรียยังคงเป็นตัวแทนของระบบการผลิตที่สะดวกที่สุดของ - 9] การศึกษาเหล่านี้ทั้งหมดในการแสดงออกโปรตีนใน ใน Fi ไอออนบวก เพราะความหนาแน่นสูงของ หลังจากการแยกของ
ยูเรียหรือ - HCl) จากนั้นละลาย Fi เงื่อนไขเอ็ด Refolding ฟลอริด้าuenced FF ปัจจัยต่างกันรวมทั้งวิธีการละลายการกำจัดของ - ตัวละลายหรือสารเติมแต่ง สภาพ มันได้รับการรู้จักกันว่าสารเติมแต่งในระดับต่ำโดยเฉพาะอย่างยิ่งน้ำหนักโมเลกุลของสารอาจมีนัยสำคัญFi อย่างมีผลผลิตเพิ่มประสิทธิภาพของกระบวนการ ในหลายกรณีโปรตีนร่างกายรวมเท่านั้นที่สามารถ FF ECTS

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

1 . เบื้องต้นการแสดงออกของผลิตภัณฑ์เป็นวิธีการที่จำเป็นสำหรับการผลิตรีคอมบิแนนท์โปรตีนเป้าหมายหนึ่งของกระบวนการหน่วยสำคัญที่สุดสำหรับการผลิตยาโปรตีนและการศึกษาโครงสร้าง [ 1 – 6 ] มี ดิ ffระบบสำหรับการผลิตรีคอมบิแนนท์โปรตีน erent การแสดงออกในอุตสาหกรรมเทคโนโลยีชีวภาพ การแสดงออกในเซลล์ผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์ ) ใช้งานได้ posttranslation Modi จึงบวกแต่การแสดงออกโดยระบบนี้จะใช้เวลานานและมีราคาแพง แม้ว่าแบคทีเรียยังคงเป็นตัวแทนของระบบการผลิตสะดวกที่สุดของโปรตีนรีคอมบิแนนท์ผลิตในโพรคาริโอติกโฮสต์ผ่าน misfolding หรือกระบวนการพับไม่สมบูรณ์ที่มักจะผลในการสะสมของมวลรวม ซึ่งเรียกว่าการรวมร่าง [ 7 – 9 ] การศึกษาการแสดงออกของยีนเหล่านี้ โปรตีนในแบคทีเรีย Escherichia coli พบว่า การรวมตัวเป็นกฎมากกว่าเป็นข้อยกเว้น ในหลอดทดลอง refolding ที่จําเป็นสําหรับการใช้โปรตีนจากกายขันธ์ ซึ่งประกอบด้วย 4 ขั้นตอนหลัก : กายแยก , การสกัด refolding , และ ภูริจึงไอออนบวก เพราะความหนาแน่นสูงของ IBS พวกเขาแยกออกได้อย่างง่ายดายด้วยเครื่อง . หลังจากการแยกของ IBS โปรตีนที่มีอยู่ในร่างกายจะต้องมีการสร้างมักจะโดยความเข้มข้นสูงของี่ตัวแทน เช่นยูเรีย หรือ guanidinium คลอไรด์ ( GN HCl ) แล้วสร้าง IBS อาจมีสำหรับ refolding ในกาจึงเอ็ดเงื่อนไข refolding โปรตีนจาก inclusion bodies ในfl uenced โดย ดิ ff erent ปัจจัยรวมถึงวิธีการการสกัด , การกำจัดของทำให้ผิดธรรมชาติ และความช่วยเหลือของ refolding โดยวัตถุเจือปน Co ( หรือ การ refolding เงื่อนไขสำคัญเพื่อรับการยอมรับปริมาณการใช้งานของโปรตีน เป็นที่รู้กันว่า วัตถุเจือปน โดยเฉพาะอย่างยิ่ง น้ำหนักโมเลกุลต่ำ อาจ signi จึงลดลงอย่างมีนัยสําคัญเมื่อเพิ่มผลผลิตของ refolding กระบวนการ ในหลายกรณี กาย โปรตีนสามารถประสบความสำเร็จ refolded โดยการใช้เหล่านี้ e ff ects