An inbred strain of cucumber (Cucumis sativus L. cv. S516)
was propagated by artificial self-pollination, and used for
transformation. pCAMBIA1300-RD29A-LOS5 (from Professor
Gong, College of Biological Science of China Agricultural
University) plasmid was integrated into
Agrobacterium rhizogenes EHA3101. Seeds were surface
sterilized and sown on MS medium containing 30 g L-1
sucrose and 2.5 g L-1 gelrite. Cotyledons from the germinated
seeds were separated and cut into 1 cm2 piece to be
used as explants. The explants were dipped into the
pCAMBIA1300-RD29A-LOS5 Agrobacterium suspension
for 15 min, and placed on the shoot induction media containing
2 mg L-1 6-benzylaminopurine (BA), 1 mg L-1 ABA,
and cultured for 3 d at 25°C in darkness. Then the explants
were transferred to germination media containing 2 mg L-1
BA, 1 mg L-1 ABA, 5 mg L-1 hygromycin, 100 mg L-1 claforan,
and cultured for 14 d. Regenerated shoots were placed on
selection media containing 2 mg L-1 BA, 1 mg L-1 ABA, 25
mg L-1 hygromycin, 100 mg L-1 claforan, for another 14 d.
The shoots showing resistance to hygromycin were cultured
till full growth in MS medium containing 50 mg L-1
claforan (Tabei et al. 1998).
ต้องใช้การ inbred ของแตงกวา (Cucumis sativus L. พันธุ์ S516)เผยแพร่ โดย self-pollination ประดิษฐ์ และใช้สำหรับการเปลี่ยนแปลง pCAMBIA1300-RD29A-LOS5 (จากศาสตราจารย์กง วิทยาลัยชีวภาพวิทยาศาสตร์เกษตรจีนมหาวิทยาลัย plasmid ถูกรวมเข้ากับอโกรแบคทีเรียม rhizogenes EHA3101 เมล็ดมีผิวsterilized และหว่านบน MS ปานกลางประกอบด้วย 30 g L-1gelrite L 1 ซูโครสและ 2.5 g Cotyledons จากเปลือกที่งอกเมล็ดถูกแยก และตัดเป็น cm2 1 ชิ้นเป็นใช้เป็น explants Explants ถูกสอดเข้าไปในตัวระงับอโกรแบคทีเรียม pCAMBIA1300-RD29A-LOS5สำหรับ 15 นาที และอยู่บนยิงเหนี่ยวนำสื่อที่ประกอบด้วย2 mg L-1 6-benzylaminopurine (BA), 1 มิลลิกรัมที่ ABA L-1และอ่างสำหรับ 3 d ที่ 25° C ในที่มืด แล้ว explantsมีการถ่ายโอนสื่อการงอกประกอบด้วย mg 2 L-1BA, mg ABA L-1, hygromycin 5 mg L 1, claforan 100 mg L 1, 1และสำหรับการถ่ายภาพ 14 d. Regenerated ถูกวางบนอ่างเลือกสื่อที่ประกอบด้วย 2 mg BA L 1, 1 มิลลิกรัม ABA L-1, 25มก. L-1 hygromycin, 100 mg L-1 claforan สำหรับ d อีก 14ถ่ายภาพแสดงความต้านทานต่อ hygromycin มีอ่างจนถึงการเจริญเติบโตเต็มใน MS ประกอบด้วย 50 mg L-1claforan (Tabei et al. 1998)
การแปล กรุณารอสักครู่..
