The isolation of yeasts from grapes

The isolation of yeasts from grapes was performed as described
previously (Dimakopoulou et al., 2008) with small modifications.
Grape berries belonging to cv. ‘‘Cabernet sauvignon’’ and
‘‘Maratheftiko’’ – a grape variety indigenous to Cyprus (Hvarleva
et al., 2005) – were sampled from six vineyards in Koilani, Agios
Amvrosios, Pachna and Arsos, representative of the major grapegrowing
areas of Limassol district, an important wine-producing
area in Cyprus. Grape sampling was carried out in 2010 and epiphytic
yeasts were recovered from the surface of grape berries.
Ten plants were marked along two major diagonals of each vineyard.
Three bunches were collected from the central part of each
plant. The samples were kept in paper bags and stored in portable
refrigerators during transfer to the laboratory for isolation of
yeasts. From each vineyard ten different bunches were randomly
selected and from each bunch ten berries were collected and transferred
in sterile distilled water (SDW) containing 0.02% Tween-20.
The berries were shaken at room temperature for 10 min at
150 rpm and then 10-fold dilutions were prepared in SDW. From
each dilution 200 ll were plated in Petri dishes containing yeast
malt agar (YMA, containing 3 g yeast extract, 3 g malt extract, 5 g
bactopeptone, 10 g glucose, 15 g agar per lt). Petri dishes were
I.S. Pantelides et al. / Biological Control 88 (2015) 46–53 47incubated at 25 C for 24–72 h until colony development. The isolated
yeast colonies were streaked and transferred to YMA. Pure
cultures were kept as a glycerol stock at 80 C.
2

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทำการแยกของยีสต์จากองุ่นตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Dimakopoulou et al. 2008) การแก้ไขขนาดเล็กเบอร์รี่องุ่นเป็นพันธุ์ '' Cabernet sauvignon'' ของ และ'' Maratheftiko'' – หลากหลายองุ่นพื้นเมืองในประเทศไซปรัส (Hvarlevaet al. 2005) – มีตัวอย่างจากไร่องุ่นหกใน Koilani อาAmvrosios, Pachna และ Arsos ตัวแทนของ grapegrowing ใหญ่พื้นที่ของเขต Limassol สำคัญผลิตไวน์พื้นที่ในประเทศไซปรัส สุ่มตัวอย่างองุ่นได้ดำเนินการใน 2010 และบนต้นไม้รายีสต์ถูกกู้คืนจากพื้นผิวขององุ่นเบอร์รี่สิบพืชถูกทำเครื่องหมายตามแนวเส้นทแยงมุมหลักสองขององุ่นแต่ละสามช่อเก็บรวบรวมจากส่วนกลางของแต่ละโรงงาน ตัวอย่างถูกเก็บไว้ในถุงกระดาษ และเก็บไว้ในแบบพกพาตู้เย็นในระหว่างโอนย้ายไปยังห้องปฏิบัติการแยกของรายีสต์ จากไร่องุ่นแต่ละ 10 ช่อถูกสุ่มเลือก และ จากพวงละสิบถูกรวบรวม และถ่ายโอนกลั่นน้ำหมัน (SDW) 0.02% ที่ประกอบด้วยในโลก-20ผลเบอร์รี่ถูกเขย่าที่อุณหภูมิห้อง 10 นาทีที่ได้เตรียม 150 rpm แล้ว 10-fold เจือจางใน SDW จากแต่ละจะเจือจาง 200 ถูกชุบในจานเพาะที่ประกอบด้วยยีสต์วุ้นมอลต์ (YMA ที่ประกอบด้วยสารสกัดจากยีสต์ 3 กรัม สารสกัดจากมอลต์ 3 กรัม 5 กรัมbactopeptone กลูโคส 10 กรัม วุ้น 15 กรัมต่อลิตร) เพาะอาหารได้I.S. Pantelides et al. / 88 ควบคุม (2015) 46 – 53 47incubated 25 c เป็นเวลา 24 – 72 ชั่วโมงจนถึงพัฒนาอาณานิคม การแยกลาย และโอน YMA ยีสต์อาณานิคม เพียววัฒนธรรมที่ถูกเก็บไว้เป็นสต็อกเป็นกลีเซอรอลที่ 80 c2

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แยกยีสต์จากองุ่นที่ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้
ก่อนหน้านี้ (Dimakopoulou et al., 2008) มีการปรับเปลี่ยนขนาดเล็ก.
เบอร์รี่องุ่นพันธุ์ที่อยู่ใน '' Sauvignon Cabernet '' และ
'' Maratheftiko '' - ความหลากหลายองุ่นพื้นเมืองไปยังไซปรัส (Hvarleva
. et al, 2005) - ได้รับตัวอย่างจากหกไร่องุ่นใน Koilani, Agios
Amvrosios, Pachna และ Arsos ตัวแทนของ grapegrowing ที่สำคัญ
พื้นที่ของ อำเภอลีมาซอลที่มีความสำคัญที่ผลิตไวน์
พื้นที่ในประเทศไซปรัส การสุ่มตัวอย่างองุ่นได้ดำเนินการในปี 2010 และอิงอาศัย
ยีสต์หายจากพื้นผิวของผลเบอร์รี่องุ่น.
สิบพืชถูกทำเครื่องหมายพร้อมสองเส้นทแยงมุมที่สำคัญของแต่ละไร่องุ่น.
สามพวงถูกรวบรวมมาจากภาคกลางของแต่ละ
โรงงาน กลุ่มตัวอย่างที่ถูกเก็บไว้ในถุงกระดาษและเก็บไว้ในแบบพกพา
ตู้เย็นระหว่างการถ่ายโอนไปยังห้องปฏิบัติการสำหรับการแยก
ยีสต์ จากแต่ละไร่องุ่นสิบช่อที่แตกต่างกันโดยการสุ่ม
เลือกและจากแต่ละพวงสิบเบอร์รี่ถูกเก็บรวบรวมและโอน
ในน้ำกลั่นปลอดเชื้อ (SDW) ที่มี 0.02% Tween-20.
ผลเบอร์รี่ถูกเขย่าที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาทีที่
150 รอบต่อนาทีและจากนั้น 10- เจือจางพับได้จัดทำขึ้น SDW จาก
แต่ละเจือจาง 200 LL ถูกชุบในจานเลี้ยงเชื้อยีสต์ที่มี
วุ้นมอลต์ (ที่นี่ที่มีสารสกัดจาก 3 กรัมยีสต์ 3 กรัมสารสกัดจากมอลต์ 5 กรัม
bactopeptone กลูโคส 10 กรัม, 15 กรัมวุ้นต่อ LT) จานเลี้ยงเชื้อเป็น
I.S. Pantelides et al, / การควบคุมทางชีวภาพ 88 (2015) 46-53 47incubated ที่ 25 C สำหรับ 24-72 ชั่วโมงจนการพัฒนาอาณานิคม ที่แยก
อาณานิคมยีสต์ถูกลายและย้ายไปที่นี่ เพียว
วัฒนธรรมถูกเก็บไว้เป็นหุ้นกลีเซอรอลที่ 80 องศาเซลเซียส
2

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การแยกยีสต์จากองุ่นมีการปฏิบัติตามที่ระบุไว้ก่อนหน้านี้ ( dimakopoulou et al . , 2008 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อยผลขององุ่นพันธุ์ " "cabernet Sauvignon " " และ" " " "maratheftiko –องุ่นหลากหลายท้องถิ่น ( hvarleva ไซปรัสet al . , 2005 ) - จำนวน 6 ไร่องุ่นใน koilani ผ่ ,amvrosios pachna arsos , และตัวแทนของ grapegrowing หลักพื้นที่ของ Limassol District , การผลิตไวน์ที่สำคัญพื้นที่ในไซปรัส ตัวอย่างองุ่นได้ดําเนินการใน 2010 และอิงอาศัยยีสต์ที่พบจากพื้นผิวของผลเบอร์รี่องุ่นพืช 10 ถูกทำเครื่องหมายตามสองเส้นทแยงมุมหลักของแต่ละไร่3 มัด รวบรวมจากภาคกลางของแต่ละพืช ตัวอย่างถูกเก็บในถุงกระดาษและเก็บไว้ในแบบพกพาตู้เย็นระหว่างการถ่ายโอนไปยังห้องปฏิบัติการสำหรับการแยกยีสต์ จากแต่ละที่แตกต่างกันสิบพวงองุ่น มีวัตถุประสงค์เลือกจากสิบและแต่ละกลุ่มเบอร์รี่การเก็บรวบรวมและโอนในการฆ่าเชื้อน้ำ ( sdw ) ประกอบด้วย 0.02% tween-20 .ผลเบอร์รี่ที่สั่นสะเทือนที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาทีที่150 รอบต่อนาทีแล้ว 10 วิธีการพับเตรียมไว้ใน sdw . จากเจือจางแต่ละ 200 จะถูกหุ้มในจานเลี้ยงเชื้อยีสต์ที่มีข้าวมอลต์ ( yma ประกอบด้วย 3 กรัมยีสต์สกัด สารสกัดจากมอลต์ 3 กรัม 5 กรัมbactopeptone 10 กรัมน้ำตาล 15 กรัมวุ้นต่อมัน ) จานเพาะเลี้ยงคือi.s. pantelides et al . ควบคุมทางชีววิทยา / 88 ( 2015 ) 46 – 53 47incubated ที่ 25 C เป็นเวลา 24 และ 72 ชั่วโมงจนกระทั่งพัฒนานิคม การแยกโคโลนียีสต์ลายและย้ายไป yma . บริสุทธิ์วัฒนธรรมที่ถูกเก็บไว้เป็นกลีเซอรอลหุ้น 80 C2