. Cell culturesBovine aortic endoth

. Cell cultures
Bovine aortic endothelial cells (BAEC) were obtained from bovine
thoracic aorta by enzymatic digestion with 0.05% (w/v) type-2
collagenase (Worthington, Lakewood, NJ) and grown in Dulbecco’s
modified eagle medium (DMEM, Sigma Aldrich, Milan, Italy)
supplemented with 20% fetal bovine serum (FBS, Euroclone, Milan,
Italy), 100 μg/ml endothelial cell growth supplement (Sigma Aldrich,
Milan, Italy), 100 U penicillin, 100 μg/ml streptomycin and
2 mM glutamine (Sigma Aldrich, Milan, Italy). Human Umbilical
Vein Endothelial Cells (HUVEC) were isolated from umbilical cords
collected from uncomplicated pregnancies and grown on 1% (w/v)
gelatin (Sigma Aldrich) in EBM-2 medium (Lonza). A549 (human
lung carcinoma-derived cells), NT2-D1 (human pluripotent embryonal
carcinoma-derived cells), RD (human rhabdomyosarcomaderived
cells), IMR90 (human embryonic lung-derived fibroblasts),
HEK293 (human embryonic kidney-derived cells), A375 (human
melanoma-derived cells), Panc-1 (human pancreatic carcinomaderived
cells), and T98G (human brain glioblastoma-derived cells)
were obtained from ATCCs (American Type Culture Collection
Manassas, VA). HaCaT (human spontaneously immortalized keratinocyte
cells) were obtained from Cell Line Service (Eppelheim,
Germany). All these cells were maintained in DMEM supplemented
with 10% heat-inactivated FBS, 100 U penicillin, 100 μg/ml
streptomycin and 2 mM glutamine. MCF-7 (human breast cancerderived
cells, from ATCCs) and BRC-230 (human breast cancerderived
cells, isolated by Amadori et al. [19]) were maintained in
DMEM/Ham’s F12 (1:1) supplemented with 10% FBS, 2 mM glutamine,
and insulin (10 μg /ml; Sigma Aldrich). LNCaP (human
prostate cancer-derived cells, from ATCCs) were grown in RPMI
(Life Technologies Ltd) supplemented with 10% FBS and 2 mM
glutamine. LNCaP-Rbic (bicalutamide-resistant cells, derived from
LNCaP and isolated by Pignatta et al. [20]), was maintained in the
same medium of parental cells supplemented with 20 μM of (R)-
bicalutamide (Casodexs). U87 (human glioblastoma-derived cells,
from ATCCs) were grown in Eagle’s Minimum Essential Medium
(EMEM, ATCCs) supplemented with 10% FBS.
All cells were cultured in an atmosphere of 95% air and 5% CO2
at 37 °C in 100 mm culture plates. All the cell lines used in the
present study were checked periodically for mycoplasma contamination
by MycoAlert™ Mycoplasma Detection Kit (Lonza,
Basel, Switzerland).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

. วัฒนธรรมเซลล์เซลล์บุผนังหลอดเลือดเอออร์ตาส่วนวัว (BAEC) ได้รับจากวัวทรวงอกโลหิต โดยเอนไซม์ในระบบย่อยอาหารมีชนิด 2 0.05% (w/v)collagenase (ธธิง เลควูด NJ) และเติบโตใน Dulbeccoแก้ไขนกอินทรีขนาดกลาง (DMEM, Sigma Aldrich มิลาน อิตาลี)เสริม ด้วย 20% ทารกวัวซีรั่ม (FBS, Euroclone มิ ลานอิตาลี), 100 μ/มล.เสริมเจริญเติบโตของเซลล์บุผนังหลอดเลือด (Sigma Aldrichมิลาน อิตาลี), 100 U ยาเพนนิซิลลิน streptomycin 100 μ/ml และกลูตา 2 มม. (Sigma Aldrich มิลาน อิตาลี) มนุษย์สะดือเซลล์บุผนังหลอดเลือดของหลอดเลือดดำ (HUVEC) ถูกแยกจากสายสะดือรวบรวมจากการตั้งครรภ์ที่ไม่ซับซ้อน และเติบโต 1% (w/v)วุ้น (Sigma Aldrich) อี-2 กลาง (Lonza) (มนุษย์ A549ปอดมะเร็งมาเซลล์), NT2 D1 (มนุษย์ pluripotent embryonalมะเร็งมาเซลล์), RD (มนุษย์ rhabdomyosarcomaderivedเซลล์), IMR90 (มนุษย์ตัวอ่อนมาปอด fibroblasts),HEK293 (มนุษย์ตัวอ่อนมาไตเซลล์), A375 (มนุษย์มา melanoma เซลล์), Panc-1 (มนุษย์ตับอ่อน carcinomaderivedเซลล์), และ T98G (glioblastoma มาเซลล์สมองของมนุษย์)ได้รับจาก ATCCs (อเมริกันชนิดลเล็กมานาสซาส VA) HaCaT (มนุษย์อันเป็นอมตะเป็นธรรมชาติ keratinocyteเซลล์) ได้รับจากบริการสายเซลล์ (Eppelheimประเทศเยอรมนี) เซลล์เหล่านี้ถูกเก็บรักษาไว้ใน DMEM เสริมกับ 10% ความร้อนยก FBS ยาเพนนิซิลลิน U 100, 100 μ/mlกลูตา 2 มม.และ streptomycin MCF-7 (cancerderived เต้านมของมนุษย์เซลล์ จาก ATCCs) และ BRC-230 (cancerderived เต้านมของมนุษย์เซลล์ แยกโดย Amadori et al. [19]) ที่ถูกเก็บรักษาไว้ในDMEM/แฮม F12 (1:1) เสริม ด้วย 10% FBS กลูตา 2 มม.และอินซูลิน (10 μ /ml Sigma Aldrich) LNCaP (มนุษย์ต่อมลูกหมากมะเร็งมาเซลล์ จาก ATCCs) ที่ปลูกใน RPMI(ชีวิตเทคโนโลยี Ltd) เสริม ด้วย 10% FBS และ 2 มม.กลูตา LNCaP-Rbic (ทน bicalutamide เซลล์ มาจากLNCaP และแยกโดย Pignatta et al. [20]), ถูกเก็บรักษาไว้ในสื่อเดียวกันของผู้ปกครองเซลล์เสริม ด้วยμ m 20 ของ (R) -bicalutamide (Casodexs) U87 (glioblastoma มาเซลล์ของมนุษย์จาก ATCCs) ที่ปลูกในอินทรีน้อยสำคัญปานกลาง(ยูนิเทค ATCCs) เสริม ด้วย 10% FBSเซลล์ทั้งหมดถูกล้างในบรรยากาศของอากาศ 95% และ 5% CO2ที่ 37 ° C ในแผ่นวัฒนธรรม 100 มม. เซลล์เส้นใช้ในการศึกษาได้ตรวจสอบเป็นระยะ ๆ สำหรับไก่ปนเปื้อนโดยชุดตรวจไก่ MycoAlert™ (Lonzaบาเซิล สวิตเซอร์แลนด์)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

. เซลล์เพาะเลี้ยง
วัวหลอดเลือดเซลล์บุผนังหลอดเลือด (BAEC) ที่ได้รับจากวัว
เส้นเลือดทรวงอกโดยการย่อยของเอนไซม์ที่มี 0.05% (w / v) ชนิดที่ 2
คอลลา (วอร์ชิงตันเลควูด, นิวเจอร์ซีย์) และปลูกใน Dulbecco ของ
การปรับเปลี่ยนขนาดกลางนกอินทรี (DMEM ซิกดิช มิลาน, อิตาลี)
เสริมด้วยซีรั่ม 20% ของทารกในครรภ์วัว (FBS, Euroclone, มิลาน,
อิตาลี) 100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรเสริมเจริญเติบโตของเซลล์บุผนังหลอดเลือด (ซิกม่าดิช,
มิลาน, อิตาลี) 100 U penicillin, 100 ไมโครกรัม / streptomycin มล. และ
2 mm กลูตา (ซิกม่าดิช, มิลาน, อิตาลี) มนุษย์สะดือ
หลอดเลือดดำ Endothelial เซลล์ (HUVEC) ที่แยกได้จากสายสะดือ
ที่เก็บรวบรวมจากการตั้งครรภ์ที่ไม่ซับซ้อนและเติบโตขึ้นในวันที่ 1% (w / v)
เจลาติน (ซิกม่าดิช) ใน EBM-2 กลาง (Lonza) A549 (Human
ปอดมะเร็งที่ได้มาจากเซลล์) NT2-D1 (มนุษย์ pluripotent embryonal
เซลล์มะเร็งที่ได้มา) RD (rhabdomyosarcomaderived มนุษย์
เซลล์) IMR90 (รบรามนุษย์ตัวอ่อนปอดมา)
HEK293 (เซลล์ของมนุษย์ตัวอ่อนในไตมา) A375 (มนุษย์
เซลล์เนื้องอกมา) Panc-1 (ตับอ่อนมนุษย์ carcinomaderived
เซลล์) และ T98G (เซลล์สมองของมนุษย์ glioblastoma มา)
ที่ได้รับจาก ATCCs (อเมริกันเก็บประเภทวัฒนธรรม
นาสซาส, VA) HaCaT (มนุษย์ธรรมชาติ immortalized keratinocyte
เซลล์) ที่ได้รับจากบริการโทรศัพท์มือสาย (Eppelheim,
เยอรมนี) ทุกเซลล์เหล่านี้ถูกเก็บรักษาไว้ใน DMEM เสริม
10% ความร้อนใช้งาน FBS 100 U penicillin, 100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร
streptomycin และ 2 mm กลูตา MCF-7 (เต้านม cancerderived มนุษย์
เซลล์จาก ATCCs) และ BRC-230 (เต้านมของมนุษย์ cancerderived
. เซลล์ที่แยกได้จาก Amadori et al, [19]) ได้รับการเก็บรักษาไว้ใน
DMEM / F12 แฮม (1: 1) เสริมด้วย 10% FBS, 2 มิกลูตา,
และอินซูลิน (10 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร; ซิกดิช) LNCaP (มนุษย์
เซลล์มะเร็งต่อมลูกหมากที่ได้มาจาก ATCCs) ถูกนำมาปลูกใน RPMI
(ชีวิต Technologies Ltd) เสริมด้วย FBS 10% และ 2 mm
กลูตา (เซลล์ bicalutamide ทนได้มาจาก LNCaP-Rbic
LNCaP และแยกโดย Pignatta et al, [20].) ถูกเก็บรักษาไว้ใน
สูตรเดิมของเซลล์ของผู้ปกครองเสริมด้วย 20 ไมครอนของ (R) -
bicalutamide (Casodexs) U87 (เซลล์ glioblastoma ที่ได้มาจากมนุษย์
จาก ATCCs) ถูกนำมาปลูกในอินทรีขั้นต่ำที่จำเป็นขนาดกลาง
(EMEM, ATCCs) เสริมด้วย 10% FBS.
ทุกเซลล์เพาะเลี้ยงในบรรยากาศของ 95% อากาศและ 5% CO2
ที่ 37 ° C 100 มมแผ่นวัฒนธรรม ทุกเซลล์ที่ใช้ในการ
ศึกษาครั้งนี้ได้รับการตรวจสอบเป็นระยะการปนเปื้อน Mycoplasma
โดย MycoAlert ™ Mycoplasma การตรวจ Kit (Lonza,
บาเซิลวิตเซอร์แลนด์)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

. เซลล์วัฒนธรรมวัวของเยื่อบุเซลล์ ( baec ) ที่ได้จากวัวหลอดเลือดแดงเอออร์ตาส่วนอกโดยการย่อยด้วยเอนไซม์ร่วมกับ 0.05% ( w / v ) ประเภทคอลลาจีเนส ( Worthington , เลควูด , NJ ) และเติบโตในดัลเบโค่คือแก้ไขนกอินทรีขนาดกลาง ( dmem ซิกม่า Aldrich , มิลาน , อิตาลีเสริมด้วย FBS 20% fetal bovine serum ( euroclone , มิลานอิตาลี ) , 100 μ g / ml เซลล์ endothelial ( ซิกม่า Aldrich เสริมการเจริญเติบโตมิลาน , อิตาลี ) , 100 u เพนนิซิลิน , 100 μ g / ml และสเตร็ปโตมัยซิน2 มิล กลูตามีน ( ซิกม่า Aldrich , มิลาน , อิตาลี ) สายสะดือมนุษย์เซลล์เยื่อบุหลอดเลือด ( เพิ่ ) ที่แยกได้จากสายสะดือของรวบรวมจากการตั้งครรภ์ที่ไม่ซับซ้อน และการเติบโต 1% ( w / v )เจลาติน ( ซิกม่า Aldrich ) ใน ebm-2 ขนาดกลาง ( Power ) a549 ( มนุษย์มะเร็งปอดและเซลล์พลูริโพเทนท์ embryonal nt2-d1 ( มนุษย์ )เซลล์มะเร็งได้ ) กข ( rhabdomyosarcomaderived มนุษย์เซลล์ ) , imr90 ( ปอดตัวอ่อนมนุษย์ได้มาจาก )hek293 ( ไตเซลล์ตัวอ่อนมนุษย์ได้ a375 ( มนุษย์ )เนื้องอกและเซลล์ ) panc-1 ( carcinomaderived ตับอ่อนของมนุษย์เซลล์ ) , และ t98g ( เซลส์สมองของมนุษย์และเซลล์ )ได้จาก atccs ( ประเภทคอลเลกชันอเมริกันวัฒนธรรมกัวลาลัมเปอร์ , VA ) hacat ( มนุษย์เองความเคราติโนไซต์เซลล์ ) ที่ได้รับจากการให้บริการ ( Eppelheim Cell ,เยอรมนี ) เซลล์เหล่านี้ถูกเก็บรักษาไว้ใน dmem เสริมร้อยละ 10 ซึ่งใช้ความร้อน FBS 100 u เพนนิซิลิน , 100 μกรัม / มิลลิลิตรยารักษากรด 2 มิลลิเมตร mcf-7 ( เต้านมของมนุษย์ cancerderivedเซลล์ , จาก atccs ) และ brc-230 ( เต้านมของมนุษย์ cancerderivedเซลล์ที่แยกได้โดย amadori et al . [ 19 ] ) ถูกเก็บรักษาไว้ในdmem / แฮมของ F12 ( 1 : 1 ) ผสม 10% FBS 2 มม. และและอินซูลิน ( 10 μ g / ml ; ซิกม่า Aldrich ) lncap ( มนุษย์มะเร็งต่อมลูกหมากได้มาเซลล์ จาก atccs ) ปลูกใน RPMI( ไลฟ์ เทคโนโลยี จำกัด ) เสริมด้วย FBS 10% และ 2 มม.กลูตามีน . lncap rbic ( เซลล์ ป้องกันได้จากไบแคลูแตไมด์lncap และแยกโดย pignatta et al . [ 20 ] ) ไว้ในกลางของผู้ปกครองเซลล์เสริม 20 μ M ( R ) เดียวกันไบแคลูแตไมด์ ( casodexs ) u87 ( เซลส์มนุษย์ได้มาเซลล์จาก atccs ) ปลูกในจำเป็นที่สุดของนกอินทรีขนาดกลาง( มเ ม atccs , ) เสริมด้วย 10% FBSทุกเซลล์เพาะเลี้ยงในบรรยากาศของ 95% และ 5% CO2 ในอากาศที่ 37 ° C ในจานเพาะ 100 มม. ทุกเซลล์ที่ใช้ในการศึกษาการปนเปื้อน Mycoplasma ถูกตรวจสอบเป็นระยะ ๆโดย mycoalert ™ไมโคพลาสมา ( Power ชุดตรวจ ,บาเซิล , สวิสเซอร์แลนด์ )