The solution was stirred vigorously for 10 min without foaming and centrifuged
at 13,000g for 1 h at 4 C (Z236 K, HERMLE Labortechnik GmbH,
Wehingen, German). Solid (NH4)2SO4 was added slowly to 35% saturation
with constant stirring, and the solution was centrifuged at
10,000g for 15 min at 4 C. The supernatant was brought to 48%
saturation. The myosin pellet was collected by centrifugation at
10,000g for 15 min at 4 C and stored at 20 C until the assay.
Prior to use, the myosin was suspended in 1 mM EDTA/0.6 M
KCl/40 mM KH2PO4/20 mM K2HPO4 (pH 6.5) and dialysed against
two changes of the same buffer. The myosin was dialysed a third
time against the same buffer but without EDTA. Concentration of
the extracted myosin was determined by bicinchoninic acid
(BCA) assay (Beyotime Institute of Biotechnology, Jiangsu, China).
2.
วิธีการแก้ปัญหาที่ถูกกวนอย่างจริงจังเป็นเวลา 10 นาทีโดยไม่เกิดฟองและหมุนเหวี่ยง
ที่ 13,000g เป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 4 C (Z236 K, HERMLE Labortechnik GmbH,
Wehingen, เยอรมัน) แข็ง (NH4) 2SO4 ถูกเพิ่มเข้ามาอย่างช้า ๆ ถึง 35% อิ่มตัว
กับกวนคงที่และวิธีการแก้ปัญหาที่ถูกหมุนเหวี่ยงที่
10,000g นาน 15 นาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสใสถูกนำตัวไป 48%
อิ่มตัว เม็ด myosin ถูกเก็บรวบรวมโดยการหมุนเหวี่ยงที่
10,000g นาน 15 นาทีที่ 4 C และเก็บไว้ที่? 20 C จนการทดสอบ.
ก่อนที่จะใช้ myosin ถูกระงับใน 1 มิลลิ EDTA / 0.6 M
KCl / 40 มิลลิ KH2PO4 / 20 มิลลิ K2HPO4 (pH 6.5) และไตกับ
สองการเปลี่ยนแปลงของบัฟเฟอร์แบบเดิม myosin ถูกไตที่สาม
เวลากับบัฟเฟอร์เดียวกัน แต่ไม่ EDTA ความเข้มข้นของ
สารสกัด myosin ถูกกำหนดโดยกรด bicinchoninic
(BCA) ในการตรวจ (Beyotime สถาบันเทคโนโลยีชีวภาพ, เจียงซู, จีน).
2
การแปล กรุณารอสักครู่..
