We have established the extraction

We have established the extraction method of the total proteins of Antiaris toxicaria seed and the appropriate conditions for the two-dimensional electrophoresis (2-DE) of Antiaris toxicaria seed proteome. Through integrating and optimizing various conditions, we also established the 2-DE system including the sample preparation method with Tris-HCL based on TCA-actone, and the first-dimensional electrophoresis with immobilized pH gradients isoelectric focusing and the second dimensional electrophoresis with vertical electrophoresis of SDS-PAGE. We have gained a good 2-DE map in the analysis of sample preparation, sample resolution, isoelectric focusing (IEF), SDS-PAGE and gel staining. In order to explore the extraction method of proteome and technique of 2-DE, we compared the extraction method between the TCA-actone and the Tris-HCl, and improved the key steps of 2-DE. The Tris-HCl extraction was the most appropriate for Antiaris toxicaria seed proteome analysis because of the highest resolution and more informative 2-DE map. Those were the solid basis for the later research of studying on the discrepancy expression proteomics of Antiaris toxicaria Seed

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เราได้สร้างวิธีการสกัดโปรตีนรวม Antiaris toxicaria เมล็ดและเงื่อนไขที่เหมาะสมสำหรับ electrophoresis สองมิติ (2-DE) ของ Antiaris toxicaria เมล็ด proteome รวม และเงื่อนไขต่าง ๆ เพิ่มประสิทธิภาพ เรายังสร้างระบบเดอ 2 รวมถึงวิธีการเตรียมตัวอย่าง ด้วยทริสเรทติ้ง HCL ตาม TCA actone และ electrophoresis มิติแรกกับ pH เอนไซม์ไล่ระดับสี isoelectric เน้น และ electrophoresis มิติที่สอง ด้วย electrophoresis แนวตั้งของ SDS-หน้า เราได้รับแผนที่ 2 เดดีในการเตรียมตัวอย่าง อย่างละเอียด isoelectric เน้น (IEF), การวิเคราะห์องค์กรหน้าและย้อมสีเจ ออกแบบวิธีการสกัดของ proteome และเทคนิคของเดอ 2 เราเปรียบเทียบวิธีการแยกระหว่าง TCA actone และ HCl ตรี และปรับปรุงขั้นตอนสำคัญของเดอ 2 ทริสเรทติ้ง HCl สกัดเหมาะสมสุดสำหรับ Antiaris toxicaria เมล็ด proteome วิเคราะห์เพราะความละเอียดสูงสุด และข้อมูลเพิ่มเติมแผนที่ 2 เด นั้นเป็นพื้นฐานสำหรับการวิจัยภายหลังของการศึกษาโปรตีโอมิกส์นิพจน์ของความขัดแย้งของ Antiaris toxicaria เมล็ดแข็ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เราได้สร้างวิธีการสกัดโปรตีนรวมของเมล็ด Antiaris toxicaria และเงื่อนไขที่เหมาะสมสำหรับอิสองมิติ (2-DE) ของ Antiaris toxicaria โปรตีนเมล็ด ผ่านการบูรณาการและการเพิ่มประสิทธิภาพของเงื่อนไขต่างๆที่เรายังได้จัดตั้งระบบ 2-DE รวมทั้งวิธีการเตรียมสารตัวอย่างที่มีรายชื่อ HCL ทริสขึ้นอยู่กับ TCA-actone และอิเลคแรกมิติที่มีการไล่ระดับสีตรึงค่า pH Isoelectric มุ่งเน้นและอิมิติที่สองกับอิแนวตั้ง ของระบบ SDS-PAGE เราได้รับแผนที่ 2-DE ดีในการวิเคราะห์การเตรียมตัวอย่างละเอียดตัวอย่าง Isoelectric มุ่งเน้น (IEF) SDS-PAGE และย้อมสีเจล เพื่อที่จะสำรวจวิธีการสกัดโปรตีนและเทคนิคของ 2-DE เราเมื่อเทียบกับวิธีการสกัดระหว่าง TCA-actone และ Tris-HCl และปรับปรุงขั้นตอนสำคัญของ 2-DE สกัด Tris-HCl เป็นที่เหมาะสมที่สุดสำหรับ Antiaris toxicaria วิเคราะห์โปรตีนเมล็ดเนื่องจากมีความละเอียดสูงและข้อมูลอื่น ๆ แผนที่ 2-DE สิ่งเหล่านี้เป็นพื้นฐานที่มั่นคงสำหรับการวิจัยต่อมาของการศึกษาเกี่ยวกับการแสดงออกของโปรตีนแตกต่างของ Antiaris toxicaria เมล็ดพันธุ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เราได้สร้างวิธีสกัดของโปรตีนรวมของ antiaris toxicaria เมล็ดพันธุ์และสภาวะที่เหมาะสมสำหรับวิธีแบบสองมิติ ( แผ่น ) antiaris toxicaria เมล็ดโปรตีน . ผ่านการบูรณาการและปรับเงื่อนไขต่าง ๆ เรายังสร้างแผ่นระบบรวมถึงการเตรียมตัวอย่างด้วยวิธี HCl ซึ่งขึ้นอยู่กับ actone TCA ,และครั้งแรกกับมิติวิธีตรึง Ph ไล่สี Isoelectric สำและสองมิติด้วยวิธี SDS-PAGE electrophoresis แนวตั้ง . เราได้รับแผนที่แผ่นที่ดีในการวิเคราะห์การเตรียมตัวอย่างละเอียด Isoelectric สำ ( IEF ) ถูกเจล stainingเพื่อสำรวจวิธีสกัดของโปรตีนและเทคนิคของแผ่น เราเปรียบเทียบวิธีสกัดระหว่างบริษัทและบริษัท actone HCl และปรับปรุงขั้นตอนสำคัญของบริษัท 2-de. HCl การสกัดมีความเหมาะสมมากที่สุดสำหรับ antiaris วิเคราะห์โปรตีโอม toxicaria เมล็ดเพราะความละเอียดสูงสุดและแผนที่แผ่นข้อมูลเพิ่มเติมนั้นคือพื้นฐานที่มั่นคงสำหรับการวิจัยภายหลังจากการศึกษาแสดงความแตกต่างของการแสดงออก antiaris toxicaria เมล็ด