The presence of polyP in tetramers

The presence of polyP in tetramers of TRPM8 was detected by its metachromatic reaction to the cationic dye, o-toluidine blue. PolyP of >5 residues causes a shift in the absorption on maximum of o-toluidine blue toward shorter wavelengths,
i.e., from 630 nm (blue) to 530 nm (violet-red) [38]. PolyP stains a distinctive reddish-purple color on PAGE gels (Fig. 4A, lane 2). The identity of polyP was confirmed by its complete degradation when TRPM8 was incubated with 2 μg/ml scPPX1 (Wurst et al., 1995) for 3 h at 37°C before loading on the gel (Fig. 4A, lane 3). The presence of TRPM8 in lanes 2 and 3 of the gel was confirmed by re-staining the gel with Coomassie blue (lanes 4 and 5). The protein and polyP detected on the native gels migrate at an apparent molecular weight of 490–500 kDa, which corresponds to the molecular weight of TRPM8 in the tetrameric
form. The association of polyP with the TRPM8 protein was confirmed
after each protein purification procedure. A total of 12 native PAGE experiments
were performed for detection of polyP.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สถานะของโปลิใน tetramers ของ TRPM8 พบ โดยปฏิกิริยาของ metachromatic กับสีย้อม cationic บลูโอ toluidine โปลิปปากของ > 5 ตกทำกะดูดซึมบนบลูโอ toluidine ต่อความยาวคลื่นสั้น มากที่สุดเช่น 630 nm (สีฟ้า) กับ 530 nm (ม่วงแดง) [38] โปลิปปากคราบสกปรกสีน้ำตาลสีม่วงโดดเด่นบนหน้า (Fig. 4A เลน 2) ตัวตนของโปลิได้รับการยืนยัน โดยการย่อยสลายสมบูรณ์เมื่อ TRPM8 มี incubated กับ scPPX1 μg/ml 2 (Wurst et al., 1995) สำหรับ h 3 ที่ 37° C ก่อนการโหลดบนเจล (Fig. 4A เลน 3) สถานะของ TRPM8 ในถนนหนทางที่ 2 และ 3 ของเจได้รับการยืนยัน โดยการย้อมสีเจล ด้วย Coomassie blue (ถนนหนทาง 4 และ 5) โปรตีนและโปลิที่พบบนพื้นเมืองการโยกย้ายที่มีน้ำหนักโมเลกุลชัดเจนของ 490-500 kDa ซึ่งตรงกับน้ำหนักโมเลกุลของ TRPM8 ในการ tetramericแบบฟอร์มการ สมาคมโปลิกับโปรตีน TRPM8 ได้รับการยืนยันหลังจากแต่ละขั้นตอนฟอกโปรตีน จำนวน 12 เจ้าหน้าทดลองได้ดำเนินการตรวจโปลิ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การปรากฏตัวของปะการังใน tetramers ของ TRPM8 ถูกตรวจพบโดยปฏิกิริยา Metachromatic ในการย้อมประจุบวกที่ o-toluidine สีฟ้า ปะการังของ> 5 ตกค้างที่ทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงในการดูดซึมสูงสุดของ o-toluidine
สีฟ้าต่อความยาวคลื่นสั้นกว่าเช่นจาก630 นาโนเมตร (สีฟ้า) 530 นาโนเมตร (สีม่วงสีแดง) [38] ปะการังคราบสีแดงม่วงที่โดดเด่นในเจลหน้า (รูป. 4A เลน 2) ตัวตนของปะการังที่ได้รับการยืนยันจากการย่อยสลายสมบูรณ์เมื่อ TRPM8 ถูกบ่ม 2 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร scPPX1 (ไส้กรอก et al., 1995) เป็นเวลา 3 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสก่อนที่จะโหลดในเจล (รูป. 4A, ช่อง 3) การปรากฏตัวของ TRPM8 ในเลนที่ 2 และ 3 ของเจลที่ได้รับการยืนยันจากการย้อมสีใหม่เจลที่มี Coomassie สีฟ้า (ช่อง 4 และ 5) โปรตีนและปะการังที่ตรวจพบในเจลพื้นเมืองโยกย้ายที่มีน้ำหนักโมเลกุลที่ชัดเจนของ 490-500 กิโลดาลตันซึ่งสอดคล้องกับน้ำหนักโมเลกุลของ TRPM8 ใน tetrameric
รูปแบบ สมาคมของปะการังที่มีโปรตีน TRPM8
ได้รับการยืนยันหลังจากที่แต่ละขั้นตอนการทำโปรตีนให้บริสุทธิ์ ทั้งหมด 12
หน้าทดลองพื้นเมืองได้ดำเนินการในการตรวจหาติ่ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

มีติ่งเนื้อใน tetramers ของ trpm8 ถูกตรวจพบโดยการย้อม metachromatic ปฏิกิริยาบวก o-toluidine สีฟ้า ติ่งเนื้อของ > 5 ตกค้าง สาเหตุการเปลี่ยนแปลงในการดูดซึมสูงสุดของ o-toluidine สีฟ้าที่มีความยาวคลื่นสั้นกว่า
ได้แก่ 630 nm ( สีฟ้า ) 530 nm ( ม่วงแดง ) [ 38 ] ติ่งเนื้อคราบที่โดดเด่นสีแดงสีม่วงบนเจลหน้า ( รูปที่ 4 ซอย 2 )เอกลักษณ์ของเซลที่ได้รับการยืนยันโดยการย่อยสลายสมบูรณ์เมื่อ trpm8 ถูกบ่มด้วย 2 μ g / ml scppx1 ( ไส้กรอก et al . , 1995 ) 3 H ที่ 37 ° C ก่อนโหลดบนเจล ( ภาพที่ 4 ซอย 3 ) การปรากฏตัวของ trpm8 ในช่อง 2 และ 3 ของเจลที่ได้รับการยืนยันโดยเป็นคราบเจลกับเหล่านี้น่าจะเป็นสีฟ้า ( ช่องที่ 4 และ 5 )โปรตีนและเนื้อตรวจพบในเจลพื้นเมืองอพยพที่ชัดเจน และน้ำหนักโมเลกุลของ 490 500 กิโลดาลตัน ซึ่งสอดคล้องกับโมเลกุลของ trpm8 ในรูปแบบ tetrameric

สมาคมร่วมโต๊ะกับ trpm8 โปรตีนโปรตีนบริสุทธิ์ยืนยัน
หลังจากที่แต่ละขั้นตอน รวม 12 หน้าพื้นเมือง
แสดงการทดลองการตรวจหาติ่งเนื้อ