Before inoculation of parasites,hos

Before inoculation of parasites,
host cells were incubated for 24 h. Both Vero and J774 cells
were maintained in the same condition (at 37 C in an atmosphere
of 95% air and 5% CO2). The tachyzoites of NC-1 isolate were cultured
on a 24-h-old monolayer of Vero cell line and maintained
in DMEM Medium (Sigma Co., USA) supplemented with 2% fetal
calf serum, penicillin/ml (10,000 U), streptomycin/ml (100 lg)
and streptomycin (25 lg) (Invitrogen, USA) at 37 C with 5% CO2
(Hemphill et al., 1996). Tachyzoites were harvested from infected
cell cultures when about 80–90% of the Vero host cells had lysed,
as determined by microscopic examination of monolayers for cytopathic
effects (CPE), and then counted using a hemacytometer. Viability
of the partially purified tachyzoites was evaluated by trypan
blue (Gibco) exclusion test

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ก่อน inoculation ของปรสิตเซลล์โฮสต์ได้รับการกกใน 24 h เซลล์ Vero และ J774ยังคงไว้ในสภาพเดิม (ที่ 37 C ในบรรยากาศของอากาศ 95% และ 5% CO2) Tachyzoites ของโปรตีน NC 1 ได้เพาะเลี้ยงบน monolayer อายุ 24 ชม.ของ Vero บรรทัดของเซลล์ และรักษาใน DMEM (บริษัท Sigma สหรัฐอเมริกา) เสริม ด้วย 2% ทารกในครรภ์ซีรั่มน่อง ยา เพนนิซิลลิน/ml (10,000 U), streptomycin/มล. (100 lg)และ streptomycin (25 lg) (Invitrogen สหรัฐอเมริกา) ที่ 37 C กับ 5% CO2(Hemphill et al. 1996) Tachyzoites ถูกเก็บเกี่ยวจากการติดเชื้อวัฒนธรรมเซลล์เมื่อประมาณ 80-90% ของเซลล์ Vero โฮสต์มี lysedตามกำหนด monolayers สำหรับกล้องจุลทรรศน์ cytopathicผล (CPE), และตรวจนับใช้ hemacytometer ชีวิตของ tachyzoites บริสุทธิ์บางส่วนประกอบ ด้วย trypanสีฟ้า (Gibco) ยกเว้นการทดสอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ก่อนที่จะฉีดวัคซีนของปรสิต
เซลล์โฮสต์ถูกบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ทั้งสอง Vero และ J774 เซลล์
ถูกเก็บรักษาในสภาพเดียวกัน (ที่ 37 องศาเซลเซียสในบรรยากาศที่
95% อากาศและ 5% CO2) tachyzoites ของ NC-1 แยกเลี้ยง
ใน monolayer 24-H-เก่าสายพันธุ์ของเซลล์ Vero และการบำรุงรักษา
ใน DMEM ปานกลาง (Sigma Co. , USA) เสริมด้วย 2% ของทารกในครรภ์
ซีรั่มน่อง penicillin / ml (10,000 U), streptomycin / ml (100 LG)
และ streptomycin (25 LG) (Invitrogen, สหรัฐอเมริกา) ที่ 37 องศาเซลเซียส 5% CO2
(Hemphill et al., 1996) Tachyzoites ถูกเก็บเกี่ยวจากที่ติดเชื้อ
เซลล์เพาะเลี้ยงเมื่อประมาณ 80-90% ของเซลล์โฮสต์ Vero ได้ lysed,
ตามที่กำหนดโดยตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ monolayers สำหรับ cytopathic
ผลกระทบ (CPE) และนับจากนั้นใช้ hemacytometer ความมีชีวิต
ของ tachyzoites บริสุทธิ์บางส่วนถูกประเมินโดย Trypan
สีฟ้า (Gibco) การทดสอบการยกเว้น