2. Materials and methods2.1. Shell

2. Materials and methods
2.1. Shell eggs and chicken fillets
Fresh shell eggs and chicken meat were purchased at local supermarkets
and stored at 5
C until use (next day) at the Experimental
Seafood Processing Laboratory in Pascagoula, Mississippi.
2.2. Bacterial strains and growing conditions
A 3-strain mixture of S. enterica (Salmonella enteric serovar
Enteritidis E190-88, S. Typhimurium ATCC 14028, and S. Montevideo
ATCC 8387) was used. Salmonella culture was maintained
on tryptic soy agar (TSA) with 0.6% yeast extract (TSAYE; Difco
Laboratories, Sparks, MD, USA) at 4
C. Salmonella culture was
grown in trypticase soy broth with 0.6% yeast extract and incubated
at 37
C for 18e24 h with continuous agitation (100 rpm) on a
MaxQ 2000 platform shaker. Each Salmonella culture was centrifuged
at 7000 g for 10 min. The supernatant was discarded and the
cell pellet was washed and re-suspended in 10 ml sterile 0.1%
peptone solution (Difco Laboratories). The three strains were mixed
with an equal volume to give approximately 1089 CFU ml1
.
2.3. Inoculation of shell eggs and chicken breast fillets
The samples (25 g chicken fillets or whole shell egg) were
inoculated with Salmonella by immersing in 0.1 peptone solution
which contained 1089 CFU ml1 for 1 min. After immersion,
samples were aseptically removed from the immersion solution
and drained for 15 s then aseptically placed in sterile plastic cups
and air-dried at 22
C for 30 min (to allow bacterial attachment) in
the biosafety cabinet prior to X-ray treatments.
2.4. Description of RS 2400 radiator and generation of X-ray
Specific irradiation doses (0.1, 0.5, 1.0, and 2.0 kGy) were
generated using the RS 2400 industrial cabinet X-ray irradiator
(Rad Source Technologies, Inc.) according to Mahmoud, 2009.
Briefly, at higher currents (mA), more electrons leave the filament.
The electrons gather energy, equal to the potential difference; the
higher the potential difference, the more energy the electrons
gather. When the electrons reach the gold target plated inside the
inner tube, they interact with the gold atoms and emit photons
called X-rays. The X-ray doses in the treatment chamber were
determined using a dosimeter (Rad Sources Technology. Inc., GA).
2.5. Treatment of inoculated shell eggs and chicken breast fillets
with X-ray and microbial enumeration
Inoculated shell eggs and chicken breast fillets samples were
placed in sterile plastic bags inside the exposure chamber. Samples
were treated with 0.0, 0.1, 0.5, 1.0, and 2.0 kGy X-ray doses at 22
C
and 55e60% relative humidity. At each examined dose, samples
were pulled from the exposure chamber for microbial enumeration
to determine surviving cell populations. Samples were mixed with
100 or 225 ml (for whole shell egg and chicken fillet samples,
respectively) of 0.1% sterilized peptone water in a sterile 400-ml
stomaching bag (Fisher Scientific, Pittsburgh, NJ) and homogenized
for 2 min using a Stomacher 80 Lab-blender (Stomacher 400,
Seward, London, UK). Serial 10-fold dilutions were prepared in 0.1%
peptone water (Difco - Becton Dickinson, Sparks, MD, USA). Surviving
bacterial populations were evaluated using a non-selective
medium (TSA for 6 h at 37
C) with the appropriate selective medium
overlay (XLD for 18 h at 37
C). Colonies were counted and the
results expressed as log CFU for whole egg or g1
.
2.6. Effect of X-ray on the inherent microflora in shell eggs and
chicken breast fillets
Uninoculated-untreated and uninoculated-treated chicken
(25 g) and shell egg samples with the lowest and highest X-ray
doses (0.1 and 2.0 and 0.1 and 1.0 kGy, for chicken and shell eggs,
respectively) were packaged separately into plastic clamshell containers
(Monte Package Company, MI, USA), wrapped in PVC film
(AEP Industries Inc., NJ, USA; the permeability of the film was
9.6 g m2 24 h for H2O vapor, 133 cc m2 24 h for O2 and
3200 cc m2 24 h for CO2) and stored at 5
C for 20 days. Samples
were examined for psychrotrophs and mesophiles counts at 0, 5, 10,
15, and 20 days. Samples were mixed with 0.1% sterilized peptone
water in a sterile 400-ml stomaching bag and homogenized for
2 min using a Stomacher 80 Lab-blender. Serial 10-fold dilutions
were prepared in 0.1% peptone water and a 100 ml or 1000 ml of each
dilution was spread on TSA. For mesophilic counts, 0.1/1.0 ml of
each dilution was plated ontoTSA and incubated at 37 O C for 24 h.
For psychrotrophic counts, 0.1/1.0 ml of each dilution was plated
onto TSA and incubated at 5 O C for 10 days. Viable counts were
expressed as log CFU per egg or g1
.
2.7. Statistical analysis
All experiments were replicated three times using two samples
per experiment for a total of six data points per treatment. Data
were pooled and the mean values and standard deviations were
determined using a Student's t-test (1 tail/equal variance), with
Microsoft Excel (Microsoft Windows XP), and were considered to
be significant differences when p < 0.05.
3. Resu

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. เปลือกไข่ และไก่แล่ซื้อที่ซุปเปอร์มาร์เก็ตท้องถิ่นสดเปลือกไข่และเนื้อไก่และเก็บไว้ที่ C 5 จนถึงการใช้ (ต่อวัน) ใน Experimentalอาหารทะเลแปรรูปปฏิบัติ Pascagoula มิสซิสซิปปี2.2. แบคทีเรียสายพันธุ์และสภาพการเจริญเติบโตต้องใช้ 3 ส่วนผสมของ S. enterica (ซัล enteric serovarEnteritidis E190 88, S. Typhimurium ATCC 14028 และ มอนเตวิเดโอ s ได้ใช้ ATCC 8387) เป็นรักษาวัฒนธรรมระดับในถั่วเหลือง tryptic agar (TSA) กับ 0.6% ยีสต์สกัด (TSAYE Difcoห้องปฏิบัติการ สปาร์ค MD สหรัฐอเมริกา) ใน 4 สาย C. วัฒนธรรมคือปลูก trypticase ซุปถั่วเหลืองกับ 0.6% ยีสต์สกัด และ incubatedที่ 37 C สำหรับ 18e24 h ด้วย (100 rpm) อาการกังวลต่ออย่างต่อเนื่องในการเชคเกอร์ MaxQ 2000 แพลตฟอร์ม วัฒนธรรมแต่ละระดับมี centrifugedที่ g 7000 สำหรับ 10 นาที Supernatant ถูกละทิ้งและล้าง และหยุดชั่วคราวอีกครั้งใน 10 มล.ผ่านการฆ่าเชื้อ 0.1% เซลล์เม็ดpeptone โซลูชัน (Difco Laboratories) มีผสมสายพันธุ์ 3ด้วยปริมาณเท่ากันจะให้ประมาณ 1089 CFU ml1.2.3. inoculation ของเปลือกไข่และอกไก่แล่มีตัวอย่าง (แล่ไก่ 25 กรัมหรือไข่ทั้งเปลือก)inoculated กับสาย โดยแช่ในโซลูชัน peptone 0.1ที่อยู่ 1089 ml1 CFU ใน 1 นาที หลังจากแช่ตัวอย่างถูกเอาออกจากโซลูชันแช่ asepticallyและระบายน้ำสำหรับ 15 s aseptically วางในถ้วยพลาสติกกระบอกและ air-dried ที่ C 22 ใน 30 นาที (ให้แนบเชื้อแบคทีเรีย) ในbiosafety ที่ตู้ก่อนเอกซเรย์รักษา2.4 การอธิบายของหม้อน้ำ RS 2400 และรุ่นเอ็กซ์เรย์วิธีการฉายรังสีเฉพาะปริมาณ (0.1, 0.5, 1.0 และ 2.0 kGy)โดย irradiator เอกซเรย์ที่' RS 2400 มีอุตสาหกรรมตู้(Rad แหล่งเทคโนโลยี Inc.) ตาม Mahmoud, 2009สั้น ๆ ที่สูงกระแส (mA), เพิ่มเติมอิเล็กตรอนปล่อยใยพลังงาน เท่ากับความต่างศักย์ รวบรวมอิเล็กตรอน ที่สูงกว่าความต่างศักย์ พลังงานมากขึ้นอิเล็กตรอนรวบรวม เมื่ออิเล็กตรอนถึงเป้าหมายทองชุบภายในยางใน พวกเขาโต้ตอบกับอะตอมทอง และกิ๊ก photonsเรียกว่ารังสีเอกซ์ มีปริมาณเอกซเรย์ในห้องรักษากำหนดใช้ dosimeter (ราษฎร์แหล่งเทคโนโลยี อิงค์ GA)2.5 การรักษา inoculated เปลือกไข่และอกไก่แล่เอ็กซ์เรย์และแจงนับจุลินทรีย์Inoculated เปลือกไข่และตัวอย่างอกไก่แล่ใส่ในถุงพลาสติกที่ใส่ภายในห้องแสง ตัวอย่างได้รับการรักษา ด้วย 0.0, 0.1, 0.5, 1.0, 2.0 kGy เอกซเรย์ปริมาณที่ 22 Cและความชื้นสัมพัทธ์% 55e60 ในแต่ละตรวจสอบยา ตัวอย่างถูกดึงมาจากหอแสงสำหรับการแจงนับจุลินทรีย์การกำหนดประชากรเซลล์ที่รอดตาย ตัวอย่างนำมาผสมกับ100 หรือ 225 ml (สำหรับเปลือกทั้งไข่และไก่เนื้อตัวอย่างตามลำดับ) 0.1% sterilized น้ำ peptone กอซ 400 mlstomaching กระเป๋า (Fisher วิทยาศาสตร์ พิตส์เบิร์ก NJ) และ homogenized เป็นกลุ่มใน 2 นาทีใช้เป็นแผงประดับหน้าอก 80 แล็บ-blender (แผงประดับหน้าอก 400เวิร์ด ลอนดอน สหราชอาณาจักร) Dilutions 10-fold ประจำถูกเตรียมใน 0.1%น้ำ peptone (Difco - Becton สัน สปาร์ค MD สหรัฐอเมริกา) รอดมีประเมินประชากรแบคทีเรียใช้ไม่ใช่เลือกปานกลาง (TSA สำหรับ h 6 ที่ 37 C) โดยใช้สื่อที่เหมาะสมซ้อนทับ (XLD สำหรับ h 18 ที่ 37 C) นับได้อาณานิคมและผลลัพธ์ที่แสดงเป็นล็อก CFU สำหรับไข่ทั้งหมดหรือ g1.2.6. ผลของเอกซเรย์ microflora แต่กำเนิดในเปลือกไข่ และอกไก่แล่Uninoculated-ไม่ถูกรักษา และ uninoculated-ถือว่าไก่(25 กรัม) และเปลือกไข่ตัวอย่าง ด้วยเอกซเรย์ต่ำสุด และสูงสุดปริมาณ (0.1 และ 2.0 และ 0.1 และ 1.0 kGy สำหรับไก่ และเปลือกไข่ตามลำดับ) ได้บรรจุแยกลงในภาชนะพลาสติกหอย(บริษัทแพคเกจมอน MI สหรัฐอเมริกา), ห่อฟิล์ม PVC(แอบ จิง NJ สหรัฐ อเมริกา มี permeability ของฟิล์ม9.6 g m2 h 24 สำหรับไอน้ำ H2O, 133 cc m2 h 24 สำหรับ O2 และ3200 cc m2 24 h สำหรับ CO2) และเก็บไว้ที่ 5 C 20 วัน ตัวอย่างมีการตรวจสอบสำหรับ psychrotrophs และ mesophiles นับที่ 0, 5, 1015 และ 20 วัน ตัวอย่างที่ผสมกับ 0.1% sterilized peptoneน้ำในเป็นใส่ 400-มล stomaching กระเป๋า และ homogenized เป็นกลุ่มสำหรับ2 นาทีใช้ blender-แล็บที่แผงประดับหน้าอก 80 Dilutions 10-fold ประจำถูกเตรียมในน้ำ peptone 0.1% และ 100 ml หรือ 1000 ml ของแต่ละเจือจางได้แพร่กระจายไปบน TSA สำหรับตรวจนับ mesophilic, 0.1/1.0 มล.ของเจือจางสารละลายแต่ละถูกชุบ ontoTSA และ incubated ที่ 37 O C ใน 24 ชมสำหรับตรวจนับ psychrotrophic, 0.1/1.0 ml ของแต่ละการเจือจางชุบบน TSA และ incubated ที่ 5 O C 10 วัน ทำงานได้นับได้แสดงล็อก CFU ต่อไข่หรือ g1.2.7. สถิติวิเคราะห์การทดลองทั้งหมดถูกจำลองแบบแล้วสามครั้งโดยใช้ตัวอย่างที่สองต่อทดลองจำนวนจุดข้อมูลที่ 6 ต่อการรักษา ข้อมูลถูกทางถูกพูและค่าเฉลี่ยและส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานกำหนดด้วยการเป็นนักศึกษา t-ทดสอบ (1 หาง/เท่ากับผลต่าง),Microsoft Excel (Microsoft Windows XP), และได้ถือมีความสำคัญมีส่วนต่างจาก p < 0.053. Resu

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 เปลือกไข่และเนื้อไก่เปลือกไข่สดและเนื้อไก่ที่ซื้อมาที่ซูเปอร์มาร์เก็ตในท้องถิ่นและเก็บไว้ที่5 องศาเซลเซียสจนการใช้งาน (วันถัดไป) ในการทดลองในห้องปฏิบัติการอาหารทะเลแปรรูปในปาสคากูล่ามิสซิสซิปปี. 2.2 สายพันธุ์แบคทีเรียและสภาพการเจริญเติบโตผสม 3 สายพันธุ์เอส enterica (Salmonella ลำไส้ serovar Enteritidis E190-88 เอส Typhimurium ATCC 14028 และเอสมอนเตวิเดATCC 8387) ถูกนำมาใช้ วัฒนธรรม Salmonella ถูกเก็บรักษาไว้ในถั่วเหลืองtryptic วุ้น (TSA) ด้วยสารสกัดจากยีสต์ 0.6% (TSAYE; Difco? ห้องปฏิบัติการ, ปาร์กส์, MD, USA) ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส วัฒนธรรม Salmonella ถูกปลูกในน้ำซุปถั่วเหลืองtrypticase ด้วยสารสกัดจากยีสต์ 0.6% และบ่มที่อุณหภูมิ37? C เป็นเวลา 18e24 ชั่วโมงที่มีการกวนต่อเนื่อง (100 รอบต่อนาที) ในMaxQ 2000 แพลตฟอร์มเครื่องปั่น แต่ละวัฒนธรรม Salmonella ถูกหมุนเหวี่ยงที่7,000 กรัมเป็นเวลา 10 นาที สารละลายทิ้งและตะกอนเซลล์ถูกล้างและใหม่ที่ลอยอยู่ใน 10 มล. ผ่านการฆ่าเชื้อ 0.1% การแก้ปัญหาเปปโตน (Difco ห้องปฏิบัติการ) ทั้งสามสายพันธุ์ที่ได้รับการผสมกับปริมาณที่เท่ากันจะให้ประมาณ 1,089 CFU ML1. 2.3 การฉีดวัคซีนของเปลือกไข่และไก่เนื้อเต้านมกลุ่มตัวอย่าง (25 กรัมเนื้อไก่หรือไข่เปลือกทั้งหมด) ได้รับเชื้อด้วยเชื้อSalmonella โดยการแช่ในเปปโตน 0.1 วิธีการแก้ปัญหาที่มี1,089 CFU ML1 เวลา 1 นาที หลังจากแช่ตัวอย่างถูกถอดออกปลอดเชื้อจากการแก้ปัญหาการแช่และเนื้อสำหรับ15 วินาทีแล้ววางปลอดเชื้อในถ้วยพลาสติกปลอดเชื้อและอากาศแห้งที่22 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาที (เพื่อช่วยให้สิ่งที่แนบมาของเชื้อแบคทีเรีย) ในตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพก่อนที่จะมีการรักษาเอ็กซ์เรย์. 2.4 คำอธิบายของอาร์เอส 2400 หม้อน้ำและการสร้าง X-ray ปริมาณการฉายรังสีเฉพาะ (0.1, 0.5, 1.0 และ 2.0 กิโลเกรย์) ถูกสร้างขึ้นโดยใช้อาร์เอส2400 ตู้อุตสาหกรรมฉายรังสีเอ็กซ์เรย์(ล้อที่มา Technologies, Inc) ตามมาห์มุด 2009 . สั้น ๆ ที่กระแสสูง (MA) อิเล็กตรอนออกจากไส้หลอด. อิเล็กตรอนรวบรวมพลังงานเท่ากับความแตกต่างที่อาจเกิดขึ้น สูงกว่าความแตกต่างที่มีศักยภาพพลังงานมากขึ้นอิเล็กตรอนรวบรวม เมื่ออิเล็กตรอนบรรลุเป้าหมายทองคำชุบภายในท่อภายในพวกเขามีปฏิสัมพันธ์กับอะตอมทองและปล่อยโฟตอนที่เรียกว่ารังสีเอกซ์ ปริมาณรังสีเอกซ์ในห้องรักษาที่ถูกกำหนดโดยใช้ dosimeter (ล้อแหล่งที่มาของเทคโนโลยี. อิงค์ GA). 2.5 การรักษาเชื้อเปลือกไข่และไก่เนื้อเต้านมด้วย X-ray และการแจงนับจุลินทรีย์เชื้อเปลือกไข่และไก่เนื้อตัวอย่างเต้านมที่ถูกวางไว้ในถุงพลาสติกปลอดเชื้อภายในห้องแสง ตัวอย่างได้รับการรักษาด้วย 0.0, 0.1, 0.5, 1.0 และ 2.0 กิโลเกรย์ปริมาณรังสีเอกซ์ที่ 22 องศาเซลเซียสและ55e60% ความชื้นสัมพัทธ์ ในแต่ละปริมาณการตรวจสอบตัวอย่างที่ถูกดึงออกมาจากห้องแสงสำหรับการแจงนับจุลินทรีย์เพื่อตรวจสอบการมีชีวิตรอดของประชากรเซลล์ ตัวอย่างผสมกับ100 หรือ 225 มล. (ไข่เปลือกทั้งและตัวอย่างเนื้อไก่ตามลำดับ) 0.1% น้ำเปปโตนผ่านการฆ่าเชื้อในการฆ่าเชื้อ 400 มล. ถุง stomaching (ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์, พิตต์, นิวเจอร์ซีย์) และปั่นเป็นเวลา2 นาทีโดยใช้ Stomacher 80-Lab เครื่องปั่น (Stomacher 400, เอิร์ด, ลอนดอนสหราชอาณาจักร) อนุกรมเจือจาง 10 เท่าได้จัดทำขึ้น 0.1% น้ำเปปโตน (Difco - Becton ดิกคินสันปาร์กส์, MD, USA) รอดตายประชากรแบคทีเรียได้รับการประเมินโดยใช้ไม่ได้รับเลือกปานกลาง(TSA เวลา 6 ชั่วโมงที่ 37 องศาเซลเซียส) กับสื่อที่เหมาะสมเลือกซ้อนทับ(XLD 18 ชั่วโมงที่ 37 องศาเซลเซียส) อาณานิคมนับและผลแสดงเป็น log CFU ไข่ทั้งหมดหรือ g1. 2.6 ผลของรังสีเอกซ์ในจุลินทรีย์ที่อยู่ในเปลือกไข่และไก่เนื้อเต้านมUninoculated-ได้รับการรักษาและไก่ uninoculated รับการรักษา(25 กรัม) และตัวอย่างไข่เปลือกต่ำสุดและสูงสุด X-ray ปริมาณ (0.1 และ 2.0 และ 0.1 และ 1.0 กิโลเกรย์ สำหรับไก่และไข่เปลือกตามลำดับ) ถูกบรรจุลงในภาชนะแยกหอยพลาสติก(Monte แพคเกจ บริษัท , MI, USA) ห่อด้วยฟิล์มพีวีซี(AEP Industries Inc. , นิวเจอร์ซีย์สหรัฐอเมริกา; การซึมผ่านของภาพยนตร์เรื่องนี้เป็น9.6 กรัม 24 m2 เอชไอ H2O สำหรับ 133 ซีซี m2 24 ชั่วโมงสำหรับ O2 และ3200 ซีซี m2 24 ชั่วโมงสำหรับ CO2) และเก็บไว้ที่ 5? C เป็นเวลา 20 วัน ตัวอย่างถูกตรวจสอบสำหรับ psychrotrophs และจำนวน mesophiles ที่ 0, 5, 10, 15 และ 20 วัน ตัวอย่างผสมกับ 0.1% เปปโตนฆ่าเชื้อน้ำในการฆ่าเชื้อถุงstomaching 400 มล. และปั่นสำหรับ2 นาทีโดยใช้ Stomacher 80-Lab เครื่องปั่น อนุกรมเจือจาง 10 เท่าได้จัดทำในน้ำเปปโตน0.1% และ 100 มล. หรือ 1,000 มล. ของแต่ละเจือจางถูกแพร่กระจายบนTSA สำหรับการนับ mesophilic, 0.1 / 1.0 มิลลิลิตรเจือจางแต่ละชุบontoTSA และบ่มที่ 37 OC 24 ชม. สำหรับการนับ psychrotrophic, 0.1 / 1.0 มิลลิลิตรเจือจางแต่ละชุบบนTSA และบ่มที่ 5 OC เป็นเวลา 10 วัน นับทำงานได้ถูกแสดงเป็น log CFU ต่อไข่หรือ g1. 2.7 การวิเคราะห์ทางสถิติการทดลองทั้งหมดถูกจำลองแบบสามครั้งโดยใช้สองตัวอย่างต่อสำหรับการทดสอบทั้งหมดหกจุดข้อมูลต่อการรักษา ข้อมูลที่ได้รวบรวมและค่าเฉลี่ยและค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานที่ถูกกำหนดโดยใช้นักศึกษาt-test (1 หาง / แปรปรวนเท่ากัน) กับMicrosoft Excel (Microsoft Windows XP) และได้รับการยกย่องว่ามีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญเมื่อp <0.05. 3 resu