The participating farmers, resident

The participating farmers, residents and control group were asked to donate blood samples to
measure cholinesterase activity. All samples were collected in 4 mL vacuum tubes. In Goianápolis,
blood samples were collected by health professionals from the local Secretary of Health. In Taquara,
they were collected by a trained pharmacist involved in the project. Samples were sent to the
Laboratory of Toxicology within a maximum of 4 hours after collection.
In this study, a farmer was considered to be in the exposure period up to 5 days after using ChE
inhibitor pesticides (organophosphorous and/or carbamates) and in the non-exposure period after
15 days not using ChE inhibitor pesticides. Information about ChE inhibitor pesticide use was obtained
directly from the farmers before sample collection. Blood samples from the residents were collected at
the same time as those from the farmers.
Upon arrival at the laboratory, blood samples were centrifuged, the erythrocyte portion hemolysated
in a buffer solution (0.02 M, pH 7.6), and the fractions kept frozen (−20 °C) until analyzed. A
modified Ellman method [27,28] was used, which is based on the hydrolysis of the substrate
(acetylthiocholine or butyrylthiocholine) by each enzyme and reaction of the formed thiol group with
ditionitrobenzoic acid (DTNB), yielding nitrobenzoic acid, which was quantified at 420 nm (Shimadzu
UV/VIS 1650 PC spectrophotometer). Enzyme activity was determined against a standard curve of
L-cysteine (R2 = 0.9992), which underwent the same colorimetric reaction. AChE (μmoles/min/mL)
and BChE (μmoles/min/mg protein) were determined within 3–5 and 1–3 days after blood collection,
respectively, periods in which the enzyme activities did not vary significantly (n = 5, p = 0.002).
Precision ranged from 3.5 to 14.5% for AchE, and from 1.7 to 4.1% for BChE. Acetylthiocholine,
butyrylthiocholine, L-cysteine, albumin and DTNB were purchased from Sigma Aldrich®. Folin
reagent (for protein determination) was obtained from Merck KGaA®, and sodium phosphate tribasic
dodecahydrate (for the buffer solution) was obtained from Vetec Quimica Fina.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เกษตรกรที่เข้าร่วม คน และกลุ่มควบคุมถูกขอให้บริจาคเลือดตัวอย่างที่วัดนเอสเทอเรส ตัวอย่างทั้งหมดถูกเก็บไว้ในหลอดสุญญากาศ 4 mL ใน Goianápolisตัวอย่างเลือดเก็บรวบรวม โดยผู้เชี่ยวชาญด้านสุขภาพจากเลขานุการสุขภาพท้องถิ่น ใน Taquaraพวกเขาถูกรวบรวม โดยเภสัชกรผ่านการฝึกอบรมที่เกี่ยวข้องกับโครงการ ตัวอย่างถูกส่งไปปฏิบัติของพิษวิทยาภายใน 4 ชั่วโมงหลังจากคอลเลกชันได้สูงสุดในการศึกษานี้ เกษตรกรถือว่าอยู่ในระยะเวลาเปิดรับแสงค่าไปอีก 5 วันหลังจากใช้ ChEยาฆ่าแมลงสารยับยั้ง (organophosphorous / carbamates) และ ในระยะเวลาไม่เปิดเผยหลังจาก15 วันที่ไม่ได้ใช้ยาฆ่าแมลงสารยับยั้ง ChE ข้อมูลเกี่ยวกับการใช้ยาฆ่าแมลงสารยับยั้ง ChE ได้รับโดยตรงจากเกษตรกรก่อนเก็บตัวอย่าง ตัวอย่างเลือดจากคนที่ถูกเก็บรวบรวมที่เวลาเดียวกันเป็นทั้งจากเกษตรกรเมื่อมาถึงที่ห้องปฏิบัติการ เลือดตัวอย่างที่ centrifuged, hemolysated ส่วนของเม็ดเลือดแดงในการแก้ปัญหาบัฟเฟอร์ (0.02 M, pH 7.6), และการเศษส่วนเก็บแช่แข็ง (−20 ° C) จนกระทั่งวิเคราะห์ Aปรับเปลี่ยนวิธี Ellman [27,28] ใช้ ซึ่งยึดไฮโตรไลซ์ของพื้นผิว(acetylthiocholine หรือ butyrylthiocholine) โดยแต่ละเอนไซม์และปฏิกิริยาของกลุ่ม thiol รูปแบบด้วยกรด ditionitrobenzoic (DTNB), ผลผลิตกรด nitrobenzoic ซึ่งถูก quantified ที่ 420 nm (Shimadzuเครื่องทดสอบกรดด่าง UV/VIS 1650 PC) เอนไซม์ถูกกำหนดจากเส้นโค้งมาตรฐานของL-cysteine (R2 = 0.9992), ซึ่งแต่ละปฏิกิริยาเทียบเคียงกัน AChE (μmoles/min/มล.)และ BChE (μmoles/min/มิลลิกรัม โปรตีน) ถูกกำหนดภายใน 3-5 และ 1-3 วันหลังจากที่เก็บเลือดตามลำดับ รอบระยะเวลาที่กิจกรรมของเอนไซม์ได้ไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ (n = 5, p = 0.002)ความแม่นยำอยู่ในช่วง 3.5 ถึง 14.5% ปวด และ จาก 1.7 4.1% สำหรับ BChE Acetylthiocholinebutyrylthiocholine, L-cysteine, albumin และ DTNB ที่ซื้อจากซิก Aldrich ® Folinรีเอเจนต์ (สำหรับการกำหนดโปรตีน) ได้รับจากผล® และโซเดียมฟอสเฟต tribasicdodecahydrate (สำหรับโซลูชันบัฟเฟอร์) ได้รับจาก Vetec ฟิ Quimica

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การมีส่วนร่วมของเกษตรกรประชาชนและกลุ่มควบคุมได้ขอให้บริจาคเลือดเพื่อวัดกิจกรรมที่แท้จริงของเอนไซม์
ตัวอย่างทั้งหมดถูกเก็บไว้ใน 4 มิลลิลิตรหลอดสุญญากาศ ในGoianápolis,
ตัวอย่างเลือดที่ถูกเก็บรวบรวมโดยผู้เชี่ยวชาญด้านสุขภาพจากรัฐมนตรีว่าการกระทรวงสาธารณสุขในท้องถิ่น ใน Taquara,
พวกเขาจะถูกเก็บรวบรวมโดยเภสัชกรรับการฝึกอบรมที่เกี่ยวข้องในโครงการ ตัวอย่างถูกส่งไปยังห้องปฏิบัติการพิษวิทยาภายในได้สูงสุด 4 ชั่วโมงหลังจากที่คอลเลกชัน. ในการศึกษานี้เกษตรกรได้รับการพิจารณาจะต้องอยู่ในระยะเวลาการเปิดรับถึง 5 วันหลังการใช้ Che ยับยั้งสารกำจัดศัตรูพืช (organophosphorous และ / หรือ carbamates) และ ระยะเวลาที่ไม่เปิดรับหลังจาก15 วันไม่ได้ใช้สารกำจัดศัตรูพืชยับยั้ง Che ข้อมูลเกี่ยวกับการใช้สารกำจัดศัตรูพืชยับยั้ง Che ได้รับโดยตรงจากเกษตรกรก่อนที่จะเก็บตัวอย่าง ตัวอย่างเลือดจากประชาชนที่ถูกเก็บในเวลาเดียวกันเป็นผู้ที่มาจากเกษตรกร. เมื่อมาถึงที่ห้องปฏิบัติการตัวอย่างเลือดหมุนเหวี่ยงส่วนเม็ดเลือดแดง hemolysated ในสารละลายบัฟเฟอร์ (0.02 M ค่า pH 7.6) และเศษส่วนเก็บแช่แข็ง ( -20 ° C) จนกระทั่งวิเคราะห์ การปรับเปลี่ยนวิธีการ Ellman [27,28] ที่ใช้ซึ่งจะขึ้นอยู่กับการย่อยสลายของพื้นผิว(acetylthiocholine หรือ butyrylthiocholine) โดยแต่ละเอนไซม์และปฏิกิริยาของกลุ่ม thiol เกิดขึ้นกับกรดditionitrobenzoic (DTNB) ผลผลิตกรด nitrobenzoic ซึ่งได้รับการวัด ที่ 420 นาโนเมตร (Shimadzu UV / VIS spectrophotometer 1650 PC) กิจกรรมของเอนไซม์ก็ตั้งใจกับกราฟมาตรฐานของL-cysteine ​​(R2 = 0.9992) ซึ่งได้รับการปฏิกิริยาสีเดียวกัน เจ็บ (μmoles / นาที / มิลลิลิตร) และ BChE (μmoles / นาที / มก. โปรตีน) ได้รับการพิจารณาภายใน 3-5 และ 1-3 วันหลังจากการเก็บตัวอย่างเลือดตามลำดับระยะเวลาที่กิจกรรมเอนไซม์แตกต่างกันไปไม่ได้อย่างมีนัยสำคัญ(n = 5, p = 0.002). ความแม่นยำอยู่ในช่วง 3.5-14.5% สำหรับอาการปวดและ 1.7-4.1% สำหรับ BChE Acetylthiocholine, butyrylthiocholine L-cysteine, อัลบูมิและ DTNB ที่ซื้อมาจากซิกAldrich® Folin น้ำยา (สำหรับการกำหนดโปรตีน) ที่ได้รับจากเมอร์คKGaA®และโซเดียมฟอสเฟต tribasic dodecahydrate (สำหรับการแก้ปัญหาบัฟเฟอร์) ที่ได้รับจาก Vetec Quimica Fina

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เกษตรกรผู้เข้าร่วมกลุ่มควบคุมและถูกขอให้บริจาคเลือด

วัดกิจกรรม cholinesterase . ตัวอย่างทั้งหมดจะถูกเก็บรวบรวมใน 4 หลอดสูญญากาศ ml . ในน . kgm Polis ,
การเก็บตัวอย่างเลือด โดยผู้เชี่ยวชาญด้านสุขภาพจากเลขาสุขภาพท้องถิ่น . ใน taquara
, พวกเขามีจำนวนที่ผ่านการอบรมเภสัชกรที่เกี่ยวข้องในโครงการ ตัวอย่างที่ถูกส่งไปยัง
ห้องปฏิบัติการพิษวิทยาไม่เกิน 4 ชั่วโมงหลังจากคอลเลกชัน .
ในการศึกษานี้ ชาวนาก็ถือว่าอยู่ในช่วงเปิดรับถึง 5 วัน หลังจากการใช้ยาฆ่าแมลง ( เจ๊
organophosphorous และ / หรือคาร์บาเมต ) และในช่วงหลังไม่เปิดรับ
15 วันไม่ใช้เช และยาฆ่าแมลง ข้อมูลเกี่ยวกับการใช้สารกำจัดศัตรูพืชได้
ยับยั้งเชโดยตรงจากเกษตรกรก่อนตัวอย่างคอลเลกชัน ตัวอย่างเลือดจากคน เก็บข้อมูลในเวลาเดียวกับที่

จากเกษตรกร เมื่อมาถึงห้องปฏิบัติการ ตัวอย่างเลือดมีเม็ดเลือดแดง ส่วนไฟฟ้า , hemolysated
ในสารละลายบัฟเฟอร์ ( 0.02 M pH 7.6 ) และเศษส่วนเก็บไว้ ( − 20 ° C ) จนถึงการวิเคราะห์ เป็นวิธี 27,28
ดัดแปลงเ ล์แมน [ ] ใช้ซึ่งมีพื้นฐานจากการย่อยสลายของพื้นผิว
( acetylthiocholine หรือ butyrylthiocholine ) โดยแต่ละเอนไซม์และปฏิกิริยาของรูปแบบขนาดกลุ่ม
ditionitrobenzoic acid ( dtnb ) ให้ผลผลิต nitrobenzoic กรด ซึ่งเป็นวัดที่ 420 nm ( Shimadzu
UV / VIS 1650 เครื่อง Spectrophotometer ) เอนไซม์คือมุ่งมั่นกับเส้นโค้งมาตรฐานของ
L-Cysteine ( R2 = 0.9992 )7.4 ซึ่งได้รับปฏิกิริยาเดียวกัน ปวด ( μโมล / นาที / ml )
bche ( และμโมล / นาทีต่อมิลลิกรัมโปรตีน ) มีกำหนดภายใน 3 – 5 และ 1 – 3 วันหลังจากที่เก็บเลือด
ตามลำดับ ระยะเวลาที่กิจกรรมเอนไซม์ไม่แตกต่างกันทางสถิติ ( n = 5 , p = 0.002 ) .
ความเที่ยงตรงอยู่ระหว่าง 3.5 ถึง 14.5% สำหรับปวด จาก 1.7 ถึง 4.1% สำหรับ bche . acetylthiocholine
butyrylthiocholine L-Cysteine , , ,