Purine derivatives in urine were an

Purine derivatives in urine were analyzed for total
15N enrichment with a stable isotope elemental analyzer
(ThermoFinnigan Delta Plus). Purine derivatives
were isolated from the diluted urine samples by using
a modification of the methods of Chen et al. (1998).
Urine (6 mL) was combined with 3 mL of 6 M NH4OH
and vortexed. This solution was pipetted over a column
containing 2 mL of an anion exchange resin (Dowex 1 ×
8 chloride form, 100 to 200 mesh, Sigma Chemical, St.
Louis, MO) and rinsed with 12 mL of double-deionized
water. The effluent was discarded. A final rinse of the
columns was performed with 4 mL of 0.1 M HCl, and
the effluent was collected for analysis. Then 20 μL of
40% (wt/wt) NaOH was added to the final effluent and
the samples were vortexed for 10 s. Samples were then
pipetted to deliver 0.1 mg of N into microcentrifuge
tubes and dried at 90°C within a dry block heater for
6 h. The dried purine derivatives were resolubilized in
150 μL of double-deionized water and vortexed. The
solution was transferred into pressed tin capsules (5
× 9 mm), which were placed into a 96-well microtiter
plate and dried at 63°C for 4 h in a dehydrator (Snackmaster
Dehydrator Model 2200/FD-30, American Harvest,
Chaska, MN). Plasma urea (Marsh et al., 1965),

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มีวิเคราะห์ตราสารอนุพันธ์ purine ในปัสสาวะความรวมในบ่อ มีการวิเคราะห์ธาตุไอโซโทป 15N(ThermoFinnigan เดลต้า บวก) ตราสารอนุพันธ์ purineถูกแยกต่างหากจากตัวอย่างปัสสาวะแตกออก โดยใช้การปรับเปลี่ยนวิธีการของ Chen et al. (1998)ปัสสาวะ (6 mL) ถูกรวมเข้ากับ 3 mL ของ 6 M NH4OHและ vortexed วิธีนี้ถูก pipetted ผ่านคอลัมน์ประกอบด้วย 2 mL ของ anion exchange เรซิ่น (ซื้อ Dowex 1แบบฟอร์ม 8 คลอไรด์ ตาข่าย 100-200 ซิกเคมี เซนต์Louis, MO) และ rinsed ด้วย 12 mL ของ deionized คู่น้ำ น้ำถูกละทิ้ง ล้างขั้นสุดท้ายของการคอลัมน์ทำกับ 4 mL ของ 0.1 M HCl และน้ำรวบรวมวิเคราะห์ แล้ว μL 20 ของ40% (wt/wt) NaOH ได้เพิ่มน้ำทิ้งขั้นสุดท้าย และตัวอย่างถูก vortexed สำหรับตัวอย่าง s ได้ 10 ถูกแล้วpipetted ส่ง 0.1 mg ของ N ใน microcentrifugeท่อ และแห้งที่ 90° C ภายในบล็อกแห้งฮีตเตอร์สำหรับ6 h ตราสารอนุพันธ์ purine แห้งถูก resolubilized ในΜL 150 น้ำ deionized คู่และ vortexed ที่โซลูชันมีการโอนย้ายเป็นแคปซูลดีบุกกด (5ซื้อ 9 มม.), ซึ่งถูกวางลงใน microtiter 96-ดีแผ่น และแห้งที่ 63° C สำหรับ h 4 ในการขจัดน้ำออก (Snackmasterขจัดน้ำออกรุ่น 2200/FD-30 เก็บเกี่ยวอเมริกันChaska, MN) ยูเรียพลาสมา (Marsh et al., 1965),

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อนุพันธ์พิวรีนในปัสสาวะวิเคราะห์รวมการตกแต่ง 15N มีเสถียรภาพวิเคราะห์ไอโซโทปของธาตุ (ThermoFinnigan เดลต้าพลัส) อนุพันธ์พิวรีนที่แยกได้จากตัวอย่างปัสสาวะเจือจางโดยใช้การปรับเปลี่ยนวิธีการของเฉินและอัล (1998). ปัสสาวะ (6 มิลลิลิตร) ได้ร่วมกับ 3 มิลลิลิตร 6 M NH4OH และการ vortex วิธีการแก้ปัญหานี้ได้รับการปิเปตกว่าคอลัมน์ที่มี 2 มิลลิลิตรของเรซินแลกเปลี่ยนไอออน (Dowex 1 × 8 รูปแบบคลอไรด์ 100-200 ตาข่ายซิกเคมีเซนต์หลุยส์, มิสซูรี่) และล้างด้วย 12 มลดับเบิลปราศจากไอออนน้ำ น้ำเสียที่ถูกทิ้ง ล้างสุดท้ายของคอลัมน์ได้ดำเนินการกับ 4 มิลลิลิตร 0.1 M HCl และน้ำทิ้งที่ถูกเก็บรวบรวมเพื่อการวิเคราะห์ จากนั้น 20 ไมโครลิตรของ40% (น้ำหนัก / น้ำหนัก) NaOH ถูกบันทึกอยู่ในน้ำทิ้งขั้นสุดท้ายและตัวอย่างการvortex เวลา 10 วินาที ตัวอย่างแล้วปิเปตที่จะส่งมอบ 0.1 มิลลิกรัมไม่มีข้อความลงในไมโครหลอดและแห้งที่90 องศาเซลเซียสภายในเครื่องทำบล็อกแห้ง6 ชั่วโมง อนุพันธ์ purine แห้ง resolubilized ใน150 ไมโครลิตรน้ำสองครั้งที่ปราศจากไอออนและการ vortex วิธีการแก้ปัญหาที่ถูกย้ายเข้าไปในแคปซูลดีบุกกด (5 × 9 มม) ซึ่งถูกวางไว้เป็นไมโคร 96 หลุมจานและแห้งที่63 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4 ชั่วโมงในการขจัดน้ำออก (Snackmaster ขจัดน้ำออกรุ่น 2200 / FD-30, อเมริกันเก็บเกี่ยวชาสกา, MN) ยูเรียพลาสม่า (มาร์ช et al., 1965)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อนุพันธ์พิวรีนในปัสสาวะวิเคราะห์ค่า 15N รวม
กับมั่นคงไอโซโทปธาตุวิเคราะห์
( thermofinnigan Delta Plus ) อนุพันธ์พิวรีน
ที่แยกได้จากตัวอย่างปัสสาวะที่เจือจางโดยใช้
การแก้ไขวิธีการของ Chen et al . ( 2541 ) .
ปัสสาวะ ( 6 ml ) ถูกรวมกับ 3 มิลลิลิตร และ nh4oh
6 M vortexed . วิธีการแก้ปัญหานี้ pipetted ผ่านคอลัมน์
ประกอบด้วย 2 ml ของการแลกเปลี่ยนไอออนเรซิน ( ดังนั้น 1 ×
8 คลอไรด์แบบ 100 - 200 ตาข่าย ซิกม่า เคมี , St .
Louis , MO ) และล้างด้วย 12 ml คู่คล้ายเนื้อเยื่อประสาน
น้ำ น้ำที่ถูกทิ้ง ล้างขั้นสุดท้ายของ
คอลัมน์แสดงด้วย 4 มล. ความเข้มข้น 0.1 M HCl และ
น้ำทิ้งเพื่อวิเคราะห์ 20 μ l
40% ( wt / wt ) NaOH ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในน้ำทิ้งและสุดท้าย
จำนวน vortexed 10 . จำนวนแล้ว
pipetted ส่งมอบ 0.1 มก. N เป็นหลอดไมโครเซนตริฟิวจ์
และอบแห้งที่ 90 ° C ในเครื่องบล็อกแห้ง
6 H )
resolubilized อนุพันธ์พิวรีนแห้งใน 150 μลิตรคู่คล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำและ vortexed .
สารละลายดีบุกกดโอนเข้าไปในแคปซูล ( 5
× 9 มม. ) ซึ่งถูกวางไว้เป็นอย่างดีไมโคร
96แผ่นอบแห้งที่อุณหภูมิ 63 องศา C เป็นเวลา 4 ชั่วโมงใน dehydrator ( snackmaster
dehydrator รุ่น 2200 / fd-30 อเมริกัน , การเก็บเกี่ยว ,
chaska , Mn ) พลาสมายูเรีย ( Marsh et al . , 1965 )