2.4. Anti-Cancer activity assay
The assay for anti-cancer activity was carried out according to the
previous report (Plubrukarn et al., 2003). The anti-cancer compounds
were detected using MCF-7 (human breast adenocarcinoma), HeLa
(human cervical adenocarcinoma, HT-29 (human colon adenocarcinoma)
and KB (oral cavity cancer) cells. The cells were determined by
the Sulforhodamine B (SRB) assay. Briefly, cells were seeded into
96-well microplates (4000 cells/well) and allowed to adhere for 24 h
at 37 1C in a 5% CO2. Then 100 μL of a 25 μg/mL crude extract or a
five-fold diluted pure compound in medium (final concentration
0.00006, 0.00032, 0.0016, 0.008, 0.04, 0.2, 1, 5 μg/mL) were dispensed
into the wells. After removal of the sample medium, the
bound cells were submerged in 200 μL of D-MEM medium and
incubated for 72 h. The absorbance was measured at 492 nm using a
microplate reader. The results were interpreted based on the ability
of extracts to inhibit cell growth compared with the control. The IC50
values were calculated using probit analysis.
% Inhibition ¼ ½ðOD controlOD sampleÞ=OD control 100
2.4. ทดสอบกิจกรรมต้านมะเร็งทดสอบกิจกรรมต้านมะเร็งได้ดำเนินการตามรายงานก่อนหน้านี้ (Plubrukarn et al. 2003) สารต้านมะเร็งพบใช้ MCF-7 (มะเร็งเต้านมของมนุษย์), HeLa(มนุษย์ปากมดลูกปกติ HT-29 (มะเร็งลำไส้ใหญ่มนุษย์)และเซลล์ KB (มะเร็งช่องปาก) เซลล์ถูกกำหนดโดยทดสอบ Sulforhodamine B (SRB) สั้น ๆ เซลล์ถูกทีมวางmicroplates 96 หลุม (4000 เซลล์ดี) และอนุญาตให้ยึดมั่นใน 24 hที่ 1C 37 ใน 5% CO2 แล้วดึง 100 μL ของ 25 μ/mL ดิบ หรือสารประกอบบริสุทธิ์สามเจือจางในกลาง (ความเข้มข้นสุดท้าย0.00006, 0.00032, 0.0016, 0.008, 0.04, 0.2, 1, 5 μ/mL) ถูกจ่ายลงหลุม หลังจากการกำจัดของตัวกลาง การเซลล์ที่ถูกผูกไว้มีน้ำท่วมใน μL 200 D-MEM ขนาดกลาง และได้รับการกก 72 ชม ค่าที่ถูกวัดที่ 492 nm ใช้ในอ่าน microplate ผลลัพธ์ได้ตีความตามความสามารถของสารสกัดในการยับยั้งการ เติบโตของเซลล์เมื่อเทียบกับตัวควบคุม IC50มีคำนวณค่าโดยใช้วิเคราะห์ probit%การยับยั้ง¼ ½ðOD controlOD sampleÞ =ควบคุม OD 100
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.4 การทดสอบฤทธิ์ต้านมะเร็ง
การวิเคราะห์สำหรับกิจกรรมต้านมะเร็งได้ดำเนินการตามที่
รายงานก่อนหน้า (Plubrukarn et al., 2003) สารต้านมะเร็งที่
ตรวจพบโดยใช้ MCF-7 (มะเร็งเต้านม) HeLa
(มนุษย์มะเร็งปากมดลูก, HT-29 (มนุษย์ลำไส้ใหญ่มะเร็ง)
และ KB (มะเร็งช่องปาก) เซลล์. เซลล์ได้รับการพิจารณาโดย
Sulforhodamine B (SRB ) การทดสอบ. สั้น ๆ , เซลล์เมล็ดลงใน
96 หลุม microplates (4000 เซลล์ / ดี) และได้รับอนุญาตให้เป็นไปตามเวลา 24 ชั่วโมง
ที่ 37 1C ใน CO2 5%. แล้ว 100 ไมโครลิตรของ 25 ไมโครกรัม / มลสารสกัดหยาบหรือ
ห้า พับเจือจางสารบริสุทธิ์ในระดับปานกลาง (ความเข้มข้นสุดท้าย
0.00006, 0.00032, 0.0016, 0.008, 0.04, 0.2, 1, 5 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) ถูกจ่าย
เข้าสู่หลุม. หลังจากที่กำจัดของกลางตัวอย่างที่
เซลล์ที่ถูกผูกไว้ถูกจมอยู่ใน 200 ไมโครลิตรของ กลาง D-MEM และ
บ่มเป็นเวลา 72 ชม. ค่าการดูดกลืนวัดที่ 492 นาโนเมตรโดยใช้
เครื่องอ่าน microplate. ผลลัพธ์ที่ได้ขึ้นอยู่กับการตีความความสามารถ
ของสารสกัดในการยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์เมื่อเทียบกับการควบคุม. ค่า IC50
ค่าถูกคำนวณโดยใช้การวิเคราะห์ probit
% ยับยั้ง¼½ðOD controlOD sampleÞ = ควบคุม OD 100
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.4 . กิจกรรมต่อต้านมะเร็ง การทดสอบแบคทีเรียในการป้องกันมะเร็ง - กิจกรรมดําเนินตามไปรายงานก่อนหน้า มุรธาทิพย์ et al . , 2003 ) สารต้านมะเร็งพบว่ามีการใช้ mcf-7 ( adenocarcinoma เต้านมของมนุษย์ ) ล่า( adenocarcinoma , ปากมดลูกของมนุษย์ ht-29 ( adenocarcinoma ลําไส้ใหญ่ของมนุษย์ )บางครั้ง ( และมะเร็งช่องปาก ) เซลล์ เซลล์ที่ถูกกำหนดโดยพวกซัลฟอร์โฮดามีนบี ( SRB ) ตามลำดับ เซลล์มีเมล็ดเป็นสั้น ๆ96 ดี microplates ( 4000 เซลล์ / ดี ) และอนุญาตให้ยึดมั่นตลอด 24 ชั่วโมงที่ 37 1C ใน 5% CO2 แล้ว 100 μลิตร 25 μ g / ml สารสกัดหรือห้าพับเจือจางสารบริสุทธิ์ในระดับปานกลาง ( ความเข้มข้นสุดท้าย0.00006 0.00032 0.0016 / , , , , 0.04 , 0.5 , 1 , 5 μ g / ml ) จ่ายในเวลส์ หลังจากการใช้สื่อผูกพันเซลล์ถูกแช่ในμ 200 ลิตร d-mem ขนาดกลางบ่มเป็นเวลา 72 ชั่วโมง นวัดที่ 492 นาโนเมตรโดยใช้อ่านพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย . ผลลัพธ์ที่ได้ตีความตามความสามารถสารสกัดในการยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์เมื่อเทียบกับการควบคุม การ ic50ค่าคำนวณโดยใช้วิธี Probit Analysis .% ยับยั้ง¼½ð OD controlod ตัวอย่างควบคุมÞ = 100 .
การแปล กรุณารอสักครู่..
