The use of agarose gels for separat

The use of agarose gels for separating DNA of various size
classes has blossomed with the advent of restriction endonucleases
(1, 2). However, the purification of DNA fragments from
the agarose matrix for further study has long been problematic.
Although several techniques have been devised for this purpose
(3-12), none has satisfactorily eliminated the problems of incomplete
separation of agarose from DNA, degradation or other
modifications of DNA (including the loss of "restrictability"),
low yield, inconvenience, etc. (13). The problems are often
magnified when large preparative gels are used or when multiple
samples are analyzed.
We report here two simple techniques for separating DNA
from agarose. Both techniques involve as a first step the solubilization
of agarose in the chaiotropic salt, NaI. The second step
is either binding of the DNA to glass or selective precipitation
with acetone. The techniques are used jointly for some work;
the acetone precipitation technique to locate specific fragments
of DNA in resolving gels and to measure the proportion of the
probe complementary to each fragment, and the glass-binding
method to recover the fragments for further study.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ใช้เจล agarose สำหรับการแยกดีเอ็นเอที่มีขนาดต่าง ๆ
ในชั้นเรียนได้เบ่งบานกับการถือกำเนิดของข้อ จำกัด endonucleases
(1, 2) แต่การทำให้บริสุทธิ์ของดีเอ็นเอจากเมทริกซ์ agarose สำหรับการศึกษาต่อได้รับมีปัญหา. แม้ว่าเทคนิคหลายอย่างได้รับการวางแผนเพื่อการนี้(12/03) ไม่มีมีกรอบที่น่าพอใจปัญหาของการไม่สมบูรณ์แยกagarose จากดีเอ็นเอหรือการย่อยสลาย อื่น ๆปรับเปลี่ยนดีเอ็นเอ (รวมถึงการสูญเสียของ "restrictability") ให้ผลผลิตต่ำในความไม่สะดวกและอื่นๆ (13) ปัญหาที่มักจะขยายเมื่อเตรียมเจลขนาดใหญ่ที่มีการใช้หรือเมื่อหลายตัวอย่างที่มีการวิเคราะห์. เรารายงานที่นี่สองเทคนิคง่ายๆสำหรับการแยกดีเอ็นเอจาก agarose เทคนิคทั้งสองเกี่ยวข้องกับการเป็นขั้นตอนแรกละลายของ agarose ในเกลือ chaiotropic นาย ขั้นตอนที่สองคือการอย่างใดอย่างหนึ่งที่มีผลผูกพันของดีเอ็นเอกับกระจกหรือการเร่งรัดการคัดเลือกด้วยอะซิโตน เทคนิคที่ใช้ร่วมกันสำหรับการทำงานบางเทคนิคการเร่งรัดอะซีโตนเพื่อหาชิ้นส่วนที่เฉพาะเจาะจงของดีเอ็นเอในเจลและการแก้ปัญหาในการวัดสัดส่วนของการสอบสวนประกอบกับในแต่ละส่วนและกระจกผูกพันวิธีการกู้คืนเศษสำหรับการศึกษาต่อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การใช้เจลสำหรับการแยกดีเอ็นเอ , ชั้นเรียนขนาด
ต่างๆมี blossomed กับการมาถึงของการสงบเงียบ
( 1 , 2 ) อย่างไรก็ตาม ผลิตชิ้นส่วนดีเอ็นเอจาก
เมทริกซ์ ( ศึกษาต่อได้รับปัญหา
ถึงแม้ว่าหลายเทคนิคได้รับการวางแผนเพื่อวัตถุประสงค์นี้
( 12 ) , ไม่มีใครมีปัญหาไม่สมบูรณ์
น่าพอใจตกรอบแยกจาก , ดีเอ็นเอ , การย่อยสลายหรือการเปลี่ยนแปลงอื่นๆ
ดีเอ็นเอ ( รวมถึงการสูญเสียของ " restrictability " )
ผลผลิตไม่สะดวก ต่ำ ฯลฯ ( 13 ) ปัญหามัก
ชัดเจนเมื่อเจลดที่มีขนาดใหญ่จะใช้หรือเมื่อหลายตัวอย่าง

เราก็วิเคราะห์ รายงานที่นี่สองเทคนิคง่ายๆสำหรับการแยกดีเอ็นเอจาก (
. ทั้งสองวิธีเป็นขั้นตอนแรกที่เกี่ยวข้องกับการสกัด
ของโรสในเกลือ chaiotropic ไน
ขั้นตอนที่สองให้ใช้ DNA หรือแก้ว
ฝนเลือกด้วยอะซิโตน มีเทคนิคที่ใช้ร่วมกันสำหรับการทำงานบางอย่าง ;
) ด้วยเทคนิคเพื่อค้นหาชิ้นส่วนของดีเอ็นเอที่เฉพาะเจาะจงในการแก้ปัญหา
เจลและวัดสัดส่วนของ
สอบสวนประกอบแต่ละส่วน และมีผลผูกพัน
แก้ววิธีการกู้คืนเศษเพื่อศึกษาต่อ