MATERIALS AND METHODS A total numbe

MATERIALS AND METHODS A total number of 40 cultured oniloncus were collected randomly from the ponds of a private fish farm in Kafi El Sheikh Govemorate, Egypt. The Body weights of fish were ranged from 150+10 g. The collected fish were examined clinically with paying an attention to the behaviors in the ponds. changes in color and respiratory manifestations with a special care to the extemal lesions il according to the methods described by Noga [5]. The fish samples were kept in tanks partially filled with the same water of the pond then transported to the Lab. In the Lab. c each fish was rinsed with de-ionized water and the surface of the fish was decontaminated by dipping it in ethyl fo alcohol and lightly flamed. The samples were taken according to Bullar [11 swabs from the different organs of of each fish were inoculated on Tryptic Soya broth then. incubated at 28°C for 24 hour ccording to Austin aud Austin [12].
Isolation and Identification of A. hydrophila: A loop fill from each broth tube was streaked onto the following media: MacConkey's agar Rimler and Schotts RS agai) Oxoid) then incubated at 28°C for 24 hours. Purified isolates were used as stocks for further morphological and identifications. biochemical Bacterial films were Characterization: Morphological prepared from each suspected purified isolate and stained with Gram's stain [13] then examined under the bright field microscope with the oil immeision lens.Biochemical Identification Traditional Methods: The separate colonies were subjected to biochemical identification by the following tests: oxidase "Biomerieux". triple sugar iron agar, indol, Voges Proskauer, urea utilization. Simmon's citrate agar and methyle red according to Collee et al. [14]. B-API 20 E Kits: API 20E kit BioMerieux [15] biochemical f profiling test was performed according to manufacturer's instructions. Finally. isolates were stabbed into tubes containing semi-solid nutrient agar medium and then incubated at 37°C for 24 lus. The incubated tubes were examined for detecting motility of inoculated isolates then preserved in the refiigerator at 4 ts Genomic DNA Extraction and PCR Amplification: DNA of .1. in drophia was extracted by using QIA amp mini kit. oligonucleotide primer for the aerolysin Qiagen. specific ry toxin gene was used according to Wang et al. [16] as us illustrated in Table

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการ A จำนวน 40 อ่าง oniloncus ถูกเก็บรวบรวมจากบ่อของฟาร์มปลาส่วนตัวใน Govemorate Kafi เอล-ชีค อียิปต์ได้ น้ำหนักร่างกายของปลาได้อยู่ในช่วงจาก 150 + 10 g ปลารวบรวมได้ตรวจสอบทางคลินิกกับการให้ความสนใจกับพฤติกรรมในบ่อ เปลี่ยนแปลงสีและลักษณะทางเดินหายใจ ด้วยการดูแลเป็นพิเศษจะได้ extemal il ตามวิธีการอธิบายไว้ โดย Noga [5] ตัวอย่างปลาเก็บไว้ในถังที่เต็มไป ด้วยน้ำของบ่อแล้ว ส่งตรวจเดียวกันบางส่วน ในห้องปฏิบัติการ c ปลาแต่ละถูก rinsed ionized de-น้ำ และพื้นผิวของปลาถูก decontaminated โดยจุ่มในแอลกอฮอล์เอทิลโฟ และทอดราดเบา ๆ ตัวอย่างที่ถ่ายตาม Bullar [swabs 11 จากอวัยวะต่าง ๆ ของปลาแต่ละที่ inoculated บนเหลือง Tryptic ซุปนั้น incubated ที่ 28 ° C ใน 24 ชั่วโมง ccording การ Austin aud Austin [12]การแยกและระบุ A. hydrophila: เติมวนจากแต่ละหลอดซุปมีลายบนสื่อต่อไปนี้: ของ MacConkey agar Rimler และ Schotts RS agai) Oxoid) incubated ที่ 28 ° C 24 ชั่วโมง แยกบริสุทธิ์ใช้เป็นหุ้นสำหรับการเพิ่มเติมของรหัสและ ฟิล์มแบคทีเรียชีวเคมีได้จำแนก: สัณฐานเตรียมจากแต่ละวางแยกบริสุทธิ์สงสัย และสี ด้วยคราบของกรัม [13] แล้วตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์ฟิลด์สดใสด้วยเลนส์ immeision น้ำมันชีวเคมีรหัสวิธีดั้งเดิม: อาณานิคมต่างหากถูกต้องรหัสชีวเคมี โดยการทดสอบต่อไปนี้: oxidase "Biomerieux" สามน้ำตาลเหล็ก agar, indol, Voges Proskauer ใช้ยูเรีย ของ Simmon ซิเตรต agar และ methyle สีแดงตาม Collee et al. [14] ชุด B-API 20 E: API 20E ชุด BioMerieux [15] ชีวเคมี f ทดสอบการสร้างโพรไฟล์ที่ดำเนินการตามคำแนะนำของผู้ผลิต สุดท้าย แยกถูกแทงเข้าหลอดประกอบด้วย agar ธาตุอาหารกึ่งแข็งปานกลางแล้ว incubated ที่ 37 ° C ใน 24 lus หลอด incubated ได้ตรวจสอบสำหรับตรวจ motility ของ inoculated ที่แยกได้ แล้วเก็บรักษาไว้ใน refiigerator ที่ 4 ts Genomic DNA สกัดและ PCR ขยาย: ดีเอ็นเอของ.1 ใน drophia ถูกสกัดโดย QIA แอมป์ชุดมินิ รองพื้น oligonucleotide สำหรับ aerolysin Qiagen ยีนสารพิษเฉพาะลองใช้ตามวัง et al. [16] เป็นเราแสดงในตาราง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการจำนวนรวมของ 40 oniloncus เลี้ยงสุ่มเก็บจากบ่อของฟาร์มปลาเอกชนใน Kafi El Sheikh Govemorate, อียิปต์ น้ำหนักตัวของปลาถูกตั้งแต่ 150 + 10 กรัม ปลาที่เก็บรวบรวมได้มีการตรวจสอบทางการแพทย์ที่มีการจ่ายเงินให้ความสนใจกับพฤติกรรมในบ่อ การเปลี่ยนแปลงในสีและอาการระบบทางเดินหายใจที่มีการดูแลเป็นพิเศษเพื่อ extemal แผลอิลลินอยส์ตามวิธีการอธิบายโดย Noga [5] ตัวอย่างปลาถูกเก็บไว้ในถังที่เต็มไปบางส่วนที่มีน้ำเดียวกันของบ่อแล้วส่งไปยังห้องปฏิบัติการ ในห้องปฏิบัติการ คปลาแต่ละคนถูกล้างด้วยน้ำบริสุทธิ์และพื้นผิวของปลาถูก decontaminated โดยการจุ่มในเอทิลสำหรับเครื่องดื่มแอลกอฮอล์และ flamed เบา ๆ ถูกนำตัวอย่างตามบุลล่าร์ [11 Swabs จากอวัยวะต่าง ๆ ของปลาแต่ละถูกเชื้อ Tryptic ในน้ำซุปถั่วเหลืองแล้ว บ่มที่อุณหภูมิ 28 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ccording ออสติน AUD ออสติน [12].
การแยกและบัตรประจำตัวของ A. hydrophila: ห่วงเติมจากแต่ละหลอดน้ำซุปได้รับลายลงบนสื่อต่อไปนี้: วุ้น MacConkey ของ Rimler และ schotts อาร์เอสได้ก) Oxoid) แล้ว บ่มที่อุณหภูมิ 28 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง เชื้อบริสุทธิ์ถูกนำมาใช้เป็นหุ้นลักษณะรูปร่างและระบุเพิ่มเติม ภาพยนตร์แบคทีเรียมีลักษณะทางชีวเคมี: ทางสัณฐานวิทยาที่เตรียมจากแยกบริสุทธิ์แต่ละที่น่าสงสัยและย้อมด้วยคราบแกรมของ [13] การตรวจสอบแล้วภายใต้กล้องจุลทรรศน์ข้อมูลสดใสกับ immeision น้ำมัน lens.Biochemical การระบุวิธีการแบบดั้งเดิม: อาณานิคมแยกต่างหากถูกยัดเยียดให้การระบุทางชีวเคมีโดยต่อไปนี้ การทดสอบ: oxidase "Biomerieux" สามวุ้นเหล็กน้ำตาล Indol, Voges Proskauer การใช้ปุ๋ยยูเรีย วุ้น citrate Simmon และ methyle สีแดงตาม Collee และคณะ [14] B-20 API ชุด E: 20E ชุด API bioMerieux [15] ชีวเคมีฉทดสอบโปรไฟล์ได้ดำเนินการตามคำแนะนำของผู้ผลิต ในที่สุด เชื้อถูกแทงเข้าไปในท่อที่มีขนาดกลางวุ้นสารอาหารกึ่งแข็งแล้วนำไปบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 Lus หลอดบ่มถูกตรวจสอบสำหรับการตรวจสอบการเคลื่อนไหวของเชื้อเชื้อที่เก็บรักษาไว้แล้วใน refiigerator ที่ 4 ทีเอสจีโนมดีเอ็นเอการสกัดและการขยาย PCR ดีเอ็นเอของ 0.1 ใน drophia ถูกสกัดโดยใช้แอมป์ QIA ชุดมินิ ไพรเมอร์สำหรับ oligonucleotide aerolysin Qiagen ยีนสารพิษที่เฉพาะเจาะจง Ry ถูกนำมาใช้ตามวังและคณะ [16] ในขณะที่เราแสดงให้เห็นในตาราง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการเพาะเลี้ยง จำนวน 40 oniloncus ครั้งนี้สุ่มจากบ่อเลี้ยงปลาของฟาร์มเอกชนใน govemorate Kafi เอล - ชีค , อียิปต์ ร่างกาย น้ำหนักของปลามีค่า 150 10 กรัม เก็บปลาได้ตรวจสอบทางคลินิกกับการจ่ายความสนใจกับพฤติกรรมในบ่อการเปลี่ยนสีและอาการทางเดินหายใจด้วยการดูแลเป็นพิเศษเพื่อ extemal รอยโรค อิล ตามวิธีการที่อธิบายโดยโนคา [ 5 ] ปลาตัวอย่างถูกเก็บในถังที่เต็มไปบางส่วน ด้วยน้ำที่เหมือนกันของบ่อแล้วส่งไปที่แล็บในแล็บซี ปลาแต่ละตัวถูกล้างด้วยน้ำบริสุทธิ์และเดอพื้นผิวของปลาที่ถูก decontaminated โดยแช่ในแอลกอฮอล์เอธิลโฟและเบา flamed . จำนวนที่ถ่ายตาม bullar [ 11 จากจากหลายอวัยวะของปลาแต่ละปลูกเชื้อบนอาหารถั่วเหลืองซุปแล้ว บ่มที่อุณหภูมิ 28 องศา C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ccording Austin AUD ออสติน [ 12 ] .
แยกและจำแนก A . hydrophila :เติมน้ำซุปจากแต่ละวงท่อลายลงบนสื่อต่อไปนี้ : macconkey เป็นวุ้น rimler schotts RS และ agai ) oxoid ) แล้วบ่มที่อุณหภูมิ 28 องศา C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง เชื้อบริสุทธิ์ถูกใช้เป็นหุ้นสำหรับเพิ่มเติมอะไรบ่งบอกลักษณะทางสัณฐานวิทยาและ . ฟิล์มแบคทีเรียทางชีวเคมีเป็นลักษณะ :ลักษณะทางสัณฐานวิทยาที่เตรียมจากแต่ละสงสัยบริสุทธิ์แยกและเปื้อนเป็นคราบกรัม [ 13 ] จากนั้นตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์สนามสดใสด้วยน้ำมัน immeision เลนส์ ชีวเคมี การวิธีการแบบดั้งเดิม : อาณานิคมแยกจะถูกกำหนดโดยการทดสอบทางชีวเคมีของต่อไปนี้ : " biomerieux " สาม น้ำตาล เหล็ก วุ้น อินดอล Voges proskauer , การใช้ปุ๋ยยูเรียของ ซิมมซิเตรตวุ้น และ methyle สีแดงตาม collee et al . [ 14 ] b-api 20 E ชุด : ชุด API 20e biomerieux [ 15 ] ทางชีวเคมี F โปรไฟล์ทดสอบได้ปฏิบัติตามคำแนะนำของผู้ผลิต ในที่สุด ไอโซเลตเป็นแทงลงในหลอดที่มีขนาดกลาง NUMB3RS กึ่งแข็งและบ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 24 ภาษา .โดยมีวัตถุประสงค์เพื่อบ่มหลอดตรวจจับการเคลื่อนที่ของเชื้อไอโซเลท แล้วเก็บรักษาไว้ใน refiigerator 4 TS การสกัดดีเอ็นเอและ PCR DNA amplification : 1 . ใน drophia ถูกสกัดโดยใช้ชุดมินิแอมป์มั่น . ซึ่งใช้สำหรับ aerolysin เพิ่ม . เฉพาะเรียวมะยีนสารพิษถูกใช้ตาม Wang et al . [ 16 ] เมื่อเราแสดงในตาราง