2.1. Materials
Dry microalgae powders (Chlorella spp.) were supplied by Prof.
Yuanguang Li, School of Biotechnology, East China University of
Science and Technology. The chemicals were sulfuric acid (95.0–
98.0% purity), ethanol (99.7% purity), n-Hexane (95.5% purity),
petroleum ether, carbon tetrachloride, ethyl ether, n-butanol, chloroform,
acetone (all of analytical grade, P99.0% purity). The analytical
reagents were all also of analytical grade (Beijing Chemical
Works, China). Heptadecanoic acid ethyl ester from Sigma
Chemicals Company was used as a standard for gas chromatography
(GC) analysis.
2.2. Maximum fatty acid ethyl esters (FAEE) yield
To quantify the maximum conversion yield of FAEE, 0.3 g dry
microalgae biomass was added into a tube, mixed with 11.4 mL
mixture solvent (chloroform:methanol:water = 1:2:0.8; v/v/v),
and then the mixture was subjected to ultrasonic treatment for
30 min in order to allow lipids inside microalgae cells to be
extracted (Bligh and Dyer, 1959). Chloroform and water were
added to achieve the phase separation and the chloroform phase
containing the microalgae lipid. When the chloroform layer was
separated from the water layer, the chloroform layer was transferred
to a round-bottomed flask and evaporated in a rotary evaporator
to remove the solvent and obtain the crude lipids. The crude
lipids were mixed with 6 mL ethanol and 300 lL sulfuric acid in a
round-bottomed flask, which was heated to 90 C for 2.0 h. After
the transesterification reaction, the micro-reaction vessel was
cooled to room temperature. Afterwards, 6 mL deionized water
and 6 mL n-hexane was added into the micro-reaction vessel for
phase separation. The sample with 6 mg heptadecanoic acid ethyl
ester (C17:0) was added to the tube for GC analysis to determine
the maximum FAEE yield.
2.1 วัสดุ
ผงสาหร่ายแห้ง (Chlorella spp.) ถูกจัดทำโดยศ.
Yuanguang Li, โรงเรียนเทคโนโลยีชีวภาพภาคตะวันออกของจีนมหาวิทยาลัย
วิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี สารเคมีที่เป็นกรดกำมะถัน (95.0-
98.0% บริสุทธิ์), เอทานอล (99.7% บริสุทธิ์), N-Hexane (95.5% บริสุทธิ์),
ปิโตรเลียมอีเทอร์, คาร์บอนเตตระคลอไรเอทิลอีเทอร์ N-บิวทานอคลอโรฟอร์ม
อะซิโตน (ทุกเกรดวิเคราะห์ , P99.0% บริสุทธิ์) วิเคราะห์
น้ำยาทุกคนนอกจากนี้ยังมีการวิเคราะห์ของเกรด (ปักกิ่งเคมี
โรงงานจีน) Heptadecanoic กรดเอทิลเอสเตอร์จาก Sigma
บริษัท เคมีภัณฑ์ที่ใช้เป็นมาตรฐานสำหรับแก๊ส chromatography
(GC) การวิเคราะห์.
2.2 สูงสุดเอสเทอกรดไขมันเอทิล (FAEE) ผลผลิต
ปริมาณผลผลิตแปลงสูงสุดของ FAEE 0.3 กรัมแห้ง
สาหร่ายชีวมวลถูกบันทึกลงในหลอดผสมกับ 11.4 มิลลิลิตร
ผสมตัวทำละลาย (คลอโรฟอร์ม: เมทานอล: น้ำ = 1: 2: 0.8; v / v / v),
และจากนั้นส่วนผสมที่ถูกยัดเยียดให้รักษาล้ำสำหรับ
30 นาทีเพื่อให้ไขมันภายในเซลล์สาหร่ายที่จะ
สกัด (ไบลห์และผ้า 1959) คลอโรฟอร์มและน้ำที่ถูก
เพิ่มเข้ามาเพื่อให้เกิดการแยกเฟสและเฟสคลอโรฟอร์ม
ที่มีไขมันสาหร่ายทะเลขนาดเล็ก เมื่อชั้นคลอโรฟอร์มที่ถูก
แยกออกมาจากชั้นน้ำชั้นคลอโรฟอร์มที่ถูกย้าย
ไปเป็นขวดรอบจุดต่ำสุดและระเหยในเครื่องระเหยแบบหมุน
ที่จะเอาตัวทำละลายและได้รับไขมันดิบ น้ำมันดิบ
ไขมันถูกผสมกับเอทานอล 6 มิลลิลิตรและ 300 LL กรดกำมะถันใน
กระติกน้ำรอบจุดต่ำสุดซึ่งถูกความร้อนถึง 90 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2.0 ชั่วโมง หลังจาก
ปฏิกิริยา transesterification ที่เรือไมโครปฏิกิริยาถูก
ระบายความร้อนที่อุณหภูมิห้อง หลังจากนั้น 6 มลน้ำกลั่น
และ 6 มล N-เฮกเซนถูกเพิ่มเข้าไปในเรือขนาดเล็กสำหรับปฏิกิริยา
การแยกเฟส กลุ่มตัวอย่างที่มีกรด heptadecanoic 6 มิลลิกรัมเอทิล
เอสเตอร์ (C17: 0) ถูกบันทึกอยู่ในหลอดสำหรับการวิเคราะห์ GC ในการกำหนด
อัตราผลตอบแทน FAEE สูงสุด
การแปล กรุณารอสักครู่..
