Materials and methods
Healthy fishes (C. catla having average weight 6.1 g)
were obtained from Tamil Nadu Fisheries Development
Corporation, Aliyar, Coimbatore District, Tamil Nadu, India
and transported to the laboratory in well aerated plastic
bags. They were allowed to acclimatize to the laboratory
conditions for two weeks and then used for the experimental
studies.
Experiments were conducted in plastic tanks (135 l
capacity) filled with fresh, clean and unchlorinated ground
water. Each tank was cleaned daily by 75% water exchange
after siphoning out fish faeces and uneaten feed . Water
temperature ranged between 28 – 30 ºC. Fishes were fed
with commercial fish feed, having 35 % crude protein, 4%
crude fat and 9% crude fibre.
Preparation of probiotic bacteria
The probiotic bacterial strains (L. plantarum and
B. megaterium, procured from IMTECH, Chandigarh,
India) were inoculated in Tryptic Soy broth (TSB) and
incubated at 30 °C for 48 h and then centrifuged at
5000 rpm for 30 min. After centrifugation, the bacteria were
washed twice with sterile saline and the final concentration
of suspension was adjusted to 1010 cells ml-1 in saline. The
saline, containing the probiotic bacteria (both L. plantarum
and B. megaterium) was added to the commercial feed to
give an initial number of 107
cells gdiet-1 (Aly et al., 2008 b).
The two bacterial suspensions were mixed in 1:1 ratio and
mixed with feed which formed the diet containing both
L. plantarum and B. megaterium. The diets were transferred
to plastic bags and stored in a refrigerator (- 4 °C) and this
preparation was repeated every two weeks. Pure cultures
of probiotic bacteria were maintained in deep freezer at
–20 °C with glycerol for further use and for the routine
use, the stock culture were stored at 4 °C.
วัสดุและวิธีการ
ปลาเพื่อสุขภาพ (ค catla มีน้ำหนักเฉลี่ย 6.1 กรัม)
ที่ได้รับจากรัฐทมิฬนาฑูพัฒนาประมง
คอร์ปอเรชั่น Aliyar, Coimbatore อำเภอรัฐทมิฬนาฑูอินเดีย
และส่งไปยังห้องปฏิบัติการในพลาสติกมวลเบารวมทั้ง
ถุง พวกเขาได้รับอนุญาตให้ปรับตัวไปยังห้องปฏิบัติการ
เงื่อนไขในสองสัปดาห์ที่แล้วที่ใช้สำหรับการทดลอง
การศึกษา.
การทดลองในถังพลาสติก (135 ลิตร
ความจุ) เต็มไปด้วยความสดสะอาดและ unchlorinated พื้น
น้ำ ถังแต่ละคนได้ทำความสะอาดทุกวันโดยการแลกเปลี่ยนน้ำ 75%
หลังจากที่ดูดออกอุจจาระปลาและอาหารกะหรี่ น้ำ
อุณหภูมิอยู่ระหว่าง 28-30 องศาเซลเซียส ปลาถูกเลี้ยง
ด้วยอาหารปลาเชิงพาณิชย์ที่มีโปรตีน 35%, 4%
ไขมันดิบและเยื่อใย 9%.
เตรียมความพร้อมของแบคทีเรีย
โปรไบโอติกแบคทีเรีย ( L. plantarum และ
B. megaterium, จัดหาจาก IMTECH, Chandigarh,
อินเดีย) เป็น เชื้อในน้ำซุป Tryptic Soy (TSB) และ
บ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมงแล้วหมุนเหวี่ยงที่
5000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 นาที หลังจากการปั่นแยกแบคทีเรียที่ถูก
ล้างด้วยน้ำเกลือสองครั้งผ่านการฆ่าเชื้อและความเข้มข้นสุดท้าย
ของการระงับปรับ 1,010 เซลล์ ML-1 ในน้ำเกลือ
น้ำเกลือที่มีแบคทีเรีย (ทั้ง L. plantarum
และ B. megaterium) ถูกบันทึกอยู่ในฟีดในเชิงพาณิชย์เพื่อ
ให้จำนวน 107 เริ่มต้นของ
เซลล์ gdiet-1 (Aly et al., 2008 ข).
ทั้งสองแขวนลอยแบคทีเรียถูกผสม ในอัตราส่วน 1: 1 และ
ผสมกับฟีดซึ่งเป็นอาหารที่มีทั้ง
แอล plantarum และ B. megaterium อาหารที่ถูกย้าย
ไปยังถุงพลาสติกและเก็บไว้ในตู้เย็น (- 4 ° C) และ
การจัดทำซ้ำทุกสองสัปดาห์ เชื้อบริสุทธิ์
ของแบคทีเรียโปรไบโอติกถูกเก็บรักษาไว้ในตู้แช่แข็งลึก
-20 ° C มีกลีเซอรีนสำหรับการใช้งานต่อไปและสำหรับขั้นตอนการ
ใช้งานวัฒนธรรมหุ้นถูกเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส
การแปล กรุณารอสักครู่..

วัสดุและวิธีการสุขภาพปลา ( C . บราซิลเน็กซต์ท็อปโมเดล ฤดูกาลที่มีน้ำหนักเฉลี่ย 6.1 กรัมได้จากทมิฬนาฑูพัฒนาการประมงบริษัท Parabmikulam Aliyar , Coimbatore District , ทมิฬนาฑู , อินเดียและส่งตัวไปปฏิบัติการในบ่อพลาสติกกระเป๋า พวกเขาได้รับอนุญาตที่จะปรับตัวให้ชินกับอากาศในห้องปฏิบัติการเงื่อนไขสำหรับสองสัปดาห์และจากนั้นใช้สำหรับทดลองศึกษาการทดลองในถังพลาสติก ( 135 ลิตรความจุเต็มไปด้วยความสด สะอาด และ unchlorinated พื้นดินน้ำ แต่ละถังสะอาดทุกวัน โดย 75% น้ำตราหลังจากดูดขี้ปลาและ uneaten ออกหาอาหาร น้ำอุณหภูมิอยู่ในช่วงระหว่าง 28 – 30 ºเลี้ยงปลา .กับปลาเชิงพาณิชย์อาหารที่มีโปรตีน 35 % , 4 %ไขมันดิบและ 9% ดิบไฟเบอร์การเตรียมการของแบคทีเรียโปรไบโอติกส่วนโปรไบโอติกแบคทีเรีย ( L . plantarum และB . megaterium งานจาก imtech , Chandigarh ,อินเดีย ) ปลูกเชื้อในน้ำซุปถั่วเหลืองอาหาร ( TSB ) และบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศา C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง และระดับที่5000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 นาที หลังการปั่นเหวี่ยง แบคทีเรียคือล้างด้วยน้ำเกลือปลอดเชื้อสองครั้งและความเข้มข้นสุดท้ายของถูกระงับการปรับ 1010 เซลล์ที่แน่นอนในน้ำเกลือ ที่น้ำเกลือที่มีแบคทีเรียโปรไบโอติก ( L . plantarumและ B . megaterium ) ถูกเพิ่มลงในอาหารเชิงพาณิชย์ให้ตัวเลขเริ่มต้นของ 107เซลล์ gdiet-1 ( Aly et al . , 2551 ข )สองของสารแขวนลอยผสมอัตรา 1 : 1 และผสมกับอาหารที่สร้างอาหารที่มีทั้งL . plantarum และ B . megaterium . อาหาร คือกระเป๋าพลาสติกและเก็บในตู้เย็น ( 4 ° C ) และนี้การเตรียมการทำซ้ำทุกสองสัปดาห์ วัฒนธรรมบริสุทธิ์โพรไบโอติกแบคทีเรียถูกเก็บรักษาไว้ในช่องแช่แข็งลึกที่- 20 ° C กับกลีเซอรอลเพื่อการใช้งานต่อไปและรูทีนใช้ , หุ้นวัฒนธรรมเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศา
การแปล กรุณารอสักครู่..
