2.5. Determination of the amount of

2.5. Determination of the amount of viable cells in co-cultures by inoculation onto dense nutrient media (Koch method)

A number of successively diluted suspensions of microbial co-cultures (degree of dilution, 10−6) were prepared to produce separate colonies. Suspensions were inoculated by the surface method from three last dilutions (4 parallel inoculations). Colonies were counted after 7 days of incubation.

2.6. Biosensor measurements

Electrochemical measurements were carried out using an Ekspert-001-4.0.1 pH meter–ionometer–BOD thermal oximeter (Ekonics-expert Ltd., Russia) coupled with a computer operated by EXP2PR specialized software (Ekonics-expert Ltd., Russia). The software enables registration and processing of biosensor signals. The maximal rate of oxygen concentration change at the addition of substrates (mg/dm3·s) was the measured parameter (biosensor response). Clark-type oxygen electrodes containing immobilized microbial cells were used as transducers. Measurements were done in a 5-cm3 cuvette. A sodium–potassium phosphate buffer solution (pH 6.8) was used; the total concentration of the salts, 20 mM. The solution was mixed by a magnetic mixer (200 rpm). A mixture of glucose and glutamic acid (GGA) at a mass ratio of 1:1, applied as the BOD5 determination standard in the Russian Federation and in international practice [2], was used as a model mixture. In accordance with the regulatory documents, a value of BOD5 equal to 205 mg/dm3 was taken to correspond to a solution containing 150 mg/dm3 glucose and 150 mg/dm3 glutamic acid (BOD5 = 0.68 × СGGA).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 การกำหนดปริมาณของเซลล์ที่มีชีวิตในวัฒนธรรมร่วมโดยการฉีดวัคซีนลงบนสื่อสารอาหารที่มีความหนาแน่นสูง (วิธี Koch) จำนวนของสารแขวนลอยปรับลดอย่างต่อเนื่องของจุลินทรีย์ร่วมวัฒนธรรม (ระดับความเจือจาง 10-6) กำลังเตรียมที่จะผลิตอาณานิคมแยกต่างหาก แขวนลอยถูกเชื้อโดยวิธีพื้นผิวจากสามเจือจางที่ผ่านมา (4 วัคซีนขนาน) อาณานิคมนับหลังจากวันที่ 7 ของการบ่ม. 2.6 ไบโอเซนเซอร์วัดการวัดไฟฟ้าได้ดำเนินการโดยใช้ Ekspert-001-4.0.1 ค่า pH เมตร ionometer-BOD oximeter ร้อน (Ekonics ผู้เชี่ยวชาญ จำกัด รัสเซีย) ควบคู่ไปกับการดำเนินการโดยคอมพิวเตอร์ EXP2PR ซอฟต์แวร์พิเศษ (Ekonics ผู้เชี่ยวชาญ จำกัด รัสเซีย ) ซอฟต์แวร์ที่ช่วยให้การลงทะเบียนและการประมวลผลของสัญญาณไบโอเซนเซอร์ อัตราสูงสุดของการเปลี่ยนแปลงความเข้มข้นของออกซิเจนที่เพิ่มขึ้นของพื้นผิว (mg / dm3 · s) เป็นพารามิเตอร์ที่วัดได้ (ตอบสนองไบโอเซนเซอร์) ขั้วไฟฟ้าออกซิเจนคลาร์กชนิดที่มีการตรึงเซลล์จุลินทรีย์ใช้เป็นก้อน วัดได้ทำใน cuvette 5 cm3 ฟอสเฟตโซเดียมโพแทสเซียมสารละลายบัฟเฟอร์ (pH 6.8) ถูกนำมาใช้; ความเข้มข้นของเกลือรวม 20 มิลลิ วิธีการแก้ปัญหาที่ได้รับการผสมโดยผสมแม่เหล็ก (200 รอบต่อนาที) ส่วนผสมของน้ำตาลกลูโคสและกรดกลูตามิก (GGA) ในอัตราส่วนมวลของ 1: 1, นำมาใช้เป็นมาตรฐานการกำหนด BOD5 ในรัสเซียและในทางปฏิบัติระหว่างประเทศ [2] ที่ถูกนำมาใช้เป็นส่วนผสมแบบ ตามเอกสารการกำกับดูแลค่าของ BOD5 เท่ากับ 205 mg / dm3 ถูกนำตัวให้สอดคล้องกับวิธีการแก้ปัญหาที่มี 150 mg / dm3 กลูโคสและ 150 มก. / กรดกลูตามิ dm3 (BOD5 = 0.68 ×СGGA)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 การกำหนดปริมาณได้ เซลล์ในวัฒนธรรมโดยการใส่สารอาหารที่หนาแน่นร่วมสื่อ ( Koch Method )

จำนวนกระชั้นชิดเจือจางสารแขวนลอยของวัฒนธรรม Co จุลินทรีย์ ( ระดับการเจือจาง 10 − 6 ) เตรียมที่จะผลิตแยกอาณานิคม ช่วงล่างเป็นเชื้อผิววิธีจากสามวิธีการสุดท้าย ( 4 Inoculations ขนาน )อาณานิคมได้ถูกนับหลัง 7 วัน 1 .

2.6 ไบโอเซนเซอร์วัด

ไฟฟ้าเคมีวัดได้ทดลองใช้ ekspert-001-4.0.1 เครื่องวัดค่า BOD ( ionometer –ความร้อน ( ekonics ผู้เชี่ยวชาญ Ltd . , รัสเซีย ) คู่กับซอฟต์แวร์คอมพิวเตอร์ที่ดำเนินการโดยเฉพาะ exp2pr ( ekonics ผู้เชี่ยวชาญ ( รัสเซีย ) ซอฟต์แวร์ที่ช่วยให้งานทะเบียนและประมวลผลสัญญาณของไบโอเซนเซอร์ .อัตราสูงสุดของการเปลี่ยนแปลงความเข้มข้นออกซิเจนที่นอกเหนือจากพื้นผิว ( มก. / dm3 ด้วย S ) คือการวัดพารามิเตอร์ ( ตอบสนองไบโอเซนเซอร์ ) คลาร์กชนิดขั้วไฟฟ้าที่มีออกซิเจนจุลินทรีย์ตรึงเซลล์ถูกใช้เป็นก้อน วัดอยู่ใน 5-cm3 พิทยาพล . โซเดียม - โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 6.8 ) เป็นโซลูชั่นที่ใช้ โดยความเข้มข้นของเกลือ 20 มิลลิเมตรสารละลายที่ผสมโดยเครื่องผสมแม่เหล็ก ( 200 รอบต่อนาที ) มีส่วนผสมของกลูโคสและกรดกลูตามิค ( ก๊ะ ) ที่อัตราส่วนโดยมวลของ 1 : 1 ใช้เป็น factor กำหนดมาตรฐานในสหพันธรัฐรัสเซียและในการปฏิบัติระหว่างประเทศ [ 2 ] ที่ใช้เป็นส่วนผสมแบบ ตามเอกสารของข้อบังคับค่า factor เท่ากับ 205 มก. / dm3 นั้นสอดคล้องกับสารละลายที่มี 150 มก. / dm3 กลูโคสและกรดกลูตามิค ( 150 มก. / dm3 factor = 0.68 ×Сก๊ะ )