The superoxide anion (O•2−) was mea

The superoxide anion (O•
2−) was measured by EPR-spin trapping
using 5,5-dimethyl-1-pyrroline-N-oxide (DMPO) as a spin
trap. The detection of O•
2− was performed according to (Van
Doorslaer et al., 1999) with some modifications. Isolated thylakoids
(1 mg chl/mL) were diluted with DMSO to a chl concentration of
200 g chl mL−1. The reaction mixture (80% DMSO, 20% buffer D) was mixed with 1 M DMPO to a final concentration of 50 mM,
transferred to a flat cell and illuminated for 5 min at 500 mol
quanta m−2 s−1 within the EPR spectrometer MiniScope MS300
(Magnettech GmbH, Berlin, Germany). The EPR conditions were
as follows; 1000 mG modulation amplitude, 13 mW microwave
power, 5 E gain. Each experiment was performed in triplicate and
involved an average of three scans.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ไอออน superoxide (O •
2) โดยวัดจาก EPR
หมุนดักใช้5,5-dimethyl-1-pyrroline-N-ออกไซด์ (DMPO)
เป็นสปินกับดัก การตรวจสอบของ O •
2 ได้ดำเนินการตาม (Van
Doorslaer et al., 1999) มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง thylakoids แยก
(1 มิลลิกรัม CHL / มิลลิลิตร) ถูกเจือจางด้วย DMSO ที่จะมีความเข้มข้นของ CHL
200 กรัม CHL mL-1 ผสมปฏิกิริยา (80% DMSO 20% บัฟเฟอร์ D) ผสมกับ 1 M DMPO จะมีความเข้มข้นสุดท้ายของ 50 มิลลิ,
โอนไปยังเซลล์แบนและสว่างเป็นเวลา 5 นาทีที่ 500
โมลควอนตั้ม-2 s-1 ภายใน EPR สเปกโตรมิเตอร์ MiniScope MS300
(Magnettech GmbH, เบอร์ลิน, เยอรมนี) เงื่อนไข EPR
มีดังต่อไปนี้ 1000 mg คลื่นเอฟเอ็ม 13 mW
ไมโครเวฟอำนาจกำไร5 E แต่ละทดลองดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่าและมีส่วนร่วมเฉลี่ยของสามสแกน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

Superoxide anion ( o
-
2 − ) คือวัดโดย EPR หมุนดัก
ใช้ 5,5-dimethyl-1-pyrroline-n-oxide ( dmpo ) เป็นปั่น
กับดัก การตรวจหา O -
2 −ได้ปฏิบัติตาม ( รถตู้
doorslaer et al . , 1999 ) มีการปรับเปลี่ยน แยกไธลาคอยด์
( 1 mg / ml ( CHL ) เจือจางกับ DMSO กับ CHL ความเข้มข้น
200 g CHL ml − 1 ปฏิกิริยา ( DMSO ผสม 80% ,20% บัฟเฟอร์ D ) ผสมกับ 1 m dmpo กับความเข้มข้นสุดท้าย 50 mm
ย้ายเซลล์แบนและสว่างนาน 5 นาที 500 มล
Quanta m − 2 s − 1 ภายใน EPR สเปก miniscope ms300
( magnettech GmbH , เบอร์ลิน , เยอรมนี ) เงื่อนไข EPR )
ดังนี้ ; 1 , 000 มก. ปรับขนาด 13 วัตต์พลังงานไมโครเวฟ
5 E ได้รับ แต่ละทดสอบทั้งสามใบและ
เกี่ยวข้องเฉลี่ย 3 สแกน