The total saline extract was obtained from infective larvae L3 of S.
venezuelensis according to Gonzaga et al. (2011) [10]. L3 larvae were
re-suspended in 0.01 M PBS (pH 7.2) containing protease inhibitors
(1 mM ethylene diamine tetracetic acid; 1 mM benzamidine; 1 mM
phenyl methyl sulfonyl fluoride; 1 mM aprotinin and 1 mM
leupeptin) and subjected to mechanical disruption of 5 cycles of
freezing (1 min, −96 °C) and thawing/sonication (5 min, 40 kHz,
4 °C) (Thornton, Electronics Inspec, São Paulo, Brazil). After overnight
incubation at 4 °C with constant agitation, the solution was
centrifuged at 12,400 ×g for 30 min at 4 °C. The protein was quanti-
fied according to Lowry et al. (1951) [11] and the solution was stored
at −20 °C until use.
สารสกัดจากน้ำเกลือทั้งหมดที่ได้รับจากการติดเชื้อ L3 ตัวอ่อนของเอส
venezuelensis ตามซะ et al, (2011) [10] L3 ตัวอ่อน
อีกครั้งที่ลอยอยู่ใน 0.01 M พีบีเอส (pH 7.2) ที่มีน้ำย่อยโปรตีน
(1 มิลลิกรดเอทิลีน diamine tetracetic; benzamidine 1 มิลลิ 1 มิลลิ
phenyl methyl sulfonyl ฟลูออไร 1 มิลลิ Aprotinin และ 1 มิลลิ
leupeptin) และอาจมีการหยุดชะงักทางกลของ 5 รอบของ
การแช่แข็ง (1 นาที -96 ° C) และละลาย / sonication (5 นาที 40 เฮิร์ทซ์
4 ° C) (ทอร์นตัน, เครื่องใช้ไฟฟ้า Inspec, เซาเปาโลประเทศบราซิล) หลังจากข้ามคืน
บ่มที่อุณหภูมิ 4 ° C มีความปั่นป่วนอย่างต่อเนื่อง, การแก้ปัญหาที่ถูก
หมุนเหวี่ยงที่ 12,400 ×กรัมเป็นเวลา 30 นาทีที่ 4 ° C โปรตีนที่ถูก quanti-
กระแสไฟตามโลว์รีย์, et al (1951) [11] และวิธีการแก้ปัญหาที่ถูกเก็บไว้
ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสจนการใช้งาน
การแปล กรุณารอสักครู่..

สารสกัดที่ได้จากเกลือทั้งหมดไม่มีตัวอ่อน L3 S .venezuelensis ตามกอนซากา et al . ( 2011 ) [ 10 ] L3 ~ i )อีกครั้งที่แขวนลอยใน 0.01 M PBS ( pH 7.2 ) ที่มีเอนไซม์โปรตีเอสอินฮิบิเตอร์( 1 mM กรดเอทิลีนไดอะ tetracetic 1 มม. benzamidine 1 มม.ฟีนิลเมทิล sulfonyl ฟลูออไรด์ ; aprotinin 1 มม. และ 1 มม.ลูเพปติน ) และต้องหยุดชะงักกล 5 รอบแช่แข็ง ( 1 นาที , − 96 ° C ) และละลาย / sonication ( 5 นาที , 40 kHz ,4 ° C ) ( inspec อิเล็กทรอนิกส์ , ธอร์นตัน , เซาเปาลู , บราซิล ) หลังจากค้างคืนบ่มที่ 4 ° C คงที่อัตราการกวนสารละลายระดับที่ 12400 × G สำหรับ 30 นาทีที่ 4 ° C คือการไฟฟ้า - โปรตีนfied ตามเบส et al . ( 1951 ) [ 11 ] และโซลูชั่นที่ถูกเก็บไว้ที่ 20 องศา C −จนใช้
การแปล กรุณารอสักครู่..
