2. Experimental2.1. Chemicals and r

2. Experimental
2.1. Chemicals and reagents
Carbendazim and thiabendazole were obtained from Dr. Ehrenstorfer
(Augsburg, Germany), and 6-benzylaminopurine was from
Sigma-aldrich (Steinheim, Germany), and their chemical structures
and physicochemical properties are shown in Table 1. Formic acid
was from Sigma-aldrich (Steinheim, Germany). HPLC-grade
acetonitrile, sodium chloride were obtained from Merck (Darmstadt,
Germany). Magnesium sulfate, sodium acetate, primary secondary
amine (PSA), octadecylsilyl (C18), sodium citrate tribasic
dehydrate and sodium citrate dibasic sesquihydrate were obtained
from Agilent technologies (Santa Clara, CA, USA). Deionized water
was purified with DE/Genpure standard systems (Niederelbert,
Germany).
Stock standard solutions of each compound were prepared in
acetonitrile at concentration of 200 lg/mL and store at 20 C. A
mixture of these standards at 10 lg/mL, prepared in acetonitrile,
was used to prepare the standard solutions in solvent and in matrix
and spiking solutions (20 ng/g, 40 ng/g). Calibration standard solutions,
at the concentration of 0.002, 0.01, 0.02, 0.05, 0.1 and 0.2 lg/
mL, in solvent and in matrix were prepared just before the analysis.
2.2. Instrumentation
Chromatographic determination was performed with an
Acquity H-class ultra-performance liquid chromatography
(Waters, Milford, MA, USA) connected to TSQ Quantum Ultra triple
stage quadrupole mass spectrometer (Thermo Fisher Scientific Inc.,
Waltham, MA, USA) with a electrospray ionization (ESI) probe. The
LC was operated under gradient conditions with mobile phase A
{water/methanol (95:5) + 0.1% formic acid} and B {water/methanol
(50:50)} at a flow rate of 0.4 mL/min. The linear gradient program
was set as follow: 95% of A for 0.2 min, 100% B (0.2–4 min, hold for
0.5 min) and 95% A (4.5–6 min, for re-equilibration). The injection
volume was 1uL. The analytic column was 50 mm  2.1 mm (i.d),
1.7 um particle size Acquity UPLC BEH C18 column (Waters,
USA) which was kept for 40 C during analysis.
The MS conditions were: ion source polarity: positive mode,
spray voltage: 3.5 kV, vaporizer temperature: 200 C, sheath gas
pressure (N2): 45 units, auxillay gas pressure (N2): 15 units, capillary
temperature: 300 C, Collision cell pressure: 1.5 mTorr. Optimized
values of cone voltages and collision energies for each
analyte were obtained by infusing 1000 ng/g of each standard at
a rate of 10 lL/min, which was tuned by Quantum Tune Master
software.
2.3. Sample collection
Blank samples were obtained by firstly purchasing the bean
seed from local market and then cultivating it for a long time (over
10 days) because of the difficulty in finding bean sprouts confirmed
not containing the target compounds.
The applicability of optimized method was evaluated by analyzing
126 samples purchased from local traditional markets and
supermarkets in Gwang-ju city. The samples were stored at 10 C
until analysis, which does not exceed 2 days.
2.4. Sample preparation
ApprApproximately 50 g of representative portion of bean sprouts
was homogenized in a blender. Ten g of homogenized sample
was weighted into 50 mL centrifuge tube. Ten mL of acetonitrile
was added and the mixture was shaken by hand for 1 min. After
adding 3 g sodium chloride and 1 g sodium acetate, tubes were
shaken vigorously for 1 min and centrifuged for 5 min at 3000
RPM using Allegra X-15R (Beckman coulter, CA, USA). Then, 5 mL
of supernatant were transferred to 15 mL centrifuge tube containing
magnesium sulfate. Next, the tubes were shaken by hand for
1 min and centrifuged again for 5 min at 3000 RPM. After centrifugation,
200 lL of upper layer extract diluted with 100 lL acetonitrile
and 700 lL water were injected to the LC–MS/MS system.
The mixture was filtered through a 0.2 lm PTFE syringe filter
(Whatman, USA) before analysis. We chose this method after testing
6 different combinations of salting-out agents and 4 types of
sorbents for clean-up. All experiments were performed in quintuplicate
and the data were analyzed with IBM SPSS statictics 20,
using analysis of variance (ANOVA) at 95% confidence interval, to
see if there were the difference between combinations.
2.5. Method validation and matrix-effect
The method validation was performed on the basis of
SANCO/2013/12571 (SANCO, 2013) and ICH/2005/Q2/R1 (ICH,
2005). Linearity, accuracy, precision, limit of detection (LOD), limit
of quantification (LOQ) were evaluated.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. ทดลอง2.1. สารเคมีและสารCarbendazim และ thiabendazole ได้รับมาจากดร. Ehrenstorfer(ออคสเบิร์ก เยอรมนี), และ 6-benzylaminopurine จากซิกม่า-aldrich (Steinheim เยอรมนี), และโครงสร้างทางเคมีของพวกเขาและคุณลักษณะคุณสมบัติที่แสดงในตารางที่ 1 กรดฟอร์มิกมาจาก Sigma aldrich (Steinheim เยอรมนี) HPLC เกรดacetonitrile รับโซเดียมคลอไรด์จากเมอร์ค (ดาร์มสเยอรมนี) แมกนีเซียมซัลเฟต โซเดียมอะซิเตท หลักรองมีน (PSA), octadecylsilyl (C18), โซเดียมซิเตรต tribasicdehydrate และโซเดียมซิเตรต dibasic sesquihydrate รับจาก Agilent เทคโนโลยี (ซานตาคลารา CA, USA) จุบริสุทธิ์ ด้วยระบบมาตรฐาน DE/Genpure (Niederelbertเยอรมนี)มีเตรียมสารประกอบแต่ละหุ้นแก้ในacetonitrile ที่ความเข้มข้นของ lg/mL และเก็บที่ 20 เซลเซียส A 200ส่วนผสมของมาตรฐานที่ 10 lg/mL ปรุง acetonitrileใช้ในการเตรียมการแก้ ในตัวทำละลาย และเมตริกซ์และองศาแก้ไข (20 ng/g, 40 ng/g) โซลูชั่นมาตรฐานการสอบเทียบที่ความเข้มข้นของ 0.002, 0.01, 0.02, 0.05, 0.1 และ 0.2 lg /มล. ในตัวทำละลาย และเมตริกซ์มีเตรียมก่อนการวิเคราะห์2.2. ใช้เครื่องมือโครมากำหนดดำเนินการด้วยการH Acquity ระดับประสิทธิภาพพิเศษของเหลว chromatography(น้ำ ลฟอร์ด MA สหรัฐอเมริกา) ที่เชื่อมต่อกับสาม TSQ ควอนตัม Ultraขั้น quadrupole มวลโตรมิเตอร์ (Inc. ที่วิทยาศาสตร์เทอร์โมฟิชเชอร์นีซ MA, USA) กับโพรบไอออไนซ์ (ESI) มิกส์ การLC ถูกดำเนินการภายใต้เงื่อนไขไล่ระดับสีกับมือถือเฟส A{น้ำ/เมทานอล (95:5) + 0.1% กรด} และ B {น้ำ/เมทานอล(50:50) } ที่อัตราไหล 0.4 mL/min โปรแกรมเชิงเส้นของการไล่ระดับสีการตั้งค่าดังนี้: 95% ของ 0.2 นาที 100% B (0.2 – 4 นาที ค้างสำหรับนาที 0.5) และ 95% (4.5 – 6 นาที สำหรับใหม่ equilibration) การฉีดไดรฟ์ข้อมูลถูก 1uL คอลัมน์การวิเคราะห์ถูก 50 มม. 2.1 mm (ประชาชน),1.7 um อนุภาคขนาดคอลัมน์ C18 เบ UPLC Acquity (น้ำประเทศสหรัฐอเมริกาซึ่งถูกเก็บไว้สำหรับ 40 C ระหว่างการวิเคราะห์มีเงื่อนไข MS: ขั้วแหล่งไอออน: โหมดบวกสเปรย์แรงดัน: 3.5 kV, vaporizer อุณหภูมิ: C 200 ฝักก๊าซความดัน (N2): 45 หน่วย ความดันก๊าซ auxillay (N2): 15 หน่วย ฝอยอุณหภูมิ: 300 C แรงดันเซลล์ชน: 1.5 mTorr ดีที่สุดค่าของแรงดันกรวยและพลังงานการชนแต่ละได้รับมา โดยผสมผสาน 1000 ng/g แต่ละมาตรฐานที่ analyteอัตรา 10 lL/นาที ซึ่งถูกปรับแต่ง โดยควอนตัมหลักแต่งซอฟต์แวร์2.3. เก็บตัวอย่างตัวอย่างเปล่ารับซื้อถั่วประการแรกเมล็ดพันธุ์จากตลาดท้องถิ่นและจากนั้น เพาะปลูกเป็นเวลานาน (มากกว่า10 วัน) เนื่องจากความยากลำบากในการหาถั่วงอกที่ได้รับการยืนยันไม่ประกอบด้วยสารเป้าหมายลับปรับวิธีการรับการประเมิน โดยวิเคราะห์ตัวอย่าง 126 ที่ซื้อจากตลาดดั้งเดิม และซูเปอร์มาร์เก็ตในกวางจู ตัวอย่างถูกเก็บไว้ที่ 10 Cจนถึงการวิเคราะห์ ซึ่งไม่เกิน 2 วัน2.4. ตัวอย่างApprApproximately 50 กรัมของส่วนที่เป็นตัวแทนของถั่วงอกถูก homogenized ในเครื่องปั่น ตัวอย่าง homogenized สิบกรัมไม่ถ่วงน้ำหนักลงในหลอดหมุนเหวี่ยง 50 มล. 10 มิลลิลิตร acetonitrileเพิ่ม และส่วนผสมถูกเขย่าด้วยมือสำหรับ 1 นาทีหลังจากเพิ่ม 3 กรัมโซเดียมคลอไรด์และ 1 กรัมโซเดียมอะซิเตท หลอดได้เขย่าแรง ๆ สำหรับ 1 นาที และ 5 นาทีที่ 3000 เหวี่ยงRPM ใช้ Allegra X-15R (Beckman coulter, CA, USA) แล้ว 5 มล.ของ supernatant ถูกย้ายไปที่ประกอบด้วยหลอดขนาด 15 มล.ปั่นเหวี่ยงแมกนีเซียมซัลเฟต ถัดไป หลอดถูกเขย่าด้วยมือสำหรับ1 นาที และเหวี่ยงอีกครั้งสำหรับ 5 นาทีที่ 3000 RPM หลังจากหมุนเหวี่ยง200 จะของสารสกัดชั้นบนกับ 100 lL acetonitrileและ 700 น้ำจะถูกฉีดไปยังระบบ LC – MS/MSส่วนผสมได้กรองผ่านตัวกรองเข็ม PTFE lm 0.2(Whatman สหรัฐอเมริกา) ก่อนที่จะวิเคราะห์ เราเลือกวิธีนี้หลังจากการทดสอบรวมกัน 6 ตัวแทนออกหมักเกลือและ 4 ประเภทsorbents สำหรับล้าง ดำเนินการทดลองทั้งหมดใน quintuplicateและได้วิเคราะห์ข้อมูล ด้วย IBM SPSS statictics 20การวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) ที่ช่วงความเชื่อมั่น 95%ดูถ้ามีความแตกต่างระหว่างชุด2.5 วิธีสอบและเมทริกซ์ผลการตรวจสอบวิธีดำเนินการบนพื้นฐานของคอย/2013/12571 (SANCO, 2013) และ ICH/2005/Q2/R1 (ICH2005) จำกัดความเป็นเส้นตรง ถูกต้อง แม่นยำ ขีดจำกัดของการตรวจสอบ (LOD),การนับ (ของ LOQ) ที่ประเมิน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. การทดลอง
2.1 สารเคมีและสารเคมี
carbendazim thiabendazole และได้รับจากดร. Ehrenstorfer
(ออกซ์เยอรมนี) และ 6-benzylaminopurine จาก
Sigma-Aldrich (Steinheim เยอรมนี) และโครงสร้างทางเคมีของพวกเขา
และคุณสมบัติทางเคมีกายภาพจะแสดงในตารางที่ 1 กรด
มาจาก Sigma-Aldrich (Steinheim, เยอรมนี) HPLC เกรด
acetonitrile โซเดียมคลอไรด์ที่ได้รับจากเมอร์ค (ดาร์มสตัด,
เยอรมนี) แมกนีเซียมซัลเฟตโซเดียมอะซิเตทรองหลัก
amine (PSA) octadecylsilyl (C18) โซเดียมซิเตรท tribasic
คายน้ำและโซเดียมซิเตรท sesquihydrate dibasic ที่ได้รับ
จาก Agilent Technologies (Santa Clara, CA, USA) deionized น้ำ
บริสุทธิ์ที่มีระบบมาตรฐาน / Genpure (Niederelbert,
เยอรมนี).
การแก้ปัญหามาตรฐานการแจ้งสารประกอบแต่ละชนิดได้จัดทำขึ้น
acetonitrile ที่ความเข้มข้น 200 LG / มิลลิลิตรและเก็บที่ 20 เซลเซียส
ส่วนผสมของมาตรฐานเหล่านี้ที่ 10 LG / ml จัดทำขึ้น acetonitrile,
ถูกใช้ในการเตรียมสารละลายมาตรฐานในตัวทำละลายและเมทริกซ์
และการแก้ปัญหาองศา (20 ng / G, 40 ng / g) การแก้ปัญหามาตรฐานการสอบเทียบ
ที่ความเข้มข้นของ 0.002, 0.01, 0.02, 0.05, 0.1 และ 0.2 LG /
มิลลิลิตรในตัวทำละลายและเมทริกซ์ได้จัดทำก่อนการวิเคราะห์.
2.2 เครื่องมือวัด
ความมุ่งมั่นของโครมาได้ดำเนินการกับ
Acquity H-ระดับอัลตร้าที่มีประสิทธิภาพของเหลว chromatography
(Waters, ฟอร์ด, MA, USA) เชื่อมต่อกับ TSQ ควอนตัมอัลตร้าสาม
ขั้นตอน quadrupole สเปกโตรมิเตอร์มวล (Thermo Fisher Scientific อิงค์
Waltham, MA, USA) ด้วย electrospray ไอออนไนซ์ (ESI) สอบสวน
LC ได้รับการดำเนินการภายใต้เงื่อนไขการไล่ระดับสีกับเฟสเคลื่อนที่
{น้ำ / เมทานอล (95: 5) + 0.1% กรด} และ {B น้ำ / เมทานอล
(50:50)} ที่อัตราการไหล 0.4 มิลลิลิตร / นาที โปรแกรมลาดเชิงเส้น
ถูกกำหนดดังนี้ 95% ของ 0.2 นาที, 100% B (0.2-4 นาทีค้างไว้
0.5 นาที) และ 95% A (4.5-6 นาทีสำหรับการปรับสมดุลอีกครั้ง) ฉีด
ปริมาณเป็น 1UL คอลัมน์วิเคราะห์ 50 มม? 2.1 มิลลิเมตร (ID)
1.7 UM อนุภาคขนาด Acquity UPLC? คอลัมน์ BEH C18 (Waters,
USA) ซึ่งได้รับการเก็บรักษาไว้ 40 C ระหว่างการวิเคราะห์.
เงื่อนไข MS คือ: ขั้วแหล่งกำเนิดไอออน: โหมดบวก
สเปรย์แรงดันไฟฟ้า: 3.5 kV อุณหภูมิไอ: 200 C, ก๊าซปลอก
ดัน (N2): 45 หน่วย ความดันก๊าซ auxillay (N2): 15 หน่วยเส้นเลือดฝอย
ที่อุณหภูมิ 300 องศาเซลเซียสความดันเซลล์ชน: 1.5 mTorr เพิ่มประสิทธิภาพ
ค่าของแรงดันไฟฟ้ากรวยและพลังงานการปะทะกันสำหรับแต่ละ
วิเคราะห์ที่ได้จากการผสมผสานระหว่าง 1,000 นาโนกรัม / กรัมของแต่ละมาตรฐานที่
อัตรา 10 LL / นาทีซึ่งได้รับการปรับจูนโดยโทควอนตัมปรับแต่ง
ซอฟต์แวร์.
2.3 การเก็บตัวอย่าง
ตัวอย่างที่ว่างเปล่าที่ได้จากตอนแรกซื้อถั่ว
เมล็ดจากตลาดในประเทศและจากนั้นการเพาะปลูกมันเป็นเวลานาน (มากกว่า
10 วัน) เพราะความยากลำบากในการหาถั่วงอกยืนยัน
ไม่ได้มีสารประกอบเป้าหมาย.
การบังคับของวิธีการที่ดีที่สุดถูกประเมิน โดยการวิเคราะห์
126 ตัวอย่างที่ซื้อมาจากตลาดแบบดั้งเดิมในท้องถิ่นและ
ซูเปอร์มาร์เก็ตในเมืองกวางจู ตัวอย่างถูกเก็บไว้ที่ 10 องศาเซลเซียส
จนการวิเคราะห์ที่ไม่เกิน 2 วัน.
2.4 การเตรียมสารตัวอย่าง
ApprApproximately 50 กรัมจากส่วนที่เป็นตัวแทนของถั่วงอก
ถูกปั่นในเครื่องปั่น สิบกรัมหดหาย
ถ่วงน้ำหนักลงไป 50 หลอด centrifuge มล สิบมล acetonitrile
ถูกบันทึกและส่วนผสมที่ถูกเขย่าด้วยมือเป็นเวลา 1 นาที หลังจาก
เพิ่ม 3 กรัมโซเดียมคลอไรด์และ 1 กรัมโซเดียมอะซิเตทหลอดถูก
เขย่าแรง ๆ เป็นเวลา 1 นาทีและปั่นเป็นเวลา 5 นาทีที่ 3000
รอบต่อนาทีใช้ Allegra X-15R (Beckman Coulter, CA, USA) จากนั้น 5 มิลลิลิตร
ของสารละลายถูกย้ายไป 15 มล centrifuge หลอดที่มี
แมกนีเซียมซัลเฟต ถัดไปหลอดถูกเขย่าด้วยมือสำหรับ
1 นาทีและปั่นอีกครั้งสำหรับ 5 นาทีที่ 3000 รอบต่อนาที หลังจากหมุนเหวี่ยง
200 LL ของสารสกัดชั้นบนเจือจางด้วย 100 LL acetonitrile
และ 700 LL น้ำถูกฉีดกับระบบ LC-MS / MS.
ส่วนผสมที่ถูกกรองผ่าน 0.2 LM PTFE เข็มฉีดยากรอง
(Whatman, USA) ก่อนที่จะวิเคราะห์ เราเลือกวิธีการนี้หลังจากการทดสอบ
6 แตกต่างกันของตัวแทนเกลือออกและ 4 ประเภทของ
ตัวดูดซับสำหรับการทำความสะอาดขึ้น การทดลองทั้งหมดถูกดำเนินการใน quintuplicate
และข้อมูลที่ได้มาวิเคราะห์กับ IBM SPSS statictics 20
โดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) ที่ระดับความเชื่อมั่น 95% เพื่อ
ดูว่ามีความแตกต่างระหว่างชุด.
2.5 ตรวจสอบวิธีการและเมทริกซ์ผล
การตรวจสอบวิธีการที่ได้ดำเนินการบนพื้นฐานของ
SANCO / 2013/12571 (SANCO, 2013) และไอซี / 2005 / Q2 / R1 (ไอซี,
2005) linearity ความถูกต้องแม่นยำของการตรวจสอบการ จำกัด (LOD) จำกัด
ของปริมาณ (LOQ) ได้รับการประเมิน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . ทดลอง2.1 . เคมีและสารเคมีปลาที่ได้จาก ดร. ehrenstorfer ไธอาเบนดาโซล( เอาก์สบวร์ก , เยอรมนี ) , และ 6-benzylaminopurine จากซิกม่า Aldrich ( steinheim , เยอรมัน ) , และโครงสร้างทางเคมีและสมบัติทางเคมีกายภาพจะแสดงในตารางที่ 1 กรดฟอร์มิคจาก ซิกม่า Aldrich ( steinheim , เยอรมัน ) ชั้นประถมศึกษาปีที่ 4ไนโซเดียมคลอไรด์ที่ได้รับจากเมอร์ค ( ดาร์มชตัท ,เยอรมนี ) แมกนีเซียมซัลเฟต , โซเดียมอะซิเตต , ประถมมัธยมเอมีน ( PSA ) octadecylsilyl ( c18 ) , โซเดียมซิเตรต tribasicและโซเดียมซิเตรต sesquihydrate ไล่น้ำออกได้จาก Agilent Technologies ( ซานตาคลารา แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา ) คล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำบริสุทธิ์ด้วยระบบมาตรฐาน ( niederelbert de / genpure ,เยอรมนี )สินค้ามาตรฐานโซลูชั่นของแต่ละสารประกอบที่ถูกเตรียมไว้ในไน ที่ความเข้มข้น 200 LG / ml และเก็บที่อุณหภูมิ 20 C .ส่วนผสมของมาตรฐานเหล่านี้ที่ LG / 10 ml ไว้ไนใช้เตรียมโซลูชั่นมาตรฐานในตัวทำละลายและเมทริกซ์ขึ้นและโซลูชั่น ( 20 นาโนกรัม / กรัม 40 ng / g ) โซลูชั่นการสอบเทียบมาตรฐานที่ความเข้มข้น 0.02 0.002 , 0.01 , 0.05 , 0.1 และ 0.2 LG /เอนไซม์ในตัวทำละลายและเมทริกซ์เตรียมก่อนการวิเคราะห์2.2 . เครื่องมือวัดการกำหนดและแสดงด้วยacquity h-class ประสิทธิภาพ liquid chromatography เป็นพิเศษ( น้ำ , ฟอร์ด , MA , USA ) เชื่อมต่อกับ tsq ควอนตัม อัลตร้า ทริปเปิ้ลขั้นสี่ขั้วแมสสเปกโทรมิเตอร์ ( เทอร์โมฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์สำหรับวอลแทม , MA , USA ) ด้วยวิธีพ่นละอองไฟฟ้าไอออไนเซชัน ( ESI ) ด้วย ที่LC ดำเนินการภายใต้เงื่อนไขกับเฟสเคลื่อนที่เป็นไล่ระดับ{ น้ำต่อเมทานอล ( 95:5 ) + 0.1% กรด } B { น้ำต่อเมทานอล( 50 : 50 ) } ในอัตรา 0.4 มิลลิลิตรต่อนาที โปรแกรมเชิงเส้น ไล่ระดับเป็นชุดดังนี้ 95% ของสำหรับ 0.2 นาที 100 % B ( 0.2 – 4 นาที ถือสำหรับ0.5 นาที ) และ 95 เปอร์เซ็นต์ ( 4.5 - 6 นาที เพื่อจะ equilibration ) ที่ฉีดปริมาณ 1ul . คอลัมน์ วิเคราะห์เป็น 50 มม. 2.1 มม. ( i.d )คอลัมน์ 1.7 . ขนาดอนุภาค acquity uplc beh c18 ( น้ำสหรัฐอเมริกา ) ซึ่งถูกเก็บไว้ 40 C ในระหว่างการวิเคราะห์เงื่อนไข : MS ขั้วแหล่งกำเนิดไอออน : โหมดบวกสเปรย์แรงดัน : 3.5 กิโล อุณหภูมิ 200 องศาเซลเซียส ปลอกแก๊ส vaporizer :แรงดัน ( 2 ) : 45 หน่วย auxillay แรงดันก๊าซ ( 2 ) : 15 หน่วย หลอดเลือดฝอยอุณหภูมิ 300 C ความดันเซลล์การชน : 1.5 mtorr . เหมาะค่าแรงดันไฟฟ้ากรวยและการชนพลังงานแต่ละครูที่ได้รับซึ่ง 1000 ng / g ของแต่ละมาตรฐานอัตราจะ / 10 นาที ซึ่งปรับแต่งต้นแบบโดยควอนตัมซอฟต์แวร์2.3 ตัวอย่างคอลเลกชันตัวอย่างเปล่าได้รับ โดยตอนแรกซื้อถั่วเมล็ดพันธุ์จากตลาดในประเทศ และกสิเป็นเวลานาน ( มากกว่า10 วัน ) เนื่องจากความยากในการหา ถั่วงอก ยืนยันไม่ประกอบด้วยเป้าหมายสารประกอบการประยุกต์ใช้วิธีการที่เหมาะสมที่ประเมินโดยการวิเคราะห์126 ตัวอย่างซื้อจากตลาดท้องถิ่นแบบดั้งเดิมและซุปเปอร์มาร์เก็ตในกวางจู เมือง ตัวอย่างที่อุณหภูมิ 10 องศาเซลเซียสจนถึงการวิเคราะห์ ซึ่งไม่เกิน 2 วัน2.4 . ตัวอย่างการเตรียมapprapproximately 50 กรัม ส่วนผู้แทนของถั่วงอกมันบดในเครื่องปั่น 10 กรัมบดตัวอย่างคือน้ำหนัก 50 มิลลิลิตร เป็นเครื่องหลอด มล สิบของไนคือการเพิ่มและส่วนผสมที่ถูกเขย่าโดยมือ 1 นาที หลังจากเพิ่ม 3 กรัมโซเดียมคลอไรด์ 1 กรัม โซเดียมอะซิเตต , ท่อคือเขย่าแรงๆ 1 นาทีและ 5 นาทีที่ 3 ระดับสำหรับรอบต่อนาทีใช้ Allegra x-15r ( Beckman Coulter , CA , USA ) จากนั้น 5 มล.นำของที่ถูกโอนไปยัง centrifuge หลอดบรรจุ 15 มล.แมกนีเซียมซัลเฟต ถัดไป , หลอดถูกเขย่าโดยมือสำหรับ1 นาที อีก 5 นาทีระดับที่ 3 , 000 รอบต่อนาที หลังการปั่นเหวี่ยง ,200 จะแยกชั้นบนเจือจางด้วย 100 จะไนและ 700 จะฉีดน้ำให้ LC MS / MS ) ระบบส่วนผสมจะถูกกรองผ่านตัวกรองเข็ม PTFE 0.2 โดย( whatman , USA ) ก่อนการวิเคราะห์ เราเลือกวิธีนี้ หลังจากการทดสอบ6 ชุดที่แตกต่างกันของเกลือออกตัวแทน และ 4 ประเภทดูดซับน้ำสำหรับทำความสะอาด ทั้งหมดเกี่ยวกับชิ้นที่ทดลองในและวิเคราะห์ข้อมูลด้วยโปรแกรม SPSS IBM statictics 20โดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวน ( ANOVA ) ที่ความเชื่อมั่น 95% ,ดูว่ามีความแตกต่างระหว่างชุด2.5 การตรวจสอบวิธีการและเมทริกซ์อิทธิพลวิธีการตรวจสอบการกระทำบนพื้นฐานของsanco / 2013 / 12571 ( sanco 2013 ) และ ICH / 2005 / 2 / R1 I ( ,2005 ) เป็นเส้นตรง , ความถูกต้อง , ความเที่ยงตรง , ขีด จำกัด ของการตรวจหา ( LOD ) จำกัดของปริมาณ ( loq ) ประเมิน