at 4 °C. Amplification products wer

at 4 °C. Amplification products were diluted 10 times with deionized H2O, and 5 μL were used for selective amplification in a total volume of 20 μL containing 1X PCR buffer [750 mM TrisHCl (pH 8.8 at 25 °C), 200 mM (NH4)2SO4 0.1% (v/v)], 0.25 μM of each E-specific and M-specific primer extended by each of three selective nucleotides (Table 3), 0.2 mM dNTPs, and 1 U of Taq DNA polymerase. PCR was performed using a touchdown protocol with initial denaturation of a cycle of 30 s at 94 °C, annealing for 30 s at 65 °C for the first cycle, after which the temperature was lowered by 0.7 °C following each cycle until it reached 56 °C, with extension for 1 min at 72 °C, followed by 30 cycles of 30 s at 94 °C, 30 s at 56°C and 1 min at 72 °C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส ขยายผลิตภัณฑ์ถูกเจือจาง 10 เท่า ด้วย H2O จุ และ 5 μL ใช้สำหรับการขยายงานในปริมาณรวมของ 20 μL ประกอบด้วยบัฟเฟอร์ 1 X PCR [750 มม. TrisHCl (ค่า pH 8.8 ที่ 25 ° C), 200 mM (NH4) 2SO4 0.1% (v/v)], 0.25 ไมครอนของรองพื้นแต่ละเฉพาะ M และ E เฉพาะขยาย โดยแต่ละนิวคลีโอไทด์ใช้เลือกสาม (ตาราง 3), dNTPs 0.2 mM และ 1 U Taq DNA พอลิเมอเรส ทำ PCR ใช้โพรโทคอเก็บเหรียญ ด้วย denaturation เริ่มต้นวงจรของ 30 s ที่ 94 ° C หลอม 30 s 65 ° c สำหรับรอบแรก หลังจากนั้นอุณหภูมิลด โดย 0.7 ° C ต่อไปแต่ละรอบจนกว่าจะถึง 56 ° C ด้วยสำหรับ 1 นาทีที่อุณหภูมิ 72 ° C ตาม ด้วยรอบ 30 30 s ที่ 94 ° C , 30 วินาทีที่ 56° C และ 1 นาทีที่อุณหภูมิ 72 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ที่ 4 ° C ผลิตภัณฑ์ amplification ถูกปรับลด 10 ครั้งกับ H2O ปราศจากไอออนและ 5 ไมโครลิตรถูกนำมาใช้สำหรับการขยายการคัดเลือกในปริมาณรวม 20 ไมโครลิตรมี 1X PCR บัฟเฟอร์ [750 มิลลิ TrisHCl (pH 8.8 ที่ 25 ° C) 200 มิลลิเมตร (NH4) 2SO4 0.1% (v / v)], 0.25 ไมครอนของแต่ละไพรเมอร์ E-ที่เฉพาะเจาะจงและ M-เฉพาะขยายโดยแต่ละสามนิวคลีโอเลือก (ตารางที่ 3), 0.2 มิลลิ dNTPs และ 1 โพลิเมอร์ U ของ Taq DNA PCR ได้ดำเนินการโดยใช้โปรโตคอลทัชดาวน์กับ denaturation เริ่มต้นของวงจรของ 30 วินาทีที่ 94 ° C, การอบเป็นเวลา 30 วินาทีที่ 65 ° C เป็นเวลารอบแรกหลังจากที่อุณหภูมิลดลง 0.7 องศาเซลเซียสต่อไปแต่ละรอบจนกว่าจะถึง 56 องศาเซลเซียสที่มีนามสกุลเป็นเวลา 1 นาทีที่ 72 ° C ตามด้วย 30 รอบของ 30 วินาทีที่ 94 ° C, 30 วินาทีที่ 56 องศาเซลเซียสและ 1 นาทีที่ 72 ° C

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ที่อุณหภูมิ 4 องศา ขยายผลิตภัณฑ์ลด 10 ครั้งด้วยคล้ายเนื้อเยื่อประสาน H2O , และ 5 μ L ใช้ในการขยายปริมาณรวมของ 20 μผมประกอบด้วย 1x PCR บัฟเฟอร์ [ 750 มม. trishcl ( 8.8 pH ที่ 25 ° C ) , 200 มม. ( NH4 ) 2so4 0.1 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) ] 0.25 μ M ของแต่ละ e-specific m-specific ไพรเมอร์และการเลือกทั้ง 3 คู่ ( ตารางที่ 3 ) dntps 0.2 มิลลิเมตร และ 1 U ของดีเอ็นเอพอลิเมอเรสได้ดี . ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสโดยใช้โปรโตคอลกับทัชดาวน์ ( เริ่มต้นของรอบ 30 s ที่ 94 ° C ขนาด 30 S 65 ° C ในรอบแรก หลังจากนั้นอุณหภูมิลดลง 0.7 ° C ตามแต่ละรอบจนกว่าจะถึง 56 ° C , สำหรับการ 1 นาทีที่ 72 ° C ตามด้วย 30 รอบ 30 s ที่ 94 ° C 30 วินาทีที่ 56 ° C และ 1 นาทีที่ 72 ° C