Dehydrogenase and in vivo ACC oxida

Dehydrogenase and in vivo ACC oxidase activity were determined in the present study as the meth- ods most frequently applied, reliable and good markers for scoring seed vigor classes (Khan 1994). The method used for measuring the activity of dehydrogenase is based on the fact that 2, 3, 5-triphenyl tetrazolium chloride (TTC) interacts with the reduction processes of living cells and accepts hydrogen from the dehydrogenases. By hydration of the TTC a red, stable and non diffusible substance, triphenyl formazan is pro- duced in living cells (Pandey 1989). For the determination of dehydrogenase activity the seeds were imbibed for 24 h in 10 cm Petri dishes on two layers of filter paper moistened with 6 ml of distilled water. Then, each of 0.2 g seeds were placed in Eppendorf tubes, ground and incubated in 1 ml 0.1 M sodium phosphate buffer, pH 7.2 containing 0.7 % (w/v) of 2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride at 25 °C for 24 hours. After that time samples were centrifuged (5 min, 5,000 x g) and the pellet was extracted six times with 1 ml acetone. The solution absorption was measured at 488 mm. A standard curve was prepared from known concentration of formazan. Each determination of seed viability and vigor was made four times.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

พร่องและในสัตว์ทดลอง ACC oxidase กิจกรรมดำเนินการในการศึกษาเป็นการปรุงยา - ods บ่อยดี และเชื่อถือได้ ใช้เครื่องหมายสำหรับการให้คะแนนชั้นเมล็ดแข็ง (คาน 1994) เป็นวิธีการที่ใช้สำหรับการวัดกิจกรรมของพร่องขึ้นอยู่กับข้อเท็จจริงว่า 2, 3, 5 triphenyl tetrazolium คลอไรด์ (TTC) การโต้ตอบกับกระบวนการลดลงของเซลล์ชีวิต และยอมรับไฮโดรเจนจากการ dehydrogenases โดยชุ่มชื้น TTC แดง มีเสถียรภาพ และปลอดสาร diffusible, triphenyl formazan เป็น pro-duced ในเซลล์ชีวิต (Pandey 1989) สำหรับการวัดกิจกรรมพร่อง เมล็ดถูก imbibed ใน 24 h ในอาหารเพาะ 10 ซม.สองชั้นของกระดาษกรองชุบกับ 6 ml ของน้ำกลั่น แล้ว แต่ละ 0.2 กรัมเมล็ดไว้ใน Eppendorf หลอด พื้นดิน และรับการกกใน 1 มิลลิลิตร 0.1 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.2 ประกอบด้วย 0.7% (w/v) 2,3,5 triphenyl tetrazolium คลอไรด์ที่ 25 ° C 24 ชั่วโมง หลังจากนั้น ตัวอย่างได้จาก (5 นาที 5,000 x g) และเม็ดถูกสกัดหกครั้ง ด้วยอะซิโตน 1 มล. แก้ปัญหาการดูดซึมโดยวัดที่ 488 มม. มีการจัดทำเส้นโค้งมาตรฐานจากทราบความเข้มข้นของ formazan แต่ละการกำหนดชีวิตของเมล็ดและความแข็งแรงทำสี่ครั้ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

dehydrogenase และในร่างกายกิจกรรม ACC oxidase ได้รับการพิจารณาในการศึกษาปัจจุบันเป็น ODS meth- ใช้บ่อยที่สุดเครื่องหมายที่เชื่อถือได้และดีสำหรับการเรียนเมล็ดคะแนนความแข็งแรง (ข่าน 1994) วิธีการที่ใช้ในการวัดกิจกรรมของ dehydrogenase จะขึ้นอยู่กับความจริงที่ว่า 2, 3, 5 triphenyl tetrazolium คลอไรด์ (TTC) มีปฏิสัมพันธ์กับกระบวนการการลดลงของเซลล์ที่มีชีวิตและยอมรับไฮโดรเจนจาก dehydrogenases โดยความชุ่มชื้นของ TTC สีแดงที่มีความเสถียรและไม่แพร่สาร, triphenyl formazan มีโปรโฉมในเซลล์ที่มีชีวิต (Pandey 1989) สำหรับการกำหนดกิจกรรม dehydrogenase เมล็ดพันธุ์ที่ถูกดูดซับเป็นเวลา 24 ชั่วโมงใน 10 ซม. จานเลี้ยงเชื้อในสองชั้นของกระดาษกรองชุบ 6 มิลลิลิตรของน้ำกลั่น จากนั้นแต่ละเมล็ด 0.2 กรัมอยู่ในหลอด Eppendorf พื้นและบ่มใน 1 มิลลิลิตร 0.1 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ค่า pH 7.2 ที่มี 0.7% (w / v) 2,3,5-triphenyl tetrazolium คลอไรด์ที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง. หลังจากนั้นเวลาตัวอย่างถูกหมุนเหวี่ยง (5 นาที 5,000 XG) และเม็ดถูกสกัดหกครั้งกับ 1 มิลลิลิตรอะซีโตน การดูดซึมแก้ปัญหาที่ถูกวัดได้ 488 มิลลิเมตร เส้นโค้งมาตรฐานถูกจัดทำขึ้นจากความเข้มข้นรู้จัก formazan ความมุ่งมั่นของความมีชีวิตและความแข็งแรงของเมล็ดพันธุ์แต่ละคนได้ทำสี่ครั้ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เนสและ in vivo ACC oxidase activity มีความตั้งใจในการศึกษา เช่น ยาบ้า - บอกส่วนใหญ่ที่ใช้บ่อยและความน่าเชื่อถือที่ดีเครื่องหมายสำหรับชั้นเรียนเมล็ดคะแนน ( ประจวบคีรีขันธ์ปี 2537 ) วิธีการที่ใช้วัดกิจกรรมของเอนไซม์จะขึ้นอยู่กับความจริงที่ว่า ที่ 2 , 3 , 5-triphenyl tetrazolium คลอไรด์ ( TTC ) โต้ตอบกับการใช้ชีวิตและยอมรับกระบวนการเซลล์ไฮโดรเจนจากเอนไซม์ดีไฮโดรจีเนส . โดย hydration ของ TTC สีแดง มั่นคงและไม่โดดสารไตรฟีนิลโปร - duced ปฏิบัติการอยู่ในเซลล์ที่มีชีวิต ( เดย์ 1989 ) สำหรับการกำหนดของกิจกรรมเอนไซม์เมล็ดถูก imbibed สำหรับ 24 ชั่วโมง 10 ซม. จานเลี้ยงเชื้อบนกระดาษกรองชุบ 2 ชั้น 6 มล. น้ำกลั่น จากนั้นแต่ละ 0.2 กรัม เมล็ดอยู่ในเพนดอร์ฟหลอด พื้นดิน และบ่มใน 1 ml 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.2 ที่ 0.7 % ( w / v ) 2,3,5-triphenyl tetrazolium คลอไรด์ 25 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง หลังจากนั้นเวลามีตัวอย่างระดับ ( 5 นาที , 5 , 000 x G ) และเม็ดสกัด 6 ครั้ง 1 ml สารอะซิโตน โซลูชั่นการวัดในมิลลิเมตร 488 . เส้นโค้งมาตรฐาน เตรียมได้จากที่ทราบความเข้มข้นของปฏิบัติการ . ความมีชีวิตของเมล็ดและความแข็งแรงในการทำสี่ครั้ง