ชนิดของยีน SCCmec ที่ซับซ้อนในการแยกถูกกําหนดโดยใช้วิธีการ PCR หลายอธิบายก่อนหน้านี้ วัฒนธรรมแบคทีเรียถูก sedimented และโอนใน 200 μL ของ Chelex 100 บัฟเฟอร์ (Bio-Rad ห้องปฏิบัติการ, สหรัฐอเมริกา). ดีเอ็นเอถูกสกัดโดยการระงับแบคทีเรียเดือด [5] มัลติซี PCR ถูกนําไปใช้ทดสอบสําหรับการตรวจสอบ mecA และการจัดประเภทประเภท SCCmec และชนิดย่อยตาม Zhang et al. [32] ต้นแบบดีเอ็นเอผสม (ปริมาตรรวม 50 μL) มีปริมาตร 0.5 μL ของดีเอ็นเอ, 50 mM MgCl2, 5 μL ของ 10× บัฟเฟอร์, 0.2 mM dNTPs, 1.0 U Taq DNA พอลิเมอ (เทอร์โมเทอร์ฟิชเชอร์วิทยาศาสตร์, สหรัฐอเมริกา) และ 0.2 ไมโครเมตรไพรเมอร์. ขยาย (PTC 200 จักรยานความร้อน; ห้องปฏิบัติการ Bio-Rad) ดําเนินการดังนี้: 94oC เป็นเวลา 5 นาที; ตามด้วย 10 รอบ 94oC เป็นเวลา 45 วินาที, 65oC เป็นเวลา 45 วินาทีและ 72oC เป็นเวลา 90 วินาที; ตามด้วย 25 รอบ 94oC เป็นเวลา 45 วินาที 55oC เป็นเวลา 45 วินาทีและ 72oC เป็นเวลา 90 วินาที; หลังจากนั้นก็ให้ความร้อนที่ 72oC เป็นเวลา 10 นาที Amplicons ถูกมองใต้แสงยูวีใน 2% agarose เจลอิเล็กโทรโฟเรซิสซึ่งเอธดิมโบรไมด์เปื้อน (Geldoc 200; ห้องปฏิบัติการทางชีวภาพแรด)
การแปล กรุณารอสักครู่..
