Results and discussion
1. Selection of mobile phase
Prior to performing the validation assay, chromatographic conditions for the HPLC stability-indicating method were studied in order to achieve appropriate system suitability.
Mobile phase composition was tested with methanol/ phosphate buffer + tetrabutylammonium (30:70 and 70:30, v/v) in C8 column (λ = 254 nm); and 0.2% metaphosphoric acid in water solution, 0.2% metaphosphoric acid/methanol (95:5 and 90:10, v/v), 0.2% metaphosphoric acid/acetonitrile (95:5 and
90:10, v/v) and 0.2% metaphosphoric acid/methanol/acetonitrile (90:5:5, v/v/v) inC18 column (λ = 254 nm). Those mobile phases have not presented adequate response for ascorbic acid quantitation since they were not able to identify the antioxidant glutathione, as a component of the pharmaceutical/cosmetic preparations, and provided unsuitable retention time for the active substance (≈1 min) .
The working mobile phase, 0.2% metaphosphoric acid/ methanol/acetonitrile (90:8:2, v/v/v), has elevated the retention time to ≈3.5 min, providing resolution of the ascorbic acid from the nicotinic acid, shown in Fig. 1, and other excipients from the topical formulations with sharp and symmetrical peaks, and avoided interferences from the equipment noise. In addition, this mobile phase has been reported to maintain the column life longer. The final experiment conditions were set as described in Sections 2.1 and 2.4.
ผลและการสนทนา1. การเลือกระยะเคลื่อน ก่อนที่จะดำเนินการตรวจสอบวิเคราะห์ เงื่อนไข chromatographic สำหรับวิธีบ่งชี้เสถียรภาพ HPLC ได้ศึกษาเพื่อความเหมาะสมของระบบที่เหมาะสม องค์ประกอบของเฟสเคลื่อนที่ทดสอบกับเมทานอล / ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ + tetrabutylammonium (30:70 และ 70:30, v/v) ในคอลัมน์ C8 (λ = 254 nm); และกรดแก้ปัญหาน้ำ 0.2% กรด metaphosphoric/เม ทานอล (95:5 และ 90:10, v/v) 0.2% กรด metaphosphoric/acetonitrile metaphosphoric 0.2% (95:5 และ90:10, v/v) และ 0.2% กรด metaphosphoric/เม ทานอ ล/acetonitrile (90:5:5, v/v/v) คอลัมน์ inC18 (λ = 254 nm) ระยะที่เคลื่อนมีไม่แสดงการตอบสนองที่เพียงพอสำหรับการวิเคราะห์หาปริมาณกรดแอสคอร์บิคเนื่องจากพวกเขาไม่สามารถระบุกลูตาไธโอนต้านอนุมูลอิสระ เป็นส่วนประกอบของการเตรียมยา/เครื่องสำอาง และให้เวลาเก็บรักษาไม่เหมาะสมสำหรับสารใช้งานอยู่ (≈1 นาที) มือถือทำงาน ระยะ กรด 0.2% metaphosphoric / acetonitrile เมทานอล (90:8:2, v/v/v), มีเวลา ≈3.5 นาที ให้ความละเอียดของกรดแอสคอร์บิคจากกรด nicotinic แสดงใน Fig. 1 และอื่น ๆ excipients จากสูตรเฉพาะมียอดเขาที่คมชัด และสมมาตร เงินประกันผลงานสำหรับการยกระดับ และหลีกเลี่ยง interferences จากอุปกรณ์เสียง นอกจากนี้ ระยะนี้มือถือมีการรายงานเพื่อรักษาชีวิตคอลัมน์อีกต่อไป เงื่อนไขการทดลองสุดท้ายถูกตั้งค่าตามที่อธิบายไว้ในส่วน 2.1 และ 2.4
การแปล กรุณารอสักครู่..

ผลลัพธ์และการอภิปราย
1 ตัวเลือกของเฟสเคลื่อนที่
ก่อนที่จะมีการทดสอบการตรวจสอบเงื่อนไขโครมาสำหรับวิธีเสถียรภาพแสดง HPLC มีการศึกษาเพื่อให้บรรลุความเหมาะสมของระบบที่เหมาะสม
องค์ประกอบขั้นตอนการมือถือได้รับการทดสอบกับเมทานอล / ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ + tetrabutylammonium (30:70 และ 70:30 , v / v) ในคอลัมน์ C8 (λ = 254 นาโนเมตร); และ 0.2% กรด metaphosphoric ในการแก้ปัญหาน้ำ 0.2% metaphosphoric กรด / เมทานอล (95: 5 90:10, v / v) 0.2% metaphosphoric กรด / acetonitrile (95: 5
90:10, v / v) และ 0.2 % metaphosphoric กรด / เมทานอล / acetonitrile (90: 5: 5, v / v / v) คอลัมน์ inC18 (λ = 254 นาโนเมตร) ขั้นตอนที่มือถือยังไม่ได้นำเสนอการตอบสนองที่เพียงพอสำหรับปริมาณวิตามินซีเนื่องจากพวกเขาไม่สามารถที่จะระบุตัวตนของกลูตาไธโอนสารต้านอนุมูลอิสระเป็นส่วนประกอบของยา / การเตรียมเครื่องสำอางและให้เวลาการเก็บรักษาที่ไม่เหมาะสมสำหรับสารที่ใช้งานอยู่ (≈1นาที)
การทำงาน เฟสเคลื่อนที่ 0.2% metaphosphoric กรด / เมทานอล / acetonitrile (90: 8: 2, v / v / v), มีการยกระดับเวลาการเก็บรักษาเพื่อ≈3.5นาทีให้ความละเอียดของวิตามินซีจากกรดนิโคตินิ, แสดงในรูปที่ 1 และสารเพิ่มปริมาณอื่น ๆ จากสูตรเฉพาะที่มียอดคมชัดและสมมาตรและหลีกเลี่ยงการรบกวนจากเสียงอุปกรณ์ นอกจากนี้ขั้นตอนการมือถือนี้ได้รับการรายงานที่จะรักษาชีวิตของคอลัมน์อีกต่อไป เงื่อนไขในการทดลองขั้นสุดท้ายที่ตั้งอยู่ตามที่อธิบายไว้ในมาตรา 2.1 และ 2.4
การแปล กรุณารอสักครู่..
