Reversed-phase chromatography (also

Reversed-phase chromatography (also called RPC, reverse-phase chromatography, or hydrophobic chromatography) includes any chromatographic method that uses a hydrophobic stationary phase.[1] RPC refers to liquid (rather than gas) chromatography.

The term "reversed-phase" has a historical background. In the 1970s, most liquid chromatography was performed using a solid support stationary phase (also called a "column") containing unmodified silica or alumina resins. This method is now called "normal phase chromatography". In normal phase chromatography, the stationary phase is hydrophilic and therefore has a strong affinity for hydrophilic molecules in the mobile phase. Thus, the hydrophilic molecules in the mobile phase tend to bind (or "adsorb") to the column, while the hydrophobic molecules pass through the column and are eluted first. In normal phase chromatography, hydrophilic molecules can be eluted from the column by increasing the polarity of the solution in the mobile phase.

The introduction of a technique using alkyl chains covalently bonded to the solid support created a hydrophobic stationary phase, which has a stronger affinity for hydrophobic compounds. The use of a hydrophobic stationary phase can be considered the opposite, or "reverse", of normal phase chromatography - hence the term "reversed-phase chromatography".[2][3] Reversed-phase chromatography employs a polar (aqueous) mobile phase. As a result, hydrophobic molecules in the polar mobile phase tend to adsorb to the hydrophobic stationary phase, and hydrophilic molecules in the mobile phase will pass through the column and are eluted first.[2][4] Hydrophobic molecules can be eluted from the column by decreasing the polarity of the mobile phase using an organic (non-polar) solvent, which reduces hydrophobic interactions. The more hydrophobic the molecule, the more strongly it will bind to the stationary phase, and the higher the concentration of organic solvent that will be required to elute the molecule.

Many of the mathematical and experimental considerations used in other chromatographic methods also apply to RPC (for example, the separation resolution is dependent on the length of the column). It can be used for the separation of a wide variety of molecules. It is not typically used for separation of proteins, because the organic solvents used in RPC can denature many proteins. For this reason, normal phase chromatography is more commonly used for separation of proteins.

Today, RPC is a frequently used analytical technique. There are a variety of stationary phases available for use in RPC, allowing great flexibility in the development of separation methods.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ระยะกลับ chromatography (ยังเรียกว่า RPC กลับเฟส chromatography หรือ hydrophobic chromatography) มีวิธีใด ๆ chromatographic ที่ใช้เฟสกับ hydrophobic [1] RPC ถึง chromatography เหลว (แทนก๊าซ)คำว่า "กลับเฟส" มีพื้นหลังทางประวัติศาสตร์ ในทศวรรษ 1970, chromatography ของเหลวส่วนใหญ่ทำใช้ระยะเครื่องเขียนสนับสนุนทึบ (ยังเรียกว่า "คอลัมน์") ประกอบด้วย unmodified เรซิ่นซิลิก้าหรืออลูมินา วิธีนี้ตอนนี้เรียกว่า "ระยะปกติ chromatography" ในระยะปกติ chromatography ระยะเครื่องเขียนเป็น hydrophilic และดังนั้นจึง มีความสัมพันธ์ที่แข็งแกร่งสำหรับโมเลกุล hydrophilic ในเฟสเคลื่อนที่ ดังนั้น โมเลกุล hydrophilic ในเฟสเคลื่อนที่มักจะ ผูก (หรือ "ชื้น") คอลัมน์ โมเลกุล hydrophobic ผ่านคอลัมน์ และ eluted ก่อน ในระยะปกติ chromatography สามารถ eluted จากคอลัมน์ hydrophilic โมเลกุล โดยการเพิ่มขั้วของการแก้ปัญหาในระยะเคลื่อนแนะนำเทคนิคการใช้โซ่ alkyl covalently พันธะกับสนับสนุนแข็งสร้าง hydrophobic กับเฟส ซึ่งมีความสัมพันธ์ที่แข็งแกร่งสำหรับสาร hydrophobic ใช้เฟสกับ hydrophobic ถือได้ว่าตรงข้าม หรือ "ย้อนกลับ" ของระยะปกติ chromatography - ดังนั้นคำว่า "เฟสกลับ chromatography" [2] [3] ย้อนกลับเฟส chromatography มีระยะเคลื่อน (อควี) ที่ขั้วโลก ดัง โมเลกุล hydrophobic ในเฟสเคลื่อนที่ขั้วโลกมีแนวโน้มที่ชื้น hydrophobic กับระยะ และโมเลกุล hydrophilic ในระยะเคลื่อนจะผ่านคอลัมน์ และ eluted ก่อน [2] [4] hydrophobic โมเลกุลสามารถ eluted จากคอลัมน์สตาร์ทขั้วของเฟสเคลื่อนที่ใช้การอินทรีย์ (ไม่ใช่โพลาร์) ตัวทำละลาย ซึ่งลดการโต้ตอบ hydrophobic Hydrophobic มากโมเลกุล ยิ่งอย่างยิ่งมันจะผูกระยะเครื่องเขียน และสูงกว่าความเข้มข้นของตัวทำละลายอินทรีย์ที่จะต้อง elute โมเลกุลการพิจารณาทางคณิตศาสตร์ และทดลองใช้ในวิธีอื่น ๆ chromatographic มากมายยังกับ RPC (เช่น แยกความละเอียดจะขึ้นอยู่กับความยาวของคอลัมน์) จะสามารถใช้สำหรับการแยกโมเลกุลที่หลากหลาย ไม่โดยปกติสำหรับโปรตีน การแบ่งแยกเนื่องจากอินทรีย์ที่ใช้ RPC สามารถ denature โปรตีนจำนวนมาก ด้วยเหตุนี้ chromatography ระยะปกติมากกว่าปกติใช้สำหรับการแยกโปรตีนวันนี้ RPC เป็นเทคนิคการวิเคราะห์ที่ใช้บ่อย มีหลากหลายขั้นตอนเครื่องเขียนสำหรับใช้ใน RPC ให้ความยืดหยุ่นที่ดีในการพัฒนาวิธีการแยก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โคกลับเฟส (ที่เรียกว่า RPC, โคเฟสย้อนกลับหรือสารน้ำ) รวมถึงวิธีการใด ๆ สารที่ใช้เฟสน้ำ. [1] RPC หมายถึงของเหลว (มากกว่าแก๊ส) ร. คำว่า "กลับเฟส" มีภูมิหลังทางประวัติศาสตร์ ในปี 1970 โคสภาพคล่องมากที่สุดได้รับการดำเนินการโดยใช้การสนับสนุนที่แข็งแกร่งเฟส (ที่เรียกว่า "คอลัมน์") ที่มีซิลิกาที่ไม่มีการแก้ไขหรือเรซินอะลูมินา วิธีการนี้เรียกว่าตอนนี้ "โคเฟสปกติ" ในโคเฟสปกติเฟสคือน้ำและดังนั้นจึงมีความสัมพันธ์ที่แข็งแกร่งโมเลกุลน้ำในเฟสเคลื่อนที่ ดังนั้นโมเลกุลของน้ำในเฟสเคลื่อนที่มีแนวโน้มที่จะผูก (หรือ "ดูดซับ") คอลัมน์ในขณะที่โมเลกุลของน้ำผ่านคอลัมน์และมีการชะแรก ในโคเฟสปกติโมเลกุลน้ำสามารถชะจากคอลัมน์โดยการเพิ่มกระแสไฟฟ้าของการแก้ปัญหาในระยะมือถือ. แนะนำเทคนิคการใช้โซ่อัลคิลผูกมัด covalently การสนับสนุนที่แข็งแกร่งสร้างเฟสน้ำซึ่งมีความสัมพันธ์ที่แข็งแกร่ง สำหรับสารที่ชอบน้ำ การใช้งานของเฟสน้ำได้รับการพิจารณาตรงข้ามหรือ "ย้อนกลับ" ของโคเฟสปกติ -. ด้วยเหตุนี้คำว่า "โคกลับเฟส" [2] [3] โคเฟสพนักงานกลับขั้ว (น้ำ) มือถือ ระยะ เป็นผลให้โมเลกุลของน้ำในเฟสเคลื่อนที่ขั้วโลกมีแนวโน้มที่จะดูดซับไปเฟสน้ำและโมเลกุลของน้ำในเฟสเคลื่อนที่จะผ่านคอลัมน์และมีการชะแรก. [2] [4] โมเลกุล Hydrophobic สามารถชะจาก คอลัมน์โดยการลดขั้วของเฟสเคลื่อนที่โดยใช้อินทรีย์ (ไม่มีขั้ว) เป็นตัวทำละลายซึ่งจะช่วยลดการมีปฏิสัมพันธ์กับน้ำ โมเลกุลน้ำมากขึ้นมากขึ้นอย่างมากมันจะผูกกับเฟสและสูงกว่าความเข้มข้นของตัวทำละลายอินทรีย์ที่จะต้องชะโมเลกุล. หลายของการพิจารณาทางคณิตศาสตร์และการทดลองใช้ในวิธีโครมาอื่น ๆ นอกจากนี้ยังนำไปใช้กับ RPC (ตัวอย่างเช่นความละเอียดของการแยกจะขึ้นอยู่กับความยาวของคอลัมน์) มันสามารถใช้สำหรับการแยกความหลากหลายของโมเลกุล มันไม่ได้เป็นโดยปกติจะใช้สำหรับการแยกโปรตีนเพราะตัวทำละลายอินทรีย์ที่ใช้ใน RPC สามารถลบล้างโปรตีนจำนวนมาก ด้วยเหตุนี้รเฟสปกติจะใช้กันอย่างแพร่หลายสำหรับการแยกโปรตีน. วันนี้ RPC เป็นเทคนิคการวิเคราะห์ที่ใช้บ่อย มีความหลากหลายของขั้นตอนนิ่งสำหรับการใช้งานใน RPC จะช่วยให้ความยืดหยุ่นที่ดีในการพัฒนาวิธีการแยก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กลับเฟสโครมาโทกราฟี ( ที่เรียกว่า RPC กลับเฟสโครมาโทกราฟีหรือ hydrophobic chromatography ) รวมถึงการใด ๆและวิธีการที่ใช้ระยะ stationary ) [ 1 ] RPC หมายถึงของเหลว ( มากกว่าแก๊สโครมาโตกราฟี

คำว่า " reversed-phase " มีความเป็นมาทางประวัติศาสตร์ ในทศวรรษโครมาโตกราฟีของเหลวมากที่สุดคือการใช้สนับสนุนแข็งนิ่งเฟส ( เรียกว่า " คอลัมน์ " ) ที่มีอนุภาคหรือเม็ดซิลิกา อะลูมินา วิธีนี้เรียกว่าตอนนี้ " โครม " ระยะปกติ ในเทคนิคเฟสปกติ ระยะ stationary คือน้ำและดังนั้นจึงมีความสัมพันธ์ที่แข็งแกร่งสำหรับน้ำโมเลกุลในเฟสเคลื่อนที่ ดังนั้นโมเลกุลน้ำในเฟสเคลื่อนที่มักจะผูก ( หรือ " ดูดซับ " ) คอลัมน์ ในขณะที่โมเลกุล ) ผ่านคอลัมน์ และตัวอย่างแรก ในเฟสโครมาโทกราฟีปกติโมเลกุลของน้ำสามารถตัวอย่างจากคอลัมน์โดยการเพิ่มขั้วของโซลูชั่นในเฟส

มือถือ .เบื้องต้นของการใช้เทคนิคอัลโซ่ covalently ผูกมัดเพื่อสนับสนุนของแข็งสร้าง ) เครื่องเขียน เฟส ซึ่งมีความสัมพันธ์ที่แข็งแกร่งสำหรับ ) สารประกอบ ใช้ของเฟสอยู่กับที่ ) ถือได้ว่าตรงข้าม หรือ " ย้อนกลับ " , โครมาโทกราฟี - ระยะปกติ ดังนั้นคำว่า " reversed-phase โครม "[ 2 ] [ 3 ] กลับเฟสโครมาโทกราฟีใช้ขั้ว ( น้ำ ) เฟสเคลื่อนที่ . ผลของเฟสเคลื่อนที่ ) ในขั้วโลกมีแนวโน้มที่จะดูดซับในเฟสอยู่กับที่ ) และน้ำโมเลกุลในเฟสเคลื่อนที่จะผ่านคอลัมน์ และตัวอย่างแรก[ 2 ] [ 4 ] hydrophobic โมเลกุลสามารถตัวอย่าง จากคอลัมน์ โดยลดความมีขั้วของเฟสเคลื่อนที่โดยใช้ตัวทำละลายอินทรีย์ ( ไม่มีขั้ว ) ซึ่งช่วยลดปฏิกิริยาไฮโดรโฟบิก . ยิ่ง hydrophobic โมเลกุล มากกว่าที่ขอก็จะผูกกับเฟสอยู่กับที่ และสูงกว่าความเข้มข้นของตัวทำละลายอินทรีย์นั้นจะต้อง elute โมเลกุล .

หลายของคณิตศาสตร์และการทดลองใช้วิธีการอื่น ๆในการพิจารณา และยังใช้ RPC ( ตัวอย่างเช่น การแยกความละเอียดขึ้นอยู่กับความยาวของคอลัมน์ ) มันสามารถใช้สำหรับการแยกของความหลากหลายของโมเลกุล มันไม่ได้เป็นมักจะใช้สำหรับการแยกโปรตีน เนื่องจากตัวทำละลายอินทรีย์ที่ใช้ใน RPC สามารถปรับเปลี่ยนโครงสร้างทางโมเลกุลโปรตีนมากมายด้วยเหตุผลนี้ เทคนิคขั้นตอนปกติทั่วไปที่ใช้สำหรับการแยกโปรตีน .

วันนี้ RPC เป็นมักใช้วิเคราะห์เทคนิค มีความหลากหลายของเฟสคงที่สามารถใช้ RPC , ให้ความยืดหยุ่นที่ดีในการพัฒนาวิธีการแยก