Materials and MethodsPlant Material

Materials and Methods
Plant Materials
Inflorescences of Dendrobium ‘Khao Sanan’
without pretreatment were obtained from a commercial
grower near Bangkok. Export-grade inflorescences,
with 5-10 open flowers and 5-7 flower buds were
selected for freshness and uniformity. They were
harvested in the morning and were wet-packed in
carton boxes and brought to the laboratory within 2 h
after harvest. The second, third, and fourth of fully
open flowers from the individual stem end were
excised at the distal end of pedicels with a sharp
razor blade and placed immediately in 10-mL vials
containing distilled water. All flowers were held in
a room with natural light (~12 h per day; ~15 µmol
photons m-2 s-1). The temperature and relative
humidity of the air-conditioned room were the
average of 25o
C and 80%, respectively.
Ethylene and AOA treatment
Detached flowers held in 10-mL vials containing
8 mL of distilled water were placed in an airtight
plastic chamber (37×47×35 cm). Ethylene was
applied by introducing an appropriate volume
through an injection port, and brought to a final
concentration of 0.4 µL L-1. Flowers were exposed to
ethylene for 24 h. For AOA pretreatment, pedicels of
detached flowers were placed in 10-mL vials
containing 0.5 mM of AOA solution and left for 18 h.
Distilled water was used for the control treatment. In
the AOA + ethylene treatment, detached flowers
were treated once with AOA prior to ethylene
treatment. Senescence symptoms and ethylene
production were recorded.
Senescence Symptoms
Visible symptoms such as wilting, venation,
yellowing and water soaking were scored daily.
Wilting and venation were scored as symptom
percentage of perianth based on the following: a
score of 0, 1, 2, 3, 4 and 5 was used to define 0% (no
visible senescence symptom), 10%, 11-25%, 26-
50%, 51-75%, 76-100% of senescence symptoms,
respectively. Wilting is scored as a drooping flowers.
Venation is when veins of vascular bundles can be
seen clearly on the surface area of perianth organs (2
petals, 3 sepals, and lip). Yellowing is when white
parts change to yellow. Water soaking is indicative of
bruising on flower tissue at very late senescence
(when more than 75% wilting and venation). The
time to senescence of flowers was considered
terminated when 50% of all symptoms occurred.
Ethylene Production
Ethylene production of detached flowers,
isolated perianth organs and isolated columns were
measured. Detached flowers were placed in 10-mL
vials containing 8 mL of distilled water and then
placed into 320 mL plastic bottles. The basal end of
isolated perianth organs (2 petals, 3 sepals and 1
lip) was placed in plastic dishes containing 8 mL of
distilled water, whereas the basal end of pedicels
with excised column was placed in 10-mL vials
containing 8 mL of distilled water. Isolated perianth
organs held in plastic dishes containing distilled
water were placed into 260 mL plastic bottles fitted
with gas sampling ports. For excised column, the
vials were closed with serum caps. Measurements
were taken from three replicate plastic bottles. A
one-mL gas sample was withdrawn from the
sampling port after 1 h closure for ethylene
determination. Composition of the headspace gas
was measured with a gas chromatograph (Shimadzu
GC 8A, Kyoto, Japan), equipped with a flame
ionization detector and a 2.1-m stainless steel
column with an inner diameter of 4 mm containing
activated alumina of 80/100 mesh. The column
temperature was 80o
C. Injector and detector
temperatures were 150o
C. Serum caps were opened
after gas sampling. The value of the three gas
samples at a measuring point were averaged and
expressed per gram fresh weight of the plant
material. Vol. 41, No. 3-4, 2008 Autocatalytic ethylene production by dendrobium flowers 93
RNA Extraction
Isolated perianths and columns were harvested
at before pretreatment (day 0; D0) and after each
treatment at day 1 (D1), day 2 (D2) and day 5 (D5).
Total RNA was isolated from one gram of frozen
tissue using CTAB method (Chang et al., 1993).
Before reverse transcription reaction, contaminated
DNA in total RNA of various stages of flower
senescence was eliminated using deoxyribonuclease I
(DNaseI, RNase-free, Fermentus, Canada). For
reverse transcription reaction, first strand cDNA was
reverse transcribed from DNase-treated RNA of
Dendrobium using M-MLV reverse Transcription
System Kit (Promega, USA). The first strand cDNA
was further used as a template in the PCR reaction or
stored at -20o
C until further use. ptoms
appeared.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการวัสดุโรงงานช่อเขียวของกล้วยไม้สกุลหวาย 'สนั่นเขา'โดย pretreatment ได้รับมาจากการค้าgrower ใกล้กรุงเทพ ช่อเขียวเกรดส่งออกด้วยดอกไม้เปิด 5-10 และ 5-7 ดอกอาหารได้เลือกความสดชื่นและรื่นรมย์ พวกเขาเก็บเกี่ยวในตอนเช้า และก็เปียกบรรจุในกล่องกระดาษ และนำไปปฏิบัติภายใน 2 hหลังการเก็บเกี่ยว ที่สอง สาม และสี่ของทั้งหมดเปิดดอกไม้จากปลายก้านแต่ละexcised จบกระดูก pedicels ด้วยคมชัดใบมีดโกนและทันทีใน 10 mL vialsที่ประกอบด้วยน้ำกลั่น ดอกไม้ทั้งหมดถือได้ว่าห้องที่ มีแสงธรรมชาติ (h ~ 12 ต่อวัน µmol ~ 15photons m 2 s-1) อุณหภูมิและญาติความชื้นของห้องปรับอากาศมีการค่าเฉลี่ยของ 25oC และ 80% ตามลำดับเอทิลีนและ AOAจัดดอกไม้เดี่ยว vials 10 mL ประกอบด้วย8 mL ของน้ำกลั่นไว้ในตัวแบบสุญญากาศพลาสติกหอ (37 × 47 × 35 ซม.) เอทิลีนเป็นใช้ โดยการแนะนำเป็นปริมาณที่เหมาะสมผ่านพอร์ตการฉีด และถึงสุดความเข้มข้นของ 0.4 µL L 1 ดอกไม้ได้สัมผัสกับเอทิลีนสำหรับ 24 ชม สำหรับ AOA pretreatment, pedicels ของดอกไม้เดี่ยวไว้ใน vials 10 mLประกอบด้วย 0.5 mM ของโซลูชัน AOA และซ้าย 18 hน้ำกลั่นที่ใช้สำหรับการรักษาควบคุม ในAOA + รักษาเอทิลีน ดอกไม้เดี่ยวได้รับการรักษาครั้งเดียวกับ AOA ก่อนเอทิลีนการรักษา อาการ senescence และเอทิลีนบันทึกการผลิตอาการ senescenceอาการปรากฏเช่น wilting, venationสีเหลืองและน้ำที่แช่ได้คะแนนทุกวันได้คะแนน wilting และ venation เป็นอาการเปอร์เซ็นต์ของ perianth ตามต่อไปนี้: การคะแนน 0, 1, 2, 3, 4 และ 5 ใช้ 0% (ไม่มีกำหนดsenescence เห็นอาการ), 10%, 11-25%, 26 -50%, 51-75%, 76-100% อาการ senescenceตามลำดับ Wilting คะแนนเป็นดอกไม้ droopingVenation เป็นเมื่อหลอดเลือดดำของสคิวรวมกลุ่มได้เห็นได้ชัดเจนบนพื้นผิวของอวัยวะ perianth (2กลีบ 3 sepals และลิ) สีเหลืองเป็นสีขาวส่วนที่เปลี่ยนเป็นสีเหลือง น้ำที่แช่จะส่อช้ำในเนื้อเยื่อของดอกไม้ที่ senescence มาช้ามาก(เมื่อกว่า 75% wilting ก venation) ที่เวลา senescence ดอกไม้ถือเป็นสิ้นสุดลงเมื่อเกิด 50% ของอาการทั้งหมดผลิตเอทิลีนผลิตเอทิลีนดอกไม้เดี่ยวperianth แยกอวัยวะและคอลัมน์แยกวัด ดอกไม้เดี่ยวไว้ใน 10 mLvials ประกอบด้วย 8 mL ของน้ำกลั่นแล้วอยู่ในขวดพลาสติก 320 mL โรคสิ้นสุดperianth แยกอวัยวะ (2 กลีบ 3 sepals และ 1lip) มีอยู่ในอาหารพลาสติกประกอบด้วย 8 mL ของกลั่นน้ำ ในขณะที่สิ้นโรค pedicelsมีคอลัมน์ excised ถูกวางไว้ใน vials 10 mLประกอบด้วย 8 mL ของน้ำกลั่น Perianth แยกอวัยวะในอาหารพลาสติกประกอบด้วยกลั่นน้ำที่อยู่ในขวดพลาสติก 260 mL พอดีกับแก๊สสุ่มพอร์ต สำหรับคอลัมน์ excised การvials ถูกปิด ด้วยฝาซีรั่ม วัดได้มาจากขวดพลาสติก 3 replicate Aตัวอย่างก๊าซมลหนึ่งถูกถอนจากการสุ่มพอร์หลังจากปิด 1 h เอทิลีนกำหนด องค์ประกอบของก๊าซ headspaceถูกวัด ด้วย chromatograph ก๊าซ (ShimadzuGC 8A เกียวโต ญี่ปุ่น), พร้อมกับเปลวไฟเครื่องตรวจจับการ ionization และ 2.1 m สแตนเลสคอลัมน์ที่ มีเส้นผ่าศูนย์กลางภายในของ 4 มม.ประกอบด้วยฟลอพตาข่าย 80/100 คอลัมน์อุณหภูมิ 80oC. หัวฉีดและเครื่องตรวจจับอุณหภูมิ 150o ได้เปิดหมวก C. Serumหลังจากสุ่มตัวอย่างก๊าซ ค่าแก๊สสามตัวอย่างที่จุดวัดได้ averaged และแสดงต่อกรัมน้ำหนักสดของพืชวัสดุ ปี 41 หมายเลข 3-4, 2008 Autocatalytic เอทิลีนผลิตจากดอกไม้กล้วยไม้สกุลหวาย 93สกัดอาร์เอ็นเอPerianths แยกและคอลัมน์ถูกเก็บเกี่ยวที่ก่อน pretreatment (วัน 0 D0) และหลัง จากแต่ละรักษาวันที่ 1 (ง 1), วันที่ 2 (D2) และวันที่ 5 (D5)อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกแยกจากหนึ่งกรัมของแช่แข็งเนื้อเยื่อที่ใช้วิธี CTAB (ช้างร้อยเอ็ด al., 1993)ก่อนปฏิกิริยาย้อนกลับ transcription ปนเปื้อนดีเอ็นเอในอาร์เอ็นเอทั้งหมดของขั้นตอนต่าง ๆ ของดอกไม้senescence ถูกตัดใช้ deoxyribonuclease ฉัน(DNaseI, RNase ฟรี Fermentus แคนาดา) สำหรับtranscription ย้อน cDNA สาระแรกปฏิกิริยากลับทับจาก DNase ถือว่าอาร์เอ็นเอของกล้วยไม้สกุลหวายใช้ Transcription ย้อน M MLVชุดระบบ (Promega สหรัฐอเมริกา) CDNA สาระแรกใช้เป็นแม่แบบในปฏิกิริยา PCR เพิ่มเติม หรือเก็บที่ - 20oC จนกระทั่งใช้ต่อไป ptomsปรากฏ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธี
พืชวัสดุ
ช่อดอกของกล้วยไม้สกุลหวาย 'เขาสนั่น'
โดยไม่ต้องปรับสภาพที่ได้รับจากการค้า
ปลูกใกล้กรุงเทพฯ ช่อดอกส่งออกเกรด
ที่มี 5-10 ดอกบานและดอกตูม 5-7 ถูก
เลือกไว้สำหรับความสดใหม่และความสม่ำเสมอ พวกเขาได้รับ
การเก็บเกี่ยวในตอนเช้าและมีความเปียกบรรจุใน
กล่องกระดาษและนำไปยังห้องปฏิบัติการภายใน 2 ชั่วโมง
หลังการเก็บเกี่ยว สองสามและสี่ของอย่างเต็มที่
ดอกไม้บานจากปลายก้านของแต่ละบุคคลได้รับการ
ตัดที่ปลายสุดของก้านดอกที่มีความคมชัด
ใบมีดโกนและวางไว้ในขวด 10 มิลลิลิตร
มีน้ำกลั่น ดอกไม้ทั้งหมดถูกจัดขึ้นใน
ห้องที่มีแสงธรรมชาติ (~ 12 ชั่วโมงต่อวัน ~ 15 ไมโครโมล
โฟตอน M-2 s-1) อุณหภูมิและญาติ
ความชื้นของห้องปรับอากาศมี
ค่าเฉลี่ยของ 25o
C และ 80% ตามลำดับ.
เอทิลีนและการรักษา AOA
ดอกไม้เดี่ยวที่จัดขึ้นในขวด 10 มิลลิลิตรมี
8 มิลลิลิตรของน้ำกลั่นอยู่ในสุญญากาศ
ห้องพลาสติก (37 × 47 × 35 ซม.) เอทิลีนที่ถูก
นำมาใช้โดยการแนะนำปริมาณที่เหมาะสม
ผ่านทางพอร์ตฉีด, และนำไปสุดท้าย
ความเข้มข้นของ 0.4 ไมโครลิตร L-1 ดอกไม้ได้สัมผัสกับ
เอทิลีนเป็นเวลา 24 ชั่วโมง สำหรับการปรับสภาพ AOA ดอกของ
ดอกเดี่ยวถูกวางไว้ในขวด 10 มิลลิลิตร
มี 0.5 มิลลิของการแก้ปัญหา AOA และเหลือ 18 ชม.
น้ำกลั่นที่ใช้สำหรับการควบคุมการรักษา ใน
AOA + การรักษาเอทิลีน, ดอกไม้เดี่ยว
ได้รับการรักษาครั้งเดียวกับ AOA ก่อนที่จะมีเอทิลีน
การรักษา อาการชราภาพและเอทิลีน
การผลิตที่ถูกบันทึกไว้.
ชราภาพอาการ
อาการที่มองเห็นได้เช่นเหี่ยวแห้ง, ลายเส้น,
สีเหลืองและแช่น้ำถูกยิงในชีวิตประจำวัน.
เหี่ยวแห้งและลายเส้นที่ได้รับคะแนนเป็นอาการ
ร้อยละของ perianth ขึ้นอยู่กับต่อไปนี้:
คะแนนของ 0, 1, 2, 3, 4 และ 5 ถูกใช้ในการกำหนด 0% (ไม่มี
อาการชราภาพมองเห็นได้), 10%, 11-25%, 26-
50%, 51-75%, 76-100% ของอาการชราภาพ
ตามลำดับ เหี่ยวแห้งเป็นคะแนนเป็นดอกไม้หลบตา.
Venation คือเมื่อเส้นเลือดของการรวมกลุ่มหลอดเลือดสามารถ
มองเห็นได้อย่างชัดเจนในพื้นที่ผิวของอวัยวะ perianth (2
กลีบ 3 กลีบเลี้ยงและริมฝีปาก) สีเหลืองเป็นสีขาวเมื่อ
ชิ้นส่วนเปลี่ยนเป็นสีเหลือง แช่น้ำเป็นตัวบ่งชี้ของ
รอยช้ำบนเนื้อเยื่อดอกไม้ที่เสื่อมสภาพช้ามาก
(เมื่อกว่า 75% เหี่ยวแห้งและลายเส้น)
เวลาที่จะเสื่อมสภาพของดอกไม้ได้รับการพิจารณา
สิ้นสุดลงเมื่อ 50% ของอาการที่เกิดขึ้นทั้งหมด.
เอทิลีนการผลิต
การผลิตเอทิลีนของดอกไม้เดี่ยว
อวัยวะ perianth แยกและคอลัมน์แยกถูก
วัด ดอกเดี่ยวอยู่ใน 10 มิลลิลิตร
ขวดที่มี 8 มิลลิลิตรของน้ำกลั่นแล้ว
วางลงใน 320 มิลลิลิตรขวดพลาสติก ปลายฐานของ
อวัยวะ perianth แยก (2 กลีบกลีบเลี้ยง 3 และ 1
ปาก) วางอยู่ในจานพลาสติกที่มี 8 มิลลิลิตรของ
น้ำกลั่นในขณะที่ท้ายฐานของก้านดอก
กับคอลัมน์พอร์ถูกวางไว้ในขวด 10 มิลลิลิตร
มี 8 มิลลิลิตรกลั่น น้ำ perianth แยก
อวัยวะที่จัดขึ้นในจานพลาสติกที่มีสารกลั่น
น้ำถูกวางลงใน 260 มิลลิลิตรขวดพลาสติกพอดี
กับพอร์ตการเก็บตัวอย่างก๊าซ สำหรับคอลัมน์พอร์,
ขวดถูกปิดด้วยฝาซีรั่ม วัด
ถูกนำมาจากสามซ้ำขวดพลาสติก
ตัวอย่างก๊าซหนึ่งมิลลิลิตรถูกถอนออกจาก
พอร์ตการสุ่มตัวอย่างหลังจากที่ปิด 1 ชั่วโมงสำหรับเอทิลีน
ความมุ่งมั่น องค์ประกอบของก๊าซ Headspace
วัดกับก๊าซ Chromatograph (Shimadzu
GC 8A, เกียวโต, ญี่ปุ่น) พร้อมกับเปลวไฟ
ตรวจจับไอออนไนซ์และสแตนเลส 2.1 เมตร
คอลัมน์ที่มีขนาดเส้นผ่านศูนย์กลางภายใน 4 มมบรรจุ
เปิดใช้งานอลูมิเนียมของ 80/100 ตาข่าย . คอลัมน์
อุณหภูมิ 80o
C. หัวฉีดและระบบตรวจจับ
อุณหภูมิได้ 150o
C. หมวกเซรั่มเปิด
หลังจากการเก็บตัวอย่างก๊าซ ค่าของก๊าซสาม
ตัวอย่างที่จุดตรวจวัดที่ถูกเฉลี่ยและ
แสดงต่อกรัมน้ำหนักสดของพืช
วัสดุ ฉบับที่ 41, ฉบับที่ 3-4, 2008 การผลิตเอทิลีน autocatalytic ด้วยดอกไม้ Dendrobium 93
RNA สกัด
perianths แยกและคอลัมน์เก็บเกี่ยว
ก่อนที่การปรับสภาพ (วันที่ 0; D0) และหลังจากที่แต่ละ
การรักษาในวันที่ 1 (D1) วันที่ 2 (D2) และ วันที่ 5 (D5).
รวมอาร์เอ็นเอที่แยกได้จากที่หนึ่งกรัมแช่แข็ง
เนื้อเยื่อใช้วิธี CTAB (ช้าง et al., 1993).
ก่อนที่จะเกิดปฏิกิริยาการถอดความกลับปนเปื้อน
ดีเอ็นเออาร์เอ็นเอรวมของขั้นตอนต่างๆของดอกไม้
ชราภาพถูกกำจัดโดยใช้ deoxyribonuclease ฉัน
( DNaseI, RNase ฟรี Fermentus, แคนาดา) สำหรับ
ปฏิกิริยาถอดความกลับ cDNA สาระแรกที่ถูก
คัดลอกกลับจากอาร์เอ็นเอ DNase รับการรักษาของ
กล้วยไม้สกุลหวายโดยใช้ M-MLV กลับถอดความ
ชุดระบบ (Promega, ประเทศสหรัฐอเมริกา) cDNA สาระแรกที่
ถูกนำมาใช้ต่อไปเป็นแม่แบบในปฏิกิริยา PCR หรือ
เก็บไว้ที่ -20
เซลเซียสจนกว่าจะใช้งานต่อไป ptoms
ปรากฏ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการ วัสดุปลูกดอกของเอื้อง

' สนั่น '
โดยไม่ต้องนำเขาได้จากโฆษณา
ปลูกใกล้กรุงเทพฯ ส่งออกดอกเกรด
10 ดอกบานดอกตูม และ 5-7 เป็น
เลือกให้ความสดชื่นและเป็นเอกภาพ พวกเขา
เก็บเกี่ยวในตอนเช้าและเปียก บรรจุอยู่ในกล่องกระดาษและนำ

ห้องปฏิบัติการภายใน 2 ชั่วโมงหลังการเก็บเกี่ยวที่สอง สามและสี่ของเต็ม
ดอกไม้เปิดจากปลายก้านแต่ละตัว
ตัดที่ส่วนปลายของ pedicels ด้วยใบมีดโกนคม
วางไว้ทันทีใน 10 ขวดมิลลิลิตร
ผสมน้ำกลั่น ดอกไม้ทั้งหมดได้ถูกจัดขึ้นใน
ห้องด้วยแสงธรรมชาติ ( ~ 12 ชั่วโมงต่อวัน ; ~ 15 µ mol
โฟตอนด้วยที่สุด ) อุณหภูมิและความชื้นสัมพัทธ์ของห้องปรับอากาศได้

เฉลี่ยของ 25o
c และ 80% ตามลำดับ เอทิลีน และการรักษา

AOA ดอกไม้เดี่ยวที่จัดขึ้นใน 10 ml ขวดบรรจุ
8 มล. น้ำกลั่นอยู่ในหอพลาสติกอัดลม
( 37 × 47 × 35 ซม. ) เอทิลีนที่ใช้ปริมาณที่เหมาะสม โดยแนะนำ

ผ่านการฉีดพอร์ตและทำให้ความเข้มข้นสุดท้าย
4 L µ L-1 . ดอกไม้ตาก
เอทิลีนเป็นเวลา 24 ชั่วโมง เพื่อหาการลงทุน ,pedicels ของ
ดอกเดี่ยวอยู่ใน 10 ml ขวด
ที่มี 0.5 มม. ของ AOA และโซลูชั่นเหลือ 18 H .
น้ำกลั่นที่ใช้สำหรับการรักษาควบคุม ในการรักษา
AOA เอทิลีนแยกออกดอกไม้
ได้รับการรักษาอีกครั้งกับ AOA ก่อนเอธิ
รักษา โดยมีอาการ การผลิตเอทิลีน


ถูกบันทึกไว้ โดยมีอาการอาการมองเห็นได้ เช่น การเหี่ยว venation
, ,สีเหลืองและน้ำแช่อยู่ได้ทุกวัน และมีคะแนนเป็น venation เหี่ยว

ค่าร้อยละของอาการอันขึ้นอยู่กับต่อไปนี้ :
คะแนน 0 , 1 , 2 , 3 , 4 และ 5 ถูกใช้เพื่อกำหนด 0 % ( ไม่มี
มองเห็นอาการชราภาพ ) 10% , 11-25 26 -
50 % % 51-75 % , 76-100 % ของอาการชราภาพ
ตามลำดับ เหี่ยวได้เป็นห้อยดอกไม้
venation เมื่อเส้นเลือดของหลอดเลือด การรวมกลุ่มสามารถ
เห็นได้ชัดเจนบนพื้นผิวของอวัยวะอัน ( 2
3 กลีบ กลีบเลี้ยง และริมฝีปาก ) สีเหลือง คือ เมื่อส่วนที่ขาว
เปลี่ยนเป็นสีเหลือง น้ำเปียกบ่งบอกถึง
รอยช้ำบนดอกไม้เนื้อเยื่อที่ช้ามากโดย
( เมื่อมากกว่า 75% และเหี่ยว venation )
เวลาการเสื่อมสภาพของดอกไม้ถือว่า
สิ้นสุดลงเมื่อ 50% ของอาการทั้งหมดที่เกิดขึ้น

การผลิตเอทิลีนการผลิตเอทิลีน ดอกเดี่ยว แยกอวัยวะและแยกอัน

คอลัมน์ได้ ดอกเดี่ยวอยู่ในขวด 10 ml
8 มิลลิลิตร ผสมน้ำกลั่นแล้ว
วางลงในขวดพลาสติก 320 ml . จบ (
แยกอวัยวะอัน ( 2 กลีบ กลีบเลี้ยง 3 1
ลิป ) ถูกวางในจานพลาสติกที่ประกอบด้วย 8 ml
น้ำกลั่น ส่วนปลาย ( pedicels
กับตัดคอลัมน์ที่ถูกวางไว้ในขวด 10 ml
8 มิลลิลิตร ผสมน้ำกลั่น แยกอวัยวะอัน
จัดขึ้นในจานพลาสติกที่มีกลั่น
น้ำถูกวางลงใน 260 ml ขวดพลาสติกพอดี
ก๊าซ จำนวนพอร์ต สำหรับตัดคอลัมน์
ขวดปิดกับเซรั่ม หมวก การวัด
3 ทำซ้ำ นำมาจากขวดพลาสติก เป็นหนึ่งตัวอย่างต่อ

ขอถอนตัวจากก๊าซตัวอย่างพอร์ตหลังจาก 1 ชั่วโมง การปิดของเอทิลีน
ความมุ่งมั่น องค์ประกอบของเฮดสเปซแก๊ส
วัดด้วยแก๊สโครมาโตกราฟ ( Shimadzu
GC 8A , เกียวโต , ญี่ปุ่น ) พร้อมกับเปลวไฟ
ไอเครื่องตรวจจับและคอลัมน์
สแตนเลส 2.1-m มีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางภายใน 4 มม. ประกอบด้วย
เปิดอะ 80 / 100 เมช คอลัมน์ 80o
C
อุณหภูมิหัวฉีดและเครื่องตรวจจับอุณหภูมิที่ 150o

Cเซรั่มฝาถูกเปิด
หลังจากการสุ่มตัวอย่างแก๊ส . ค่าของแก๊ส 3
ตัวอย่างที่จุดวัดได้เฉลี่ยและ
แสดงกรัมต่อน้ำหนักสดของพืชวัสดุ

ฉบับที่ 41 , ฉบับที่ 3-4 ปีการผลิตเอทิลีนดอกไม้ช่อย่อยตัวเอง โดยการสกัดแยก perianths 93
.

และคอลัมน์เก็บก่อนก่อน ( วันที่ 0 ; + ) และหลังจากที่แต่ละ
รักษา วัน ( D1 )วันที่ 2 ( D2 ) และวันที่ 5 ( ไฟว์ ) .
อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกแยกจากหนึ่งกรัมของเนื้อเยื่อ โดยใช้วิธี ctab แช่แข็ง
( ชาง et al . , 1993 ) .
ก่อนกลับถอดความการปนเปื้อน
ดีเอ็นเอในอาร์เอ็นเอทั้งหมดของขั้นตอนต่างๆของการใช้ deoxyribonuclease ตกรอบดอกไม้

( dnasei ฉัน , เลสฟรี fermentus , แคนาดา ) ถอดความสำหรับ
ย้อนกลับปฏิกิริยาแรกคือ
เส้นดีเอ็นเอกลับจากการรักษาและตรวจหา ADNase RNA ของกล้วยไม้สกุลหวายโดยใช้ระบบถอดความ

ชุดกลับ m-mlv ( promega , USA ) กลุ่มแรก cDNA
ยังใช้เป็นแม่แบบในปฏิกิริยา PCR หรือเก็บไว้ที่ - 20 %

C จนกว่าจะใช้ต่อไป ptoms
ปรากฏ