A single โคโลนี that appeared after

A single โคโลนี that appeared after two to three days was cultured in 3 ml of อาหาร LB. 2 ml of the culture
solution that reached the stationary phase was added to 200 ml of
อาหาร LB, followed by culture with shaking at 180 rpm. The
culture solution in which OD550 was 0.5 to 1.0 was centrifuged
(4,000xg, 4°C, 10 min), and the precipitate was washed with
sterile water three times. The amount of sterile water was 200 ml
in the first wash and 100 ml in the second wash and in the third
wash. The washed precipitate was suspended in 2 ml of 100
glycerol. The สารแขวนลอย was dispensed into microcentrifugation
tubes by 50 ytl, frozen with liquid nitrogen, and preserved as
อะโกรแบคทีเรียม competent cells at -80°C.
[0057]
5. 2 อะโกรแบคทีเรียม การทรานสฟอร์ม by อิเลคโทรพอเรชัน
0.5 ytg of the DNA was added to the competent cells, and
the mixture was placed into a cuvette (2-mm gap). Thereafter, อิเลคโทรพอเรชัน was performed under the following สภาวะ.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โคโลนีเดียวที่ปรากฏหลังจากสองถึงสามวันถูกอ่างใน 3 ml ของอาหาร 2 ปอนด์ ml ของวัฒนธรรม โซลูชันที่ถึงระยะเครื่องเขียนถูกเพิ่ม 200 ml ของอาหารปอนด์ ตามวัฒนธรรมที่มีการสั่นที่ 180 รอบต่อนาที ที่มี centrifuged โซลูชันวัฒนธรรมที่ OD550 0.5-1.0(4, 000xg, 4° C, 10 นาที), และ precipitate ถูกล้างด้วยกระบอกน้ำสามครั้ง ปริมาณของน้ำที่ใส่ได้ 200 ml ในการล้างครั้งแรกและ 100 ml ล้างที่สอง และที่สามล้าง Precipitate หินถูกระงับใน 2 ml 100กลีเซอร สารแขวนลอยถูกคำถาม microcentrifugationหลอด โดย ytl 50 แช่แข็ง ด้วยไนโตรเจนเหลว และเก็บรักษาไว้เป็นเซลล์มีอำนาจอะโกรแบคทีเรียมที่-80 องศาเซลเซียส [0057]5. การทรานสฟอร์ม 2 อะโกรแบคทีเรียม โดยอิเลคโทรพอเรชันเพิ่ม 0.5 ytg ของดีเอ็นเอในเซลล์มีอำนาจ และส่วนผสมถูกวางลงใน cuvette (มม. 2 ช่วง) หลังจากนั้น อิเลคโทรพอเรชันที่ดำเนินการภายใต้สภาวะต่อไปนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โคโลนีที่เดียวที่ปรากฏหลังจากที่สองถึงสามวันก็เลี้ยงใน 3 มิลลิลิตรของอาหารปอน 2 มิลลิลิตรของวัฒนธรรม
การแก้ปัญหาที่มาถึงเฟสถูกบันทึกอยู่ใน 200 มล. ของ
อาหาร LB ตามด้วยวัฒนธรรมที่มีการเขย่าที่ 180 รอบต่อนาที
วิธีการแก้ปัญหาวัฒนธรรมที่ OD550 เป็น 0.5-1.0 ถูกหมุนเหวี่ยง
(4,000xg 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที) และตะกอนถูกล้างด้วย
น้ำหมันสามครั้ง ปริมาณน้ำที่ผ่านการฆ่าเชื้อ 200 มล.
ในการซักครั้งแรกและ 100 มล. ในการซักที่สองและที่สาม
ล้าง ล้างตะกอนถูกระงับใน 2 มิลลิลิตร 100
กลีเซอรอล สารแขวนลอยถูกจ่ายเข้า microcentrifugation
หลอด 50 YTL แช่แข็งด้วยไนโตรเจนเหลวและเก็บรักษาไว้เป็น
อะโกรแบคทีเรียมเซลล์อำนาจที่ -80 ° C.
[0057]
5 2 อะโกรแบคทีเรียมการทรานสฟอร์มโดยอิเลคโทรพอเรชัน
0.5 ytg ของดีเอ็นเอถูกบันทึกอยู่ในเซลล์ที่มีความสามารถและ
ส่วนผสมที่ถูกวางลงใน cuvette (ช่องว่าง 2 มิลลิเมตร) หลังจากนั้นอิเลคโทรพอเรชันได้รับการดำเนินการภายใต้สภาวะดังต่อไปนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โคโลนีเดียวที่ปรากฏหลังจากที่สองถึงสามวัน เลี้ยงใน 3 มล. ของอาหารปอนด์ 2 ml ของวัฒนธรรม
โซลูชันที่ถึงระยะ stationary คือเพิ่ม 200 มล.
อาหารปอนด์ตามวัฒนธรรมเขย่า ที่ 180 รอบ / นาที
วัฒนธรรมซึ่งเป็นโซลูชั่น od550 0.5 ถึง 1.0 ระดับ
( 4000xg 4 ° C , 10 นาที ) , และที่ถูกล้างด้วยน้ำหมัน
3 ครั้งปริมาณน้ำหมันเป็น 200 ml
ในก่อนล้างและ 100 มล. ในการซัก สอง และสามในล้าง

ล้างตะกอนลอยใน 2 มล. 100
กลีเซอรอล . การสารแขวนลอยคือจ่ายเป็น microcentrifugation
หลอด 50 YTL แช่แข็งด้วยไนโตรเจนเหลว และรักษาไว้เป็น
อะโกรแบคทีเรียมเชี่ยวชาญเซลล์ที่ - 80 องศา 0057
[ ]
52 อะโกรแบคทีเรียมการทรานสฟอร์มโดยอิเลคโทรพอเรชัน
0.5 ytg ของดีเอ็นเอถูกเพิ่มไปยังเซลล์ที่มีความสามารถและ
ส่วนผสมจะถูกวางลงในคิวเวตต์ ( 2-mm ช่องว่าง ) หลังจากนั้นอิเลคโทรพอเรชันกระทำภายใต้สภาวะ
1