Plasmodium vivax is the most widely

Plasmodium vivax is the most widely distributed human malaria parasite. Despite its importance, both clinical and basic research has been hampered by lack of a convenient in vitro culture system, in part due to the parasite's infection preference of reticulocytes rather than mature erythrocytes. The use of reticulocyte-producing hematopoietic stem cell culture has been proposed for the maintenance of the parasite, but good numbers of reticulocytes and P. vivax parasites sufficient for practical use in research have been difficult to produce from this system. Here, we report an improved method of hematopoietic stem cell culture for P. vivax infection, which requires less time and produces higher or equivalent percentage of reticulocytes than previously reported systems. Reticulocytes were cultured from cryopreserved erythroblasts that were frozen after 8days-cultivation of purified CD34+ cells from human umbilical cord blood. This method of production allowed the recovery of reticulocytes in a shorter time than with continuous stem cell culture. We obtained a relatively high percentage of peak reticulocyte production by using co-cultivation with a mouse stromal cell line. Using P. vivax mature stage parasites obtained from infected Aotus monkeys, we observed substantial numbers (up to 0.8 % of the total number of the cells) of newly invaded reticulocytes 24hours after initial cultivation. The addition of fresh reticulocytes after 48hours culture, however, did not result in significant increase of second cycle reticulocyte invasion. Assays of invasion inhibition with specific antibodies were successful with this system, demonstrating potential for study of biological processes as well as the conditions necessary for long-term maintenance of P. vivax in vitro.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Plasmodium v​​ivax เป็นกระจายอย่างกว้างขวางมากที่สุดของมนุษย์ปรสิตมาลาเรีย แม้จะมีความสำคัญของการวิจัยทางคลินิกและพื้นฐานทั้งสองได้รับการขัดขวางจากการขาดในหลอดทดลองระบบวัฒนธรรมสะดวกในส่วนหนึ่งเนื่องจากการตั้งค่าการติดเชื้อปรสิตของ reticulocytes มากกว่าเม็ดเลือดแดงเป็นผู้ใหญ่การใช้เซลล์ต้นกำเนิดวัฒนธรรม reticulocyte ผลิตเม็ดเลือดได้รับการเสนอสำหรับการบำรุงรักษาของปรสิต แต่ตัวเลขที่ดีของ reticulocytes และพี ปรสิต vivax เพียงพอสำหรับการใช้ในทางปฏิบัติในการวิจัยได้รับยากที่จะผลิตจากระบบนี้ ที่นี่เราแจ้งวิธีการที่ดีขึ้นของการเพาะเลี้ยงเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดสำหรับ p การติดเชื้อ vivax,ที่ต้องใช้เวลาน้อยลงและการผลิตในสัดส่วนที่สูงหรือเทียบเท่าของ reticulocytes กว่าระบบรายงานก่อนหน้านี้ reticulocytes ถูกเลี้ยงจาก erythroblasts แช่แข็งที่ถูกแช่แข็งหลังจาก 8days ปลูกบริสุทธิ์ของเซลล์ CD34 จากเลือดจากสายสะดือมนุษย์วิธีการผลิตนี้ได้รับอนุญาตให้การฟื้นตัวของ reticulocytes ในเวลาสั้นกว่าด้วยการเพาะเลี้ยงเซลล์ต้นกำเนิดอย่างต่อเนื่อง เราได้รับร้อยละที่ค่อนข้างสูงของการผลิต reticulocyte สูงสุดโดยใช้การเพาะปลูกร่วมกับสายเมาส์เซลล์ stromal โดยใช้พี vivax ผู้ใหญ่ปรสิตเวทีที่ได้รับจากลิงที่ติดเชื้อ aotus เราสังเกตเห็นจำนวนมาก (ถึง 08% ของจำนวนของเซลล์) ของ reticulocytes บุกขึ้นใหม่ตลอด 24 ชั่วโมงหลังจากการเพาะปลูกครั้งแรก นอกเหนือจากการ reticulocytes สดหลังจาก 48hours วัฒนธรรม แต่ไม่ได้ผลในการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญของการบุกรุก reticulocyte วงจรที่สอง การตรวจการยับยั้งการรุกรานที่มีแอนติบอดี้ที่เฉพาะเจาะจงได้ประสบความสำเร็จกับระบบนี้แสดงให้เห็นถึงศักยภาพในการศึกษากระบวนการทางชีวภาพที่เป็นเงื่อนไขที่จำเป็นสำหรับการบำรุงรักษาในระยะยาวของพี vivax ในหลอดทดลอง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Vivax พลาสโมเดียมเป็นปรสิตมาลาเรียมนุษย์กระจายกันอย่างแพร่หลาย แม้ มีความสำคัญ การวิจัยทั้งทางคลินิก และพื้นฐานได้รับการขัดขวาง โดยขาดระบบสะดวกเพาะ บางส่วนเนื่องจากการกำหนดลักษณะการติดเชื้อของเชื้อมาลาเรียของ reticulocytes มากกว่าผู้ใหญ่ erythrocytes ใช้ของ reticulocyte ผลิตเซลล์ต้นกำเนิดของเม็ดเลือด ได้มีการเสนอวัฒนธรรมสำหรับการบำรุงรักษาของเชื้อมาลาเรีย แต่หมายเลขดีของ reticulocytes และเพียงพอสำหรับใช้ปฏิบัติงานวิจัยกับ P. vivax ได้ยากในการผลิตจากระบบนี้ ที่นี่ เรารายงานวิธีการปรับปรุงการเพาะเลี้ยงเซลล์ต้นกำเนิดของเม็ดเลือดการติดเชื้อ P. vivax ซึ่งต้องใช้เวลา และให้เปอร์เซ็นต์สูงกว่า หรือเทียบเท่าของ reticulocytes กว่าระบบรายงานไปก่อนหน้านี้ Reticulocytes มี cultured จาก erythroblasts cryopreserved ที่ถูกแช่เย็นหลังจากเพาะปลูก 8days บริสุทธิ์ CD34 เซลล์จากเลือดสายสะดือมนุษย์ วิธีการผลิตนี้อนุญาตให้กู้คืน reticulocytes ในเวลาสั้นกว่ากับวัฒนธรรมเซลล์ต้นกำเนิดอย่างต่อเนื่อง เราได้รับเปอร์เซ็นต์ค่อนข้างสูงของพีค reticulocyte ผลิต โดยปลูกร่วมกับเส้นเซลล์ stromal เมาส์ เราใช้ปรสิตระยะผู้ใหญ่ P. vivax ที่ได้จากลิง Aotus ติดไวรัส สังเกตพบเลข (ถึง 08% ของจำนวนเซลล์) ของ reticulocytes ใหม่ invaded 24hours หลังจากเพาะปลูกเริ่มต้น แห่ง reticulocytes สดหลังจากวัฒนธรรม 48hours ไร ผลไม่เพิ่มของบุกรุก reticulocyte รอบสอง Assays ยับยั้งการบุกรุกโดยเฉพาะแอนตี้ไม่ประสบความสำเร็จ ด้วยระบบนี้ เห็นศักยภาพศึกษากระบวนการทางชีวภาพเป็นเงื่อนไขจำเป็นสำหรับการบำรุงรักษาระยะยาวของ P. vivax ใน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

vivax plasmodium ปรสิตมีไข้มาลาเรียของมนุษย์อย่างกว้างขวางมากที่สุดจำหน่ายได้ แม้ว่าจะมีความสำคัญของการวิจัยทั้งสองทางการแพทย์และเรียบง่ายได้รับการวินาศกรรมโดยการขาดระบบวัฒนธรรมความสะดวกสบายใน Vitro ในส่วนพื้นที่เนื่องจากการกำหนดลักษณะของการติดเชื้อปรสิตของ reticulocytes erythrocytes มากกว่าสำหรับผู้ที่ บรรลุนิติภาวะ แล้วการใช้วัฒนธรรมเซลล์ hematopoietic reticulocyte - การผลิตได้รับการเสนอเพื่อการบำรุงรักษาของปรสิตที่แต่ตัวเลขที่ดีของเชื้อโรค vivax และ P reticulocytes เพียงพอสำหรับการใช้งานในทางปฏิบัติในการวิจัยได้รับการได้ยากที่จะผลิตจากระบบนี้ ณที่นี่เรารายงานวิธีการปรับปรุงให้ดีขึ้นของวัฒนธรรมเซลล์ hematopoietic สำหรับการติดเชื้อ vivax P .ซึ่งต้องใช้เวลาที่น้อยลงและทำให้เปอร์เซ็นต์สูงกว่าหรือเทียบเท่าของ reticulocytes กว่าที่เคยรายงานระบบ reticulocytes เป็นวัฒนธรรมจาก erythroblasts cryopreserved ที่แช่แข็งหลังจาก 8 วัน - การปลูกของแผ่นซีดีบริสุทธิ์ 34 เซลล์จากเลือดสายสะดือของมนุษย์วิธีนี้ของการผลิตได้รับอนุญาตให้การกู้คืนที่ของ reticulocytes ในเวลาสั้นกว่าพร้อมด้วยวัฒนธรรมเซลล์อย่างต่อเนื่อง เราได้รับเปอร์เซ็นต์ค่อนข้างสูงการผลิต reticulocyte สูงสุดโดยใช้สายของเซลล์ - การปลูกด้วย stromal เมาส์ การใช้ในเวทีที่สุกงอมเต็มที่ vivax p .ได้รับจากลิง aotus ผู้ติดเชื้อเราสังเกตเห็นตัวเลขจำนวนมาก(สูงถึง 08% ของจำนวนรวมของเซลล์)ของ reticulocytes บุกเข้าไปใหม่ 24 ชั่วโมงหลังจากการปลูกครั้งแรก จากการที่การแสดงทางวัฒนธรรม reticulocytes หลังจาก 48 ชั่วโมงสดใหม่แต่ถึงอย่างไรก็ตามไม่ได้ผลในเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญของการรุกราน reticulocyte รอบที่สอง assays ของยับยั้งการรุกรานด้วยเมื่อเส้นเลือดถูกระบุความสำเร็จกับระบบนี้แสดงให้เห็นถึง ศักยภาพ ในการศึกษาของกระบวนการทาง ชีวภาพ รวมทั้งเงื่อนไขต่างๆที่จำเป็นสำหรับการบำรุงรักษาระยะยาวของ vivax p .ใน Vitro