SUBCULTURING IN BROTH
• Subcultring in an appropriate broth e.g. yeast malt extract broth
• Incubate without shaking and keep in 4oC
• Convenient
• Not time-consuming
• Not expensive
• Risk for contamination
• Risk for genetic change
• Low survival rate for long term storage
• Most are stable for 6 months
5 July 22, 2012 Footer text here
SUBCULTURING IN AGAR
• Agar in McCartney bottle
• Storage in 4 oC
• Media with only glucose as an only carbon source gives the best result
• Culturing in YMA may cause genetic change in 2-3 days in some strain
6 July 22, 2012 Footer text here
SUBCULTURING IN AGAR SLANT WITH OIL
OVERLAY
• Use sterilized, medically-used oil
• Reduced metabolic rate
• Up to 1 year
• The oil is added as 1 cm high
• Storage at 4 oC
• Stable for 2-3 years
• Risk for contamination
• Not recommended for pathogenic yeast
7 July 22, 2012 Footer text here
SUBCULTURING IN WATER
• Reduced metabolic rate
• Culture the yeast in agar to reach late exponential phase
• Resuspend in distilled water
• Store in room temperature
• Up to 4 years
8 July 22, 2012 Footer text here
DRYING ON FILTER PAPER
• Resuspending the yeast with non-fat milk solution
• Transfer to sterilized filter paper
• Dry with dessicator at 4oC for 2-3 weeks until become dry
• Store in 4 oC
• Stable for 5-10 years
• Convenient and non expensive
9 July 22, 2012 Footer text here
DRYING ON SILICA GEL
• Operate in low temperature to prevent heat
• Resuspending the yeast with non-fat milk solution
• Drop the resuspeded cells on sterilized silica gel in McCartney bottle
• Keep in room temperature until dry
• Upto 2-5 years
10 July 22, 2012 Footer text here
LYOPHILIZATION
• Most complex and expensive form of drying
• Require expensive instrument
• Require many processes with carefully controlled
• Not appropriate for yeast sensitive to freezing
• Resuspeding the yeast in an appropriate solution, e.g., 7.5%
glucose in inactive horse serum
• freezing the yeast
• reducing the surrounding pressure to allow the frozen water
in the material to sublimate directly from the solid phase to
the gas phase
• Store at 4 oC
• Most stable technique: low genetic change
• Up to 50 years
11 July 22, 2012 Footer text here
12 July 22, 2012 Footer text here
13 July 22, 2012 Footer text here
LIQUID-DRYING
• Vacuum-drying of samples from the liquid state without freezing
• Store in < 5 oC
• For yeasts which are sensitive to freezing
• Require specialized equipment
14 July 22, 2012 Footer text here
FREEZING IN LIQUID NITROGEN
• Prohibit metabolisms by storing the yeast in
low temperature (-196 oC)
• Long-term survival
• No genetic change
• Require cryoprotectant (e.g. 10% glycerol)
to prevent damage during freezing
• Require cryotube
• Require 2 phases: (1) freezing at -30 for 2 hrs
then transfer to (2) liquid nitrogen
• Up to 4 years
15 July 22, 2012 Footer text here
QUALITY CONTROL
• Viability
• Purity
• Stability of phenotype and genotype
• Taxonomy
• Genetic marker
• Nutritional marker
• Plasmid
• Pathogenic activity
เลี้ยงใน broth
- subcultring ในที่เหมาะสม เช่น ยีสต์ น้ำซุป malt extract broth
- ฟักไข่ไม่สั่น และเก็บใน 4oc
-
- สะดวก - ไม่ต้องแพง - เสี่ยงการปนเปื้อน
-
- ความเสี่ยงทางพันธุกรรมเปลี่ยนอัตราการรอดต่ำในระยะยาวกระเป๋า
-
ส่วนใหญ่คงที่ เป็นเวลา 6 เดือน 5 กรกฎาคม 22 , 2012 ข้อความส่วนท้ายนี่
เลี้ยงในวุ้น - วุ้นใน
ขวด แม็คคาร์ทนีย์- กระเป๋า 4 สื่อ - OC
กับกลูโคสเป็นแหล่งคาร์บอนเท่านั้นให้บริการดีที่สุดในการเลี้ยงผล
yma สาเหตุทางพันธุกรรมใน 2-3 วัน อาจเปลี่ยนในบางสายพันธุ์
6 กรกฎาคม 22 , 2012 ข้อความส่วนท้ายที่นี่
เลี้ยงในวุ้นเอียงด้วยน้ำมัน
- ทับใช้ฆ่าเชื้อ ในทางการแพทย์ใช้น้ำมัน
- ลดลง อัตราการเผาผลาญ
-
ถึง - 1 ปีน้ำมันเพิ่มเป็น 1 ซม. สูง
-
- เก็บที่ 4 องศาเซลเซียสคงที่ 2-3 ปี
ความเสี่ยง - การปนเปื้อน
- ไม่แนะนำสำหรับเชื้อยีสต์
7 กรกฎาคม 22 , 2012 ข้อความส่วนท้ายมาเลี้ยงในน้ำ
-
- ลดอัตราการเผาผลาญวัฒนธรรมยีสต์ในวุ้นถึงสายชี้แจงขั้นตอน
-
resuspend น้ำกลั่น - เก็บในอุณหภูมิห้องถึงปี 4
-
8 กรกฎาคม 22 2012 ข้อความส่วนท้ายนี่แห้งบนกระดาษกรอง
-
เจริญยีสต์ปลอดไขมันนมโซลูชั่น
บริการโอนเพื่อฆ่าเชื้อกระดาษกรอง
- บริการกับเดสิ กเคเตอร์ที่ 4oc 2-3 สัปดาห์ จนกลายเป็นแห้ง
- ร้าน - 4 องศาเซลเซียสคงที่ 5-10 ปี สะดวกและไม่แพง
-
9 กรกฎาคม 22 , 2012 ข้อความส่วนท้ายนี่
- การอบแห้งในซิลิกาเจลใช้ในอุณหภูมิต่ำ เพื่อป้องกันความร้อน
- เจริญที่ยีสต์ไม่อ้วน
นม โซลูชั่น- วาง resuspeded เซลล์บนซิลิกาเจลฆ่าเชื้อในขวด
- บันทึกเก็บไว้ในอุณหภูมิห้องจนกว่าไม่เกิน 2-5 ปี - บริการ
10 กรกฎาคม 22 , 2012 ข้อความส่วนท้ายนี่
- เอนไซม์ที่ซับซ้อนมากที่สุด และแพงแบบแห้ง - -
ต้องใช้เครื่องมือราคาแพงต้องใช้หลายกระบวนการควบคุมอย่างระมัดระวังด้วย
- ไม่เหมาะกับยีสต์ ความหนาว
บริการ resuspeding ยีสต์ในโซลูชั่นที่เหมาะสม เช่น กลูโคสในซีรั่มที่ 7.5 %
- ม้าแช่แข็งยีสต์
- ลดความดันรอบ ให้แช่น้ำ
ในวัสดุที่ระเหิดได้โดยตรงจากเฟสของแข็ง
เฟสก๊าซแต่ละร้านที่เทคนิค 4 OC
- มั่นคงที่สุด : เปลี่ยน ทางพันธุกรรมต่ำถึง 50 ปี
-
ที่ 11 กรกฎาคม 22 , 2012 ข้อความส่วนท้ายที่นี่
12 22 กรกฎาคม2012 ข้อความส่วนท้ายที่นี่
13 กรกฎาคม 22 , 2012 ข้อความส่วนท้ายนี่
liquid-drying - เครื่องดูดฝุ่นแห้งตัวอย่างจากสถานะของเหลวโดยไม่ต้องแช่แข็ง
-
- < 5 ร้านใน OC สำหรับยีสต์ซึ่งมีความต้องการเฉพาะอุปกรณ์แช่แข็ง
-
14 กรกฎาคม 22 , 2012 ข้อความส่วนท้ายนี่
-
แช่แข็งในไนโตรเจนเหลว ห้ามการเผาผลาญอาหารโดยเก็บยีสต์
อุณหภูมิต่ำ ( - 196 องศาเซลเซียส )
-
อยู่รอดในระยะยาว- ไม่ต้องเปลี่ยนพันธุกรรม
- น้ำยา ( เช่น 10% กลีเซอรอล )
เพื่อป้องกันความเสียหายระหว่างแช่แข็ง
-
ต้อง cryotube - ต้องการ 2 ขั้นตอนคือ ( 1 ) การแช่แข็งที่อุณหภูมิ - 30 เป็นเวลา 2 ชั่วโมง
โอนแล้ว ( 2 ) ไนโตรเจนเหลว
-
ถึง 4 ปี 15 กรกฎาคม 22 , 2012 ส่วนท้ายข้อความที่นี่
- - การควบคุมคุณภาพและความบริสุทธิ์
- เสถียรภาพของการโต
-
-
- พันธุกรรมของเครื่องหมายเครื่องหมาย
โภชนาการพลาสมิด
- เชื้อโรค - กิจกรรม
การแปล กรุณารอสักครู่..
