Abstract. Rubber tree is the main s

Abstract. Rubber tree is the main source of natural rubber and is the most important economic member of the Hevea genus. Polysaccharides and polyphenols in mature leaf can reduce the success of DNA extraction and downstream applications. This makes the isolation of high quality and molecular weight DNA from mature leaves of rubber tree challenging. The DNA yield and purity obtained using eight methods involving use of cetyltrimethylammonium bromide, SDS, and two commercial kits were compared. The modified procedure from Moreira & Oliveira (2011) consistently yields approximately 34 μg of high-quality amplifiable DNA with as little as 0.05 g fresh weight of mature leaf tissue of rubber tree. The key changes in the procedure were (1) a short grinding of leaf powder in mortar with extraction buffer after blending the leaf tissue in the presence of liquid nitrogen; (2) the optimization of the ratio of tissue (weight) to buffer (volume); (3) CTAB was added only once and (4) reduction in the incubation time of the macerated tissue in an extraction buffer including RNase A at 65 °C for 15 minutes. The procedure was also applicable to seventeen other tropical plant species. This helped to avoid the limitation of plant materials and could provide total DNA for further molecular studies.
Key Words: DNA extraction, mature leaf, Hevea genus, 18S rRNA, trnL-F, ISSR, RAPD.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อ ต้นยางเป็นแหล่งหลักของยางธรรมชาติ และเป็นสมาชิกของสกุล Hevea เศรษฐกิจสำคัญที่สุด ไรด์และโพลีฟีนแก่ ๆ ใบสามารถลดความสำเร็จในการสกัดดีเอ็นเอและการใช้งานที่ปลายน้ำ นี้ทำให้แยกคุณภาพสูงและน้ำหนักโมเลกุลดีเอ็นเอจากใบของต้นยางท้าทาย ผลผลิตดีเอ็นเอและความบริสุทธิ์ที่ใช้เกี่ยวข้องกับการใช้ cetyltrimethylammonium โบรไมด์ SDS และชุดพาณิชย์สองแปดวิธีมาเปรียบเทียบกัน กระบวนการแก้ไขจาก Moreira Oliveira (2011) อย่างต่อเนื่องผลผลิตคุณภาพดีเอ็นเอ amplifiable ประมาณ 34 μ มีเพียง 0.05 กรัมน้ำหนักสดของใบแก่ ๆ เนื้อเยื่อของต้นยาง การเปลี่ยนแปลงที่สำคัญในขั้นตอน (1) แบบสั้นบดของผงในครกด้วยบัฟเฟอร์สกัดหลังผสมเนื้อเยื่อใบในไนโตรเจนเหลว (2) การเพิ่มประสิทธิภาพของอัตราส่วนของเนื้อเยื่อ (น้ำหนัก) บัฟเฟอร์ (ไดรฟ์ข้อมูล); (3) CTAB ได้เพิ่มเพียงครั้งเดียว และ (4) ลดเวลาการบ่มของเนื้อเยื่อ macerated ในบัฟเฟอร์การสกัดรวม RNase A 65 ° c 15 นาที ขั้นตอนก็สามารถใช้ได้กับชนิดพืชเขตร้อนอื่น ๆ 17 นี้ช่วยหลีกเลี่ยงข้อจำกัดของวัสดุโรงงาน และได้จัดให้รวมดีเอ็นเอโมเลกุลศึกษาต่อไปคำสำคัญ: สกัดดีเอ็นเอ ใบแก่ ๆ สกุล Hevea, 18 ปี rRNA, trnL-F, ISSR อาร์เอพีดี

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

นามธรรม. ยางพาราเป็นแหล่งที่มาหลักของยางธรรมชาติและเป็นสมาชิกทางเศรษฐกิจที่สำคัญที่สุดของพันธุ์ยางพารา polysaccharides และโพลีฟีนในใบผู้ใหญ่สามารถลดความสำเร็จของการสกัดดีเอ็นเอและการใช้งานต่อเนื่อง นี้จะทำให้การแยกคุณภาพสูงและน้ำหนักโมเลกุลดีเอ็นเอจากใบแก่ของต้นยางที่ท้าทาย ผลผลิตดีเอ็นเอและความบริสุทธิ์ได้ใช้แปดวิธีเกี่ยวข้องกับการใช้โบรไมด์ cetyltrimethylammonium, SDS และสองชุดถูกนำมาเปรียบเทียบในเชิงพาณิชย์ ขั้นตอนการแก้ไขจากอิ & Oliveira (2011) อย่างต่อเนื่องอัตราผลตอบแทนประมาณ 34 ไมโครกรัมดีเอ็นเอ amplifiable คุณภาพสูงที่มีน้อยที่สุดเท่าที่ 0.05 กรัมน้ำหนักสดของเนื้อเยื่อใบผู้ใหญ่ของต้นยางพารา การเปลี่ยนแปลงที่สำคัญในขั้นตอนคือ (1) บดสั้นของผงใบในครกกับกันชนหลังสกัดผสมเนื้อเยื่อใบในการปรากฏตัวของไนโตรเจนเหลวนั้น (2) การเพิ่มประสิทธิภาพของอัตราส่วนของเนื้อเยื่อ (น้ำหนัก) เพื่อ buffer (โดยปริมาตร); (3) CTAB ถูกเพิ่มเข้ามาเพียงครั้งเดียวและ (4) การลดลงในเวลาฟักตัวของเนื้อเยื่อ macerated ในบัฟเฟอร์สกัดรวมทั้ง RNase ที่ 65 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาที ขั้นตอนนี้ยังมีผลบังคับใช้กับคนอื่น ๆ เจ็ดพันธุ์พืชเขตร้อน นี้จะช่วยในการหลีกเลี่ยงข้อ จำกัด ของวัสดุพืชและสามารถให้ดีเอ็นเอรวมสำหรับการศึกษาในระดับโมเลกุลต่อไป.
คำสำคัญ: การสกัดดีเอ็นเอใบผู้ใหญ่ Hevea สกุล 18S rRNA, trnL-F, ISSR, RAPD

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

นามธรรม ยางพาราเป็นแหล่งที่มาหลักของยางธรรมชาติและเป็นสมาชิกทางเศรษฐกิจที่สำคัญที่สุดของพืชยางพารา . ไรด์ โพลีฟีนอล ในใบแก่และสามารถลดความสำเร็จของการสกัดดีเอ็นเอและการประยุกต์ด้านท้ายน้ำ นี้จะทำให้การแยกคุณภาพสูงและดีเอ็นเอโมเลกุลจากผู้ใหญ่ ใบของต้นยางที่ท้าทาย ดีเอ็นเอผลผลิตและความบริสุทธิ์ได้รับใช้แปดวิธีการที่เกี่ยวข้องกับการใช้ cetyltrimethylammonium โบรไมด์ , SDS , และสองชุดเป็นเชิงเปรียบเทียบ การปรับเปลี่ยนวิธีการ จาก โมไรร่า & Oliveira ( 2011 ) อย่างต่อเนื่อง ผลผลิตประมาณ 34 μกรัม คุณภาพสูง amplifiable ดีเอ็นเอที่มีน้ำหนักเพียง 0.05 กรัม ใบแก่ เนื้อเยื่อของต้นยาง การเปลี่ยนแปลงที่สำคัญในขั้นตอนคือ ( 1 ) สั้นบดผงในครกใบบัฟเฟอร์สกัดหลังจากผสมใบเนื้อเยื่อในการแสดงตนของไนโตรเจนเหลว ( 2 ) การเพิ่มประสิทธิภาพของอัตราส่วนของเนื้อเยื่อ ( น้ำหนัก ) บัฟเฟอร์ ( เสียง ) ; ( 3 ) ctab เพิ่มเพียงครั้งเดียว ( 1 ) การลดเวลาในการบ่มของ macerated เนื้อเยื่อในการสกัดกันชนรวมถึงเลสที่ 65 °องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาที ขั้นตอนยังใช้ได้ถึง 17 ชนิดพืชเขตร้อนอื่น ๆ นี้จะช่วยหลีกเลี่ยงข้อจำกัดของวัสดุพืชและสามารถให้ดีเอ็นเอทั้งหมดเพื่อการศึกษาระดับโมเลกุล เพิ่มเติมคำสำคัญ : การสกัด ดีเอ็นเอผู้ใหญ่ใบยางพาราสกุล 18S rRNA trnl-f issr , , ด้วย , , .