Berry culture and 13C stable isotop

Berry culture and 13C stable isotope tracer experiment
At veraison, softened green berries (V. vinifera L. cv. Cabernet
Sauvignon) were excised from the rachis, and sterilized with a dilute
solution of sodium hypochlorite (1%), then with ethanol (70%), and
finally rinsed twice with deionized water. The sterilized berries were
cut around the peduncle and aseptically incubated on filter paper in
a Petri dish. A 4.5 ml filter-sterilized aqueous [13C]phenylalanine
solution (0.3 M sucrose, 1 mM L-[1-13C]phenylalanine) was applied
to the berries, and the berries were then incubated at 25
C under
fluorescent light at approximately 40 lmol m
2 s
1. After 1 week
of culture, the berries were placed on a new Petri dish containing
a 0.3 M sucrose solution. Thereafter, the berries were cultured
without phenylalanine at 15, 25, and 35
C under fluorescent light
at approximately 40 lmol m
2 s
1. After 0, 2, 5, and 7 d of
temperature treatment, the berries from each dish were collected. As
stated above, the berries were peeled, frozen immediately in liquid
nitrogen and stored at
80
C until use. Experiments were
triplicated, with each replicate consisting of six or seven berries
in a Petri dish.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เบอร์รี่วัฒนธรรมและติดตามของไอโซโทป 13C ทดลองที่ veraison ก่อครบสีเขียว (V. vinifera L. พันธุ์ Cabernetปกติ) excised จาก rachis ใบ และ sterilized มีการ diluteโซลูชัน ของผงฟอกขาว (1%), แล้ว ด้วยเอทานอล (70%), และสุดท้าย rinsed ด้วยน้ำ deionized ครั้ง มีครบ sterilizedตัด peduncle และ incubated aseptically บนกระดาษกรองในจานเพาะเชื้อ 4.5 ml กรอง sterilized อควี [13C] phenylalanineโซลูชัน (0.3 M ซูโครส 1 mM ใช้ L-[1-13C]phenylalanine)ให้ครบ และครบได้แล้ว incubated ที่ 25 C ภายใต้ไฟเรืองแสงที่ lmol ประมาณ 40 เมตร 2 s 1 หลังจาก 1 สัปดาห์วัฒนธรรม ครบจะถูกวางไว้บนตัวใหม่จานเพาะเชื้อที่ประกอบด้วยโซลูชั่นซูโครส 0.3 M หลังจากนั้น การครบมีอ่างไม่ มี phenylalanine ที่ 15, 25 และ 35 C ภายใต้แสงฟลูออเรสที่ประมาณ 40 lmol m 2 s 1 หลังจาก 0, 2, 5 และ 7 d ของรักษาอุณหภูมิ ครบจากอาหารแต่ละจานถูกเก็บรวบรวม เป็นกล่าว ครบจะได้ปอกเปลือก แช่แข็งทันทีในของเหลวไนโตรเจน และเก็บไว้ที่ 80 C จนใช้ การทดลองได้triplicated กับแต่ละซ้ำประกอบด้วยครบหก หรือเจ็ดในจานเพาะเชื้อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัฒนธรรมและแบล็กเบอร์ไอโซโทป 13C
มั่นคงทดลองตามรอยที่veraison นิ่มเบอร์รี่สีเขียว (โวลต์ vinifera L. พันธุ์. Cabernet
Sauvignon)
ถูกตัดจากขนนกและผ่านการฆ่าเชื้อด้วยเจือจางแก้ปัญหาของโซเดียมไฮโปคลอไรต์(1%) แล้วกับเอทานอล (70 %)
และล้างในที่สุดสองครั้งด้วยน้ำปราศจากไอออน ผลเบอร์รี่ผ่านการฆ่าเชื้อที่ถูกตัดรอบคอดและบ่มปลอดเชื้อบนกระดาษกรองในจานเพาะเชื้อ 4.5 มล. น้ำกรองฆ่าเชื้อ [13C] phenylalanine การแก้ปัญหา (0.3 M ซูโครส 1 มิลลิ L- [1-13C] phenylalanine) ถูกนำมาใช้เพื่อผลเบอร์รี่และผลเบอร์รี่แล้วถูกบ่มที่อุณหภูมิ25 องศาเซลเซียสภายใต้แสงไฟที่ประมาณ40 lmol m? 2 วินาที 1 หลังจาก 1 สัปดาห์ที่ของวัฒนธรรม, เบอร์รี่ที่ถูกวางไว้บนจานเลี้ยงเชื้อใหม่ที่มี 0.3 M สารละลายน้ำตาลซูโครส หลังจากนั้นเป็นต้นมาผลเบอร์รี่มาเลี้ยงโดยไม่ต้อง phenylalanine ที่ 15, 25 และ 35 องศาเซลเซียสภายใต้แสงไฟนีออนที่ประมาณ40 lmol m? 2 วินาที 1 หลังจากที่ 0, 2, 5 และ 7 วันของการรักษาอุณหภูมิเบอร์รี่จากอาหารแต่ละจานที่ถูกเก็บรวบรวม ในฐานะที่ระบุไว้ข้างต้นเบอร์รี่ที่ถูกปอกเปลือกแช่แข็งทันทีในของเหลวไนโตรเจนและเก็บไว้ที่? 80? C จนถึงการใช้งาน ทดลองtriplicated กับแต่ละซ้ำประกอบด้วยหกหรือเจ็ดเบอร์รี่ในจานเพาะเชื้อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัฒนธรรม เบอร์รี่ และ 13C ไอโซโทปเสถียรติดตามการทดลอง
ที่ veraison นิ่มผลเบอร์รี่สีเขียว ( V vinifera L . cv . Cabernet Sauvignon )
ตัดจากก้านขนนก และฆ่าเชื้อด้วยสารละลายโซเดียมไฮโปคลอไรต์ ( เจือจาง
1 % ) แล้วกับเอทานอล ( 70% ) และ
ในที่สุดล้างสองครั้งกับคล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำ โดยเบอร์รี่ถูก
ตัดรอบต้น aseptically บนกระดาษกรองและบ่มใน
จานเพาะเชื้อ . 4.5 มิลลิลิตร กรองสารละลายฆ่าเชื้อ [ 13C ] ฟีนิล
โซลูชั่น ( 0.3 M sucrose , 1 มม. L - [ 1-13c ] ฟีนิล ) คือใช้
เพื่อผลเบอร์รี่และผลเบอร์รี่แล้วอุณหภูมิ 25 C ภายใต้แสงฟลูออเรสเซนต์

ประมาณ 40 lmol M
2 s
1 หลังจาก 1 สัปดาห์
กระทรวงวัฒนธรรม เบอร์รี่ถูกวางไว้บนจานเลี้ยงเชื้อที่มีใหม่
0.3 M sucrose โซลูชั่น หลังจากนั้น ผลเบอร์รี่ที่เพาะเลี้ยง
ไม่มี phenylalanine ที่ 15 , 25 และ 35 องศาเซลเซียสภายใต้แสงฟลูออเรสเซนต์

ประมาณ 40 lmol M
2 s
1 หลังจาก 0 , 2 , 5 และ 7 D
รักษาอุณหภูมิ , ผลเบอร์รี่จากแต่ละจานถูกเก็บ โดย
กล่าวข้างต้น ผลเบอร์รี่ที่ถูกปอกเปลือกแช่แข็งในไนโตรเจนเหลว
ทันทีและเก็บไว้ที่
80
C จนใช้ การทดลอง
triplicated กับแต่ละซ้ำประกอบด้วยหกหรือเจ็ดเบอร์รี่
ในจานเพาะเชื้อ