2.2. Gene transfer and ex ovo cultu

2.2. Gene transfer and ex ovo culture of the embryos
For higher gene transfer efficiency and easier embryo manipulation,ex ovoculture[14]was employed. Unlike the traditional windowing technique, theex ovomethod requires both donor eggs and
recipient eggs. The donors were fertilized eggs (stage X embryos
according to the classification, see Ref.[15]) obtained from ISA
brown laying hens that were artificially inseminated once per
week with semen from ISA brown males. Only eggs of normal
shape weighing approximately 60 g were used. The weight of a recipient egg was at least 62 g (for the first 3 days of incubation) or
90 g (for the rest of the incubation period). After swabbing the
shells with 70% alcohol, the donor egg was opened and its contents
were transferred to an empty recipient eggshell drilled to create a
window (a circular hole, 33 mm in diameter) at the blunt end.
DMEM (5ll) containing concentrated virus and 10lg/ml polybrene was injected into the central part of the subgerminal cavity
using a microinjection pipette before the egg was covered with
additional ovalbumin and sealed with plastic wrap. After microinjection, the sealed eggs were incubated at 37.5C and 60% relative
humidity with a 90rocking motion every 15 min for 3 days. The
embryos were transferred to larger empty recipient eggshells with
a 42-mm circular window and incubated at 37C and 70% relative
humidity with a rocking motion every 30 min through a 30angle
for an additional 15 days. The rocking motion was stopped after
18 days of incubation, and the eggs were allowed to hatch after
replacing the plastic wrap covering the window with a 55-mm Petri dish lid after 20 or 20.5 days of incubation.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2 ยีนโอนและอดีต ovo วัฒนธรรมของการโคลนประสิทธิภาพการถ่ายโอนยีนสูงและจัดการอ่อนง่าย อดีต ovoculture [14] ถูกจ้าง ซึ่งแตกต่างจากเทคนิคแบบดั้งเดิม windowing, theex ovomethod ต้องการผู้บริจาคไข่ทั้งสอง และไข่ผู้รับ ผู้บริจาคมีไข่ที่ปฏิสนธิ (โคลนระยะ Xตามการจัดประเภท ดู Ref.[15]) ที่ได้รับจาก ISAสีน้ำตาลวางไก่ที่ถูก inseminated ครั้งต่อสมยอมสัปดาห์ ด้วยน้ำเชื้อจากชาย ISA สีน้ำตาล ไข่เท่าของปกติรูปร่างน้ำหนักประมาณ 60 กรัมใช้ น้ำหนักของไข่ผู้รับถูกน้อย 62 g (สำหรับ 3 วันแรกของคณะทันตแพทยศาสตร์) หรือ90 กรัม (สำหรับส่วนเหลือของระยะฟักตัว) หลังจาก swabbing การเปลือกหอย ด้วยแอลกอฮอล์ 70% เปิดผู้บริจาคไข่ และเนื้อหาได้โอนย้ายไปที่ไปสร้างเปลือกไข่ผู้ว่างเปล่าเป็นหน้าต่าง (เป็นวงกลมรู เส้นผ่าศูนย์กลาง 33 มม.ที่ปลายทื่อDMEM (5ll) ที่ประกอบด้วยไวรัสและ 10lg/ml polybrene เข้มข้นถูกฉีดเข้าไปในส่วนของช่อง subgerminalใช้เปตต์ microinjection ก่อนไข่ถูกปกคลุมไปด้วยเพิ่มเติม ovalbumin และปิดผนึก ด้วยพลาสติกตัด หลังจาก microinjection ไข่ปิดผนึกถูก incubated ที่ 37.5 C และ 60% ญาติความชื้นกับ 90 โยกเคลื่อนไหว 15 นาทีทุก ๆ 3 วัน ที่โคลนถูกโอนย้ายไปใหญ่ว่างผู้รับ eggshells ด้วยหน้าต่างกลม 42 มม. และ incubated ที่ 37 C และสัมพันธ์ 70%ความชื้นกับการเคลื่อนไหวโยกทุก 30 นาทีผ่านมุม 30วัน 15 เพิ่มเติม หยุดการเคลื่อนไหวโยกหลังวันที่ 18 ของคณะทันตแพทยศาสตร์ และไข่ที่สามารถฟักหลังจากแทนตัดพลาสติกที่ครอบคลุมหน้าต่างฝาจานเพาะเชื้อ 55 มม.หลังจากวันที่ 20 หรือ 20.5 คณะทันตแพทยศาสตร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 การถ่ายโอนยีนและอดีต Ovo วัฒนธรรมของตัวอ่อน
ที่มีประสิทธิภาพสำหรับการถ่ายโอนยีนที่สูงขึ้นและการจัดการง่ายขึ้นตัวอ่อนอดีต ovoculture [14] ถูกจ้างมา ซึ่งแตกต่างจากเทคนิค Windowing แบบดั้งเดิม ovomethod theex ต้องใช้ทั้งไข่และ
ไข่ผู้รับ ผู้บริจาคได้รับไข่ (ระยะตัวอ่อน X
ตามประเภทดู Ref. [15]) ที่ได้รับจาก ISA
สีน้ำตาลไก่ไข่ที่ได้รับการผสมเทียมเทียมครั้งต่อ
สัปดาห์กับน้ำอสุจิจากเพศน้ำตาล ISA เฉพาะไข่ปกติ
ชั่งน้ำหนักรูปร่างประมาณ 60 กรัมถูกนำมาใช้ น้ำหนักของไข่ผู้รับอย่างน้อย 62 กรัม (สำหรับ 3 วันแรกของการบ่ม) หรือ
90 กรัม (สำหรับส่วนที่เหลือของระยะฟักตัว) หลังจาก swabbing
เปลือกหอยที่มีแอลกอฮอล์ 70%, ผู้บริจาคไข่ถูกเปิดและเนื้อหาของมัน
ถูกโอนไปยังผู้รับเปลือกไข่ที่ว่างเปล่าเจาะเพื่อสร้าง
หน้าต่าง (หลุมกลม 33 มม) ที่ปลายทื่อ.
DMEM (5ll) ที่มีความเข้มข้น ไวรัสและ 10lg / ml polybrene ถูกฉีดเข้าไปในภาคกลางของช่อง subgerminal
ใช้ปิเปต microinjection ก่อนที่ไข่ถูกปกคลุมด้วย
ovalbumin เพิ่มเติมและปิดผนึกด้วยพลาสติกห่อ หลังจาก microinjection ไข่ปิดผนึกที่ถูกบ่มที่ 37.5 องศาเซลเซียสและ 60% เมื่อเทียบ
กับความชื้น 90? โยกเคลื่อนไหวทุก 15 นาทีเป็นเวลา 3 วัน
ตัวอ่อนที่ถูกโอนไปยังผู้รับที่มีขนาดใหญ่เปลือกที่ว่างเปล่าที่มี
หน้าต่างขนาด 42 มมวงกลมและบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสและ 70% เมื่อเทียบ
ความชื้นที่มีการเคลื่อนไหวโยกทุก 30 นาทีผ่าน 30 มุม
สำหรับอีก 15 วัน โยกไหวก็หยุดหลังจาก
18 วันของการบ่มและไข่ได้รับอนุญาตให้ฟักหลังจาก
เปลี่ยนห่อพลาสติกครอบคลุมหน้าต่างที่มีฝาจานเลี้ยงเชื้อ 55 มมหลังจาก 20 วันหรือ 20.5 ของการบ่ม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . การถ่ายโอนยีนและอดีตว วัฒนธรรมของเอ็มบริโอ
สูงกว่าการถ่ายโอนยีนประสิทธิภาพและการจัดการตัวอ่อนได้ง่ายขึ้น เช่น ovoculture [ 14 ] ใช้ ซึ่งแตกต่างจากเทคนิคหน้าต่างแบบดั้งเดิม theex ovomethod ต้องการทั้งผู้บริจาคไข่และไข่
ผู้รับ ส่วนผู้บริจาคไข่ ( ระยะตัวอ่อน
x ตามหมวดหมู่ ดูอ้างอิง [ 15 ] ) ที่ได้จาก ISA
สีน้ำตาลไก่ไข่ที่ผสมเทียมด้วยน้ำเชื้อจากสัปดาห์ละครั้ง
ISA เพศผู้สีน้ำตาล แค่ไข่รูปร่างปกติ
หนักประมาณ 60 กรัม ใช้ น้ำหนักของไข่ผู้รับอย่างน้อย 62 กรัม ( สำหรับ 3 วันแรกของการบ่ม ) หรือ
90 กรัม ( สำหรับส่วนที่เหลือของระยะเวลา ) หลังจากซับมือ
หอยด้วยแอลกอฮอล์ 70% , ผู้บริจาคไข่ถูกเปิดและเนื้อหา
ถูกโอนไปยังผู้รับ เจาะเปลือกไข่ที่ว่างเปล่าสร้าง
หน้าต่าง ( วงกลมหลุม 33 มม. ) ที่ปลายทื่อ
dmem ( 5ll ) ที่มีไวรัสเข้มข้นและ 10lg / ml polybrene ถูกฉีดเข้าไปในภาคกลางของ
โพรง subgerminal โดยใช้ไมโครอินเจคชันเปต ก่อนที่ไข่จะถูกปกคลุมด้วย
โอวัลบูมินเพิ่มเติมและปิดผนึกด้วยพลาสติก หลังจากที่จังหวัดสุพรรณบุรี ,