Results and discussion3.1. Hydrolys

Results and discussion
3.1. Hydrolysis of polygalacturonic acid in enzymatically extracted
pectins
Galacturonic acid released during pectin and apple pomace
hydrolysis was obtained by HPLC. A complete separation of GalA
has been obtained on a HyperCarb column (Fig. 1). The galacturonic
acid content in samples of enzymatically extracted pectins
and apple pomace was significantly dependent on the type of
applied hydrolysis (Table 1). The least efficient PGalA depolymerisation
was obtained with 2 MTFA at 100 C. Prolonging the hydrolysis
time resulted in an increase of GalA released; nevertheless,
even after 4 h the hydrolysis of polygalacturonic acid was not complete.
This is consistent with the results of Emaga, Rabetafika,
Blecker, and Paquot (2012), who observed the low efficiency of the aforementioned conditions during flaxseed mucilage hydrolysis.
Other researchers also indicated the high stability of PGalA in
acidic environments (Garna et al., 2006; Lim, Yoo, Ko, & Lee,
2012; Min et al., 2011). As shown in the present study, raising
the temperature up to 120 C resulted in a significant increase in
the rate of GalA released from all the samples. The highest levels
of galacturonic acid were measured after 2.5 h of hydrolysis with
2 M TFA at 120 C. The percentage of GalA obtained in Px, Pcel
and apple pomace amounted to 61.3, 59.9 and 40.9, respectively.
Arnous and Meyer (2008) reported 45% (Red Delicious cultivar)
and 34.8% (Golden Delicious cultivar) GalA after 2 h treatments
of apple peels with 2 M TFA at 121 C. Given that the pomace used
in the present study was a mixture obtained from various cultivars
of apples, the presented data may be considered very similar. Further
prolongation of hydrolysis resulted in degradation of previously
released GalA. The comparison of the acidic hydrolysis and
the combined method shows that application of enzymes enabled
more complete PGalA depolymerisation than 4 h hydrolysis at
100 C. At the same time, it was less efficient than 2–3 h acidic
hydrolysis performed at 120 C. Garna et al. (2006) reported that
the best method of hydrolysis of pectin homogalacturonan is a
two-step procedure realised with diluted acid (0.2 M TFA, 80 C,
72 h) followed by treatment with Viscozyme. However, such a
method was not effective for more complex green labeled pectins
(Zykwinska, Gaillard, Boiffard, Thibault, & Bonnin, 2009). Moreover,
the preparation Viscozyme L9, recommended by the aforementioned
authors, appeared to be much less active towards
enzymatically extracted pectines than multicatalytic Energex L
(Table 1). This is most probably the result of seemingly small differences
in the activity profile of these preparations. According to
the literature, both Viscozyme and Energex are characterised by
a very high pectinolytic activity (Brenes et al., 2005; Sun, Tang, &
Powers, 2005;) and similar levels of activities of cellulase, celobiase
and xylanase (Kabel, van der Maarel, Klip, Voragen, & Schols, 2006).
However, Energex L also has a considerable proteolytic activity
(Wikiera, 2004). Some enzymatically extracted pectins are proven
to contain relatively high levels of protein (Panouillé, Thibault, &
Bonnin, 2006; Zykwinska et al., 2008), which may hinder the
access of glycosidases (including poligalacturonases) to PGalA.
Thus, the ability of Energex L to degrade proteins could contribute
to a more effective hydrolysis of PGalA from pectins and apple
pomace, as compared to Viscozyme.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผลและการสนทนา3.1. ไฮโตรไลซ์ของกรด polygalacturonic enzymatically สกัดpectinsGalacturonic กรดออกระหว่าง pomace เพกทินและแอปเปิ้ลไฮโตรไลซ์กล่าว โดย HPLC แบ่งแยกการทำงานได้รับรับในคอลัมน์ HyperCarb (Fig. 1) Galacturonicกรดในตัวอย่างของ pectins enzymatically แยกและแอปเปิ้ล pomace อย่างมีนัยสำคัญขึ้นอยู่กับชนิดของใช้ไฮโตรไลซ์ (ตารางที่ 1) Depolymerisation PGalA มีประสิทธิภาพน้อยที่สุดกล่าวกับ MTFA 2 ที่ยืดไฮโตรไลซ์ C. 100เวลาทำให้เกิดการเพิ่มขึ้นของงานที่ออก อย่างไรก็ตามแม้หลังจาก 4 h ไฮโตรไลซ์ของกรด polygalacturonic ไม่สมบูรณ์โดยสอดคล้องกับผลลัพธ์ของ Emaga, RabetafikaBlecker และ Paquot (2012), ที่สังเกตประสิทธิภาพต่ำเงื่อนไขดังกล่าวในระหว่างไฮโตรไลซ์ mucilage เมล็ดแฟลกซ์นักวิจัยอื่น ๆ ยังแสดงความมั่นคงสูงของ PGalA ในสภาพแวดล้อมของกรด (Garna และ al., 2006 ริม อยู่ เกาะ Lee, &2012 นาที et al., 2011) เพิ่มตามที่แสดงในการศึกษาปัจจุบันอุณหภูมิสูงสุด 120 C ทำให้เกิดการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในอัตราของงานที่ออกจากตัวอย่างทั้งหมด ระดับสูงสุดของกรด galacturonic ถูกวัดหลัง h 2.5 ของไฮโตรไลซ์ด้วย2 เมตร TFA ในค. 120 เปอร์เซ็นต์ของงานที่ได้รับใน Px, Pcelและแอปเปิ้ล pomace มี 61.3, 59.9 และ 40.9 ตามลำดับArnous และ Meyer (2008) รายงาน 45% (cultivar แดงอร่อย)34.8% (ทองอร่อย cultivar) และงานหลังการรักษา 2 hของแอปเปิ้ล peels 2 เมตร TFA ที่ 121 c ระบุว่า pomace ที่ใช้ในการศึกษาปัจจุบันมีส่วนผสมที่ได้จากพันธุ์ต่าง ๆของแอปเปิ้ล นำเสนอข้อมูลอาจถูกพิจารณาว่าคล้ายกันมาก เพิ่มเติมจากไฮโตรไลซ์ผลในของก่อนหน้านี้ออกงาน การเปรียบเทียบของไฮโตรไลซ์เปรี้ยว และวิธีการรวมแสดงโปรแกรมประยุกต์ที่ใช้เอนไซม์depolymerisation PGalA ให้สมบูรณ์ยิ่งกว่าไฮโตรไลซ์ 4 h ที่ค. 100 ในเวลาเดียวกัน ก็มีประสิทธิภาพน้อยกว่ากรด h 2 – 3ไฮโตรไลซ์ 120 C. Garna et al. (2006) รายงานว่าเป็นวิธีดีที่สุดของไฮโตรไลซ์ homogalacturonan เพกทินขั้นตอนสองขั้นตอนเองก็ยังคิดกับกรดแตกออก (0.2 M TFA, 80 C72 h) ตาม ด้วยการรักษาด้วย Viscozyme อย่างไรก็ตาม เช่นการไม่มีวิธีการซับซ้อน pectins ป้ายสีเขียว(Zykwinska, Gaillard, Boiffard, Thibault, & Bonnin, 2009) นอกจากนี้การเตรียม Viscozyme L9 แนะนำดังกล่าวผู้เขียน ปรากฏ ว่าใช้งานน้อยมากต่อpectines enzymatically แยกกว่า multicatalytic Energex L(ตาราง 1) โดยที่ผลของความแตกต่างที่ดูเหมือนเล็ก ๆในโพรไฟล์กิจกรรมของเหล่านี้เตรียม ตามที่รนีวรรณกรรม Viscozyme และ Energexกิจกรรม pectinolytic สูงมาก (Brenes et al., 2005 ดวงอาทิตย์ ถัง และอำนาจ 2005;) และระดับคล้ายกิจกรรม cellulase, celobiaseและไซลาเนส (สาย van der Maarel คลิปผม Voragen, & Schols, 2006)อย่างไรก็ตาม Energex L มีกิจกรรม proteolytic เป็นจำนวนมาก(Wikiera, 2004) มีพิสูจน์ pectins บางแยก enzymaticallyมีโปรตีนค่อนข้างสูงระดับ (Panouillé, Thibault, &Bonnin, 2006 Zykwinska et al., 2008), ซึ่งอาจขัดขวางการการเข้าถึงของ glycosidases (รวมถึง poligalacturonases) กับ PGalAดังนั้น สามารถนำความสามารถของ Energex L การย่อยสลายโปรตีนไปเป็นไฮโตรไลซ์เพิ่มประสิทธิภาพของ PGalA pectins และแอปเปิ้ลpomace เมื่อเทียบกับ Viscozyme

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

และอภิปรายผล
3.1 การย่อยสลายของกรด polygalacturonic ในการสกัดเอนไซม์
เพคติน
กรดกาแลคปล่อยตัวในช่วงเพคตินและแอปเปิ้ลกาก
ย่อยสลายได้โดยวิธี HPLC แยกสมบูรณ์ของ Gala
ได้รับในคอลัมน์ HyperCarb (รูปที่ 1). กาแลค
ปริมาณกรดในตัวอย่างของ pectins สกัดเอนไซม์
และกากแอปเปิ้ลอย่างมีนัยสำคัญขึ้นอยู่กับประเภทของ
การย่อยสลายประยุกต์ (ตารางที่ 1) ที่มีประสิทธิภาพ PGalA depolymerisation น้อย
ที่ได้รับมี 2 MTFA ที่ 100 องศาเซลเซียส ไฮโดรไลซิยืด
เวลาส่งผลในการเพิ่มขึ้นของ Gala ปล่อยออกมา; แต่อย่างไรก็ตาม
แม้หลังจาก 4 ชั่วโมงของกรดไฮโดรไลซิ polygalacturonic ยังไม่เสร็จสมบูรณ์.
ซึ่งสอดคล้องกับผลการ Emaga, Rabetafika,
Blecker และ Paquot (2012) ที่ตั้งข้อสังเกตมีประสิทธิภาพต่ำในเงื่อนไขดังกล่าวในระหว่างการย่อยสลายเมือก flaxseed.
นักวิจัยอื่น ๆ ยังชี้ให้เห็นความมั่นคงสูงของ PGalA ใน
สภาพแวดล้อมที่เป็นกรด (Garna et al, 2006;. ลิม Yoo, เกาะและลี
2012;. Min et al, 2011) ดังแสดงในการศึกษาครั้งนี้เพิ่ม
อุณหภูมิสูงถึง 120 องศาเซลเซียสมีผลในการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญใน
อัตรา Gala ปล่อยออกมาจากกลุ่มตัวอย่างทั้งหมด ระดับสูงสุด
ของกรดกาแลคถูกวัดหลังจาก 2.5 ชั่วโมงของการย่อยสลายด้วย
2 M TFA ที่ 120 องศาเซลเซียส ร้อยละของงานกาล่าที่ได้รับใน Px, Pcel
และกากแอปเปิ้ลเป็นจำนวนเงิน 61.3, 59.9 และ 40.9 ตามลำดับ.
Arnous และเมเยอร์ (2008) รายงาน 45% (พันธุ์สีแดงอร่อย)
และ 34.8% (พันธุ์โกลเด้นอร่อย) Gala หลังจาก 2 ชั่วโมงการรักษา
ของ เปลือกแอปเปิ้ลมี 2 M TFA ที่ 121 องศาเซลเซียส ระบุว่ากากที่ใช้
ในการศึกษาครั้งนี้เป็นส่วนผสมที่ได้รับจากสายพันธุ์ต่างๆ
ของแอปเปิ้ลที่นำเสนอข้อมูลที่อาจมีการพิจารณาที่คล้ายกันมาก นอกจากนี้
การขยายออกของการย่อยสลายผลในการย่อยสลายก่อนหน้านี้
ปล่อยออกมา Gala การเปรียบเทียบการย่อยกรดและ
วิธีการทำงานร่วมกันแสดงให้เห็นว่าการประยุกต์ใช้เอนไซม์เปิดการใช้งาน
ที่สมบูรณ์มากขึ้น PGalA depolymerisation กว่า 4 ชั่วโมงจองจำที่
100 องศาเซลเซียส ในขณะเดียวกันมันก็มีประสิทธิภาพน้อยกว่า 2-3 ชั่วโมงเป็นกรด
ไฮโดรไลซิดำเนินการที่ 120 องศาเซลเซียส Garna และคณะ (2006) รายงานว่า
วิธีที่ดีที่สุดของการย่อยสลายของ homogalacturonan เพกตินเป็น
ขั้นตอนที่สองขั้นตอนรู้ด้วยกรดเจือจาง (0.2 M TFA 80 องศาเซลเซียส,
72 ชั่วโมง) ตามด้วยการรักษาด้วย Viscozyme แต่อย่างไรก็ตามยังมี
วิธีการไม่ได้ที่มีประสิทธิภาพสำหรับสีเขียวที่ซับซ้อนมากขึ้นที่มีข้อความ pectins
(Zykwinska, เกลลาร์, Boiffard, ธีโบลท์และ Bonnin 2009) นอกจากนี้
การเตรียม Viscozyme L9 แนะนำดังกล่าวข้างต้นโดย
ผู้เขียนที่ดูเหมือนจะมากใช้งานน้อยลงต่อ
pectines สกัดเอนไซม์กว่า multicatalytic Energex L
(ตารางที่ 1) นี้เป็นส่วนใหญ่อาจผลของความแตกต่างเล็ก ๆ ที่ดูเหมือนจะ
อยู่ในรายละเอียดกิจกรรมของการเตรียมการเหล่านี้ ตาม
วรรณคดีทั้ง Viscozyme และ Energex มีลักษณะ
กิจกรรม pectinolytic สูงมาก (Brenes et al, 2005;. อาทิตย์รสและ
พลัง 2005) และระดับใกล้เคียงกันของกิจกรรมของเซลลูเลส, celobiase
และไซลาเนส (เบิ้ลทีวีตู้ der Maarel, วีดีโอ, Voragen และ Schols 2006).
อย่างไรก็ตาม Energex ลิตรนอกจากนี้ยังมีกิจกรรมโปรตีนมาก
(Wikiera, 2004) บางสกัดเอนไซม์เพคตินมีการพิสูจน์
เพื่อให้มีระดับที่ค่อนข้างสูงของโปรตีน (Panouillé, ธีโบลท์และ
Bonnin 2006;. Zykwinska et al, 2008) ซึ่งอาจเป็นอุปสรรคต่อ
การเข้าถึงของลูโคซิเด (รวม poligalacturonases) เพื่อ PGalA.
ดังนั้นความสามารถของ Energex L การย่อยสลายโปรตีนจะทำให้เกิด
การย่อยสลายที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นของ PGalA จาก pectins และแอปเปิ้ล
กากเมื่อเทียบกับ Viscozyme

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผลและการอภิปราย
3.1 . การย่อยสลายของกรดใน polygalacturonic สกัด

enzymatically เพคตินเพคติน และกรดกาแลคเปิดตัวในระหว่างการย่อยสลายกาก
แอปเปิ้ลได้ 2 . การแยกสมบูรณ์ของงาน
ได้ใน hypercarb คอลัมน์ ( รูปที่ 1 ) กรดกาแลค

enzymatically สกัดเพกตินในตัวอย่างของและแอปเปิ้ลกากอย่างมีนัยสำคัญขึ้นอยู่กับประเภทของ
การย่อยสลายประยุกต์ ( ตารางที่ 1 ) อย่างน้อยที่มีประสิทธิภาพ pgala depolymerisation
ได้ด้วย 2 MTFA ที่ 100  C ให้ย่อยสลาย
เวลามีผลทำให้มีการเพิ่มขึ้นของงานเปิดตัว อย่างไรก็ตามแม้หลังจากที่ 4 H
การย่อยสลายของกรด polygalacturonic ไม่สมบูรณ์ .
ซึ่งสอดคล้องกับผลของ emaga rabetafika blecker
, , ,และ paquot ( 2012 ) ที่สังเกตประสิทธิภาพต่ำของเงื่อนไขดังกล่าวในระหว่างการเลือกตั้ง . .
นักวิจัยอื่น ๆ มีความมั่นคงสูง ในสภาพแวดล้อมที่เป็นกรด pgala
( garna et al . , 2006 ; ลิม ยูโก &ลี
2012 ; มิน et al . , 2011 ) ตามที่แสดงในการศึกษาการเลี้ยง
อุณหภูมิขึ้นถึง 120  C ส่งผลอย่างมีนัยสำคัญ
อัตรางานออก จากตัวอย่างทั้งหมด ระดับสูงสุด
ของกรดกาแลควัดหลังจาก 2.5 H การย่อยด้วย
2 M ระดับที่ 120  C เปอร์เซ็นต์ของงานที่ได้รับใน PX pcel
และแอปเปิ้ลว่า กากจำนวน 59.9 ร้อยละ , และตามลำดับ .
arnous เมเยอร์ ( 2008 ) รายงานและ 45 % ( พันธุ์สีแดงอร่อย
34.8 ) และ ( พันธุ์โกลเด้นอร่อย )
2 H งานหลังจากรักษาเปลือกแอปเปิ้ลด้วย 2 M กรดไขมันที่ 121  ซีระบุว่ากากใช้
ในการศึกษาเป็นสารผสมที่ได้จากหลากหลายพันธุ์
ของแอปเปิ้ล ที่นำเสนอข้อมูลที่อาจได้รับการพิจารณาที่คล้ายคลึงกันมาก การเพิ่มการย่อยส่งผลให้เกิดการย่อยสลาย

ก่อนหน้านี้เปิดตัวงาน การเปรียบเทียบการย่อยสลายของกรดและ
วิธีรวมแสดงให้เห็นว่าการประยุกต์ใช้เอนไซม์ใช้
ที่สมบูรณ์มากขึ้น pgala depolymerisation กว่า 4 ชั่วโมง ระยะเวลาที่ 
100 C . ในขณะเดียวกัน , มันมีประสิทธิภาพน้อยกว่า 2 – 3 ชั่วโมง ระยะเวลาดำเนินการ 120  เปรี้ยว
C . garna et al . ( 2006 ) รายงานว่า
วิธีที่ดีที่สุดของการย่อยสลายของเพคติน homogalacturonan เป็น
2 ขั้นตอนตระหนักกับกรดเจือจาง ( 0.2 เมตร ระดับ 80  C
72 ชั่วโมง ) ตามด้วยการรักษาด้วย viscozyme . อย่างไรก็ตาม เช่น
วิธีการที่ไม่มีประสิทธิภาพเพื่อที่ซับซ้อนมากขึ้นที่มีข้อความสีเขียว
( zykwinska Gaillard , เพคติน , boiffard ติบอลต์& bonnin , 2009 ) นอกจากนี้ การเตรียม viscozyme L9

แนะนำโดยผู้เขียนดังกล่าว ปรากฏเป็น น้อยมาก ใช้งานต่อได้ enzymatically
pectines กว่า multicatalytic energex L
( ตารางที่ 1 ) นี้เป็นไปได้มากที่สุดคือผล
ความแตกต่างดูเหมือนเล็กในกิจกรรมโปรไฟล์ของการเตรียมเหล่านี้ ตามวรรณคดีทั้ง viscozyme
,
energex และมีลักษณะสูงมากเพกทิโนไลติกกิจกรรม ( brenes et al . , 2005 ; ดวงอาทิตย์ตั้ง&
พลัง , 2005 ; ) และระดับที่คล้ายกันของกิจกรรมของเอนไซม์เซลลูเลส และ celobiase
( Kabel แวน เดอ maarel Klip voragen &โรงเรียน , , , , 2006 ) .
อย่างไรก็ตามenergex L ยังมี
กิจกรรมจำเพาะมาก ( wikiera , 2004 ) บาง enzymatically เพกทินสกัดพิสูจน์
มีระดับที่ค่อนข้างสูงของโปรตีน ( panouill é ติบอลต์&
, bonnin , 2006 ; zykwinska et al . , 2008 ) ซึ่งอาจขัดขวางการเข้าถึง glycosidases
( รวมถึง poligalacturonases ) pgala .
ดังนั้นความสามารถของ energex ผมย่อยสลายโปรตีนสามารถมีส่วนร่วม
การไฮโดรไลซิสมีประสิทธิภาพมากขึ้นของ pgala จากเพคตินและแอปเปิ้ล
กาก เทียบกับ viscozyme .