2.5.5. Analysis of fatty acids and

2.5.5. Analysis of fatty acids and esters
Fatty acids and esters were determined by GC using ASTM
D6584 and Shimadzu GC-2014 gas chromatograph with a split/
splitless injector equipped with a flame ionization detector (FID).
The identification of the profiles of methyl esters of fatty acids from
microalgae was performed in a gas chromatograph, Shimadzu GC2014
coupled to a flame ionization detector (FID) using a split and
a Carbowax 20 M capillary column (30 m length, internal diameter
of 0.32 mm and film thickness of 0.25
lm). The operating parameters
for the GC were as follows: 1 L injection volume, split ratio
50:1, injector and detector temperatures were 250 C and 280 C,
respectively, carrier gas helium (99.95%), temperature programme:
50 C (6 min) 5 C/min – 150 C (1 min) – 200 C/min – 5 C/min –
240 C (5 min). The injections were performed in duplicate.
The methyl esters of fatty acids were identified using FAME
C8:0–C24:0 standard mixture. The quantification was made using
methyl heptadecanoate as an internal standard with a concentration
of 1.0 mg/mL in heptane.
In addition, another method was applied for analyzing FAMEs
as follows. The sample was diluted in dodecane (Sigma Aldrich,
P99%) with the approximated ratio of 1–10. Thereafter it was silylated
with the following procedure: 100
ll of sample was diluted
in 1 ml of pyridine (Sigma Aldrich, P99%). Subsequently 100
ll
of eicosane (Acros Organics, 99%) was added as an internal standard
together with 100
ll of BSTFA (Acros Organics, P98%) and
50
ll of TMCS (Sigma Aldrich, P98%). Silylation of samples was
performed in an oven at 70 C for an hour before they were injected
in the GC. The samples were analyzed with a gas chromatograph
equipped with a capillary column (ZB-5HT Inferno, length 30 m,
internal diameter 0.32 mm and film thickness 0.25
lm. The detector
and injector temperatures were both 300 C.
The free fatty acids obtained via extraction of fresh algae using
chloroform–methanol in ratio of 2:1 under magnetic stirring for
two hours at 60 C were titrated with NaOH as follows: the sample,
about 1 g, was combined with 25 ml ethanol and 1 ml of
phenolphthalein.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5.5 การวิเคราะห์กรดไขมันและ estersกรดไขมันและ esters ถูกกำหนด โดย GC ที่ใช้มาตรฐาน ASTMChromatograph แก๊ส D6584 และ Shimadzu GC-2557 โดยแบ่งเป็น /พร้อมตรวจจับการ ionization flame (สลัก) หัวฉีด splitlessIdentification ของ profiles ของ methyl esters ของกรดไขมันจากทำ microalgae ในแบบแก๊ส chromatograph, Shimadzu GC2014ควบคู่การเป็น flame ionization จับ (FID) โดยใช้การแบ่ง และCarbowax 20 M รูพรุนคอลัมน์ (ความยาว 30 เมตร เส้นผ่าศูนย์กลางภายในของความหนา 0.32 มม.และ film ของ 0.25lm) . พารามิเตอร์การปฏิบัติสำหรับ GC ถูกเป็นดังนี้: ปริมาณการฉีด 1 L แบ่งอัตราส่วน50:1 หัวฉีด และเครื่องตรวจจับอุณหภูมิ 250 C และ 280 Cลำดับ ผู้ขนส่งก๊าซฮีเลียม (99.95%), อุณหภูมิโปรแกรม:50 C (6 นาที) 5 C/min – 150 C (1 นาที) – 200 C/นาที-5 C/นาที-240 C (5 นาที) ฉีดที่ถูกทำสำเนาEsters methyl กรดไขมันถูกใช้ชื่อเสียง identifiedC8:0 – C24:0 ส่วนผสมมาตรฐาน Quantification ที่จะใช้heptadecanoate methyl เป็นมาตรฐานภายในที่มีความเข้มข้นที่ของ 1.0 mg/mL ใน heptaneนอกจากนี้ ใช้วิธีอื่นสำหรับวิเคราะห์ FAMEsดังนี้ ตัวอย่างถูกทำให้เจือจางใน dodecane (Aldrich ซิกP99%) มีอัตราส่วนดง 1 – 10 หลังจากนั้นก็ silylatedมีขั้นตอนดังต่อไปนี้: 100จะของตัวอย่างถูกทำให้เจือจางใน 1 มล.ของ pyridine (Aldrich ซิก P99%) ต่อ 100llของ eicosane (Acros Organics, 99%) มีเพิ่มเป็นการภายในกับ 100จะ BSTFA (Acros Organics, P98%) และ50จะของ TMCS (Aldrich ซิก P98%) Silylation ตัวอย่างถูกดำเนินการในเตาอบที่ 70 C ชั่วโมงก่อนที่จะถูกฉีดใน GC ตัวอย่างได้วิเคราะห์ ด้วย chromatograph ก๊าซพร้อมคอลัมน์เส้นเลือดฝอย (ZB 5HT นรก ความยาว 30 เมตรเส้นผ่าศูนย์กลางภายใน film และ 0.32 มม.ความหนา 0.25lm. เครื่องตรวจจับและอัดอุณหภูมิได้ทั้งเซลเซียส 300กรดไขมันอิสระที่ได้รับผ่านการสกัดโดยใช้สาหร่ายสดคลอโรฟอร์มเมทานอลในอัตราส่วน 2:1 ภายใต้แม่เหล็กกวนสำหรับสองชั่วโมงที่ 60 C ถูก titrated กับ NaOH เป็นดังนี้: ตัวอย่างประมาณ 1 g ถูกรวมกับเอทานอล 25 ml 1 ml ของphenolphthalein

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5.5 การวิเคราะห์ของกรดไขมันและเอสเทอ
กรดไขมันและเอสเทอได้รับการพิจารณาโดย GC โดยใช้มาตรฐาน ASTM
D6584 และ Shimadzu ก๊าซ Chromatograph GC-2014 กับแยก /
หัวฉีด Splitless การติดตั้งเครื่องตรวจจับไอออนไนซ์ AME ชั้น (FID).
ไอออนบวกสายระบุของโปรไฟ les ของเมทิลเอสเตอร์ของไขมัน กรดจาก
สาหร่ายทะเลขนาดเล็กได้รับการดำเนินการใน chromatograph ก๊าซ Shimadzu GC2014
คู่กับเครื่องตรวจจับไอออนไนซ์ชั้น AME (FID) โดยใช้แยกและ
Carbowax 20 มคอลัมน์ฝอย (30 เมตรความยาวเส้นผ่านศูนย์กลางภายใน
0.32 มิลลิเมตรและความหนาของสาย LM 0.25
LM) พารามิเตอร์ปฏิบัติการ
สำหรับ GC มีดังนี้ปริมาณการฉีด 1 ลิตรอัตราส่วนแบ่ง
50: 1, หัวฉีดและอุณหภูมิที่ตรวจจับได้ 250 ซีและ 280 ซี?
ตามลำดับฮีเลียมก๊าซ (99.95%) โปรแกรมอุณหภูมิ:
50 องศาเซลเซียส (6 นาที) 5 C / นาที - 150 C (1 นาที) - 200 C / นาที - 5 C / นาที? -
? 240 C (5 นาที) ฉีดได้ดำเนินการในที่ซ้ำกัน.
เมทิลเอสเตอร์ของกรดไขมันเป็นเอ็ดสายระบุโดยใช้ FAME
C8: 0-C24: 0 ส่วนผสมมาตรฐาน ไอออนบวกไฟ quanti ถูกสร้างขึ้นมาโดยใช้
heptadecanoate เมธิลเป็นมาตรฐานภายในที่มีความเข้มข้น
1.0 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรในเฮปเทน.
นอกจากนี้ยังมีวิธีอื่นที่ใช้ในการวิเคราะห์ FAMEs
ดังต่อไปนี้ กลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการปรับลดใน dodecane (ซิกม่าดิช,
P99%) โดยมีอัตราส่วนประมาณ 1-10 หลังจากนั้นมันก็ silylated
กับขั้นตอนต่อไปนี้: 100
LL ของกลุ่มตัวอย่างถูกเจือจาง
1 มิลลิลิตรของไพริดีน (ซิกม่าดิช, P99%) ต่อมา 100
LL
ของ eicosane (Organics Acros 99%) ถูกบันทึกเป็นมาตรฐานภายใน
ร่วมกับ 100
LL ของ BSTFA (Organics Acros, P98%) และ
50
ของ LL TMCs (ซิกม่าดิช, P98%) Silylation ของกลุ่มตัวอย่างได้รับการ
ดำเนินการในเตาอบที่อุณหภูมิ 70 องศาเซลเซียสเป็นเวลาหนึ่งชั่วโมงก่อนที่พวกเขาได้รับการฉีด
ในประชาคมโลก ตัวอย่างที่ได้มาวิเคราะห์ด้วยแก๊ส
พร้อมกับคอลัมน์ของเส้นเลือดฝอย (ZB-5HT นรก, ความยาว 30 เมตร
เส้นผ่าศูนย์กลาง 0.32 มิลลิเมตรและสายหนา LM 0.25
LM. ตรวจจับ
และอุณหภูมิหัวฉีดทั้งสอง 300 องศาเซลเซียส.
กรดไขมันอิสระได้รับผ่านทาง การสกัดของสาหร่ายสดโดยใช้
คลอโรฟอร์มเมทานอลในอัตราส่วน 2: 1 ภายใต้กวนแม่เหล็ก
? สองชั่วโมงที่ 60 C ได้รับการปรับขนาดด้วย NaOH ดังนี้ตัวอย่าง
ประมาณ 1 กรัมรวมกับเอทานอล 25 มล. และ 1 มิลลิลิตร
phenolphthalein

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5.5 . การวิเคราะห์กรดไขมันและเอสเทอร์
กรดไขมันและเอสเทอร์กำหนดโดย GC ใช้ d6584 ASTM และก๊าซโครมาโตกราฟกับ Shimadzu gc-2014
/
splitless แยกหัวฉีดพร้อมflชื่อไนเซชั่นตรวจจับ ( FID )
identi จึงไอออนบวกของ Pro จึงเลสของเมทิลเอสเทอร์ของกรดไขมันจาก
สาหร่ายขนาดเล็กในการปฏิบัติแก๊สโครมาโตกราฟ Shimadzu gc2014
,คู่กับflชื่อไนเซชั่นตรวจจับ ( FID ) การแยกและการ carbowax 20 M C คอลัมน์ ( ความยาว 30 เมตร เส้นผ่าศูนย์กลางภายใน
0.32 มม. และความหนา 0.25 จึง LM
อิม ) พารามิเตอร์ปฏิบัติการ
สำหรับ GC มีดังนี้ ปริมาณการฉีด 1 ลิตรอัตราส่วน 50 : 1 หัวฉีดแยก
, และเครื่องตรวจจับอุณหภูมิ 250  C 280  C ,
) , ผู้ให้บริการก๊าซฮีเลี่ยม ( 99.95% ) โครงการ :
, อุณหภูมิ50  C ( 6 นาที ) 5  องศาเซลเซียส / นาที– 150  C ( 1 นาที )  – 200 องศาเซลเซียส / นาที– 5  องศาเซลเซียส / นาที )
 240 C ( 5 นาที ) คือ การฉีดซ้ำ
เมทิลเอสเทอร์ของกรดไขมันเป็น identi จึงเอ็ดใช้ชื่อเสียง
c8:0 – c24:0 มาตรฐานผสม การถ่ายทอดการทำการไฟฟ้าใช้
เมทิล heptadecanoate เป็นมาตรฐานภายในอย่างใจจดจ่อ
1.0 มก. / มล. ในเฮปเทน .
นอกจากนี้อีกวิธีหนึ่งคือใช้สำหรับวิเคราะห์สาร
ดังนี้ ตัวอย่างที่เจือจางในโดดีเคน ( ซิกม่า Aldrich
p99 % ) กับโดยประมาณอัตราส่วน 1 – 10 หลังจากนั้นมันก็ silylated
กับขั้นตอนต่อไปนี้ : 100

ll ตัวอย่างเจือจางใน 1 มิลลิลิตรของไพริดีน ( ซิกม่า Aldrich p99 % ) ต่อมา 100
ll
ของ eicosane ( acros Organics , 99% ) ก็เพิ่มเป็น 100

พร้อมกับภายในมาตรฐานจะ bstfa ( acros สารอินทรีย์ , p98

50 % ) และจะ tmcs ( ซิกม่า Aldrich p98 % ) ซิลิเวชันของจำนวน
แสดงในเตาอบที่อุณหภูมิ 70 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ก่อนที่พวกเขา  ฉีด
ใน GC . ตัวอย่างวิเคราะห์ด้วยแก๊สโครมาโตกราฟ
พร้อมกับแคพิลลารีคอลัมน์ ( zb-5ht นรกความยาว 30 M ,
เส้นผ่าศูนย์กลางภายใน 0.32 มม. และความหนา 0.25
จึงอิมอิม เครื่องตรวจจับ
และอุณหภูมิหัวฉีดทั้งคู่ 300  C .
กรดไขมันอิสระได้ผ่านการสกัดสาหร่ายสดที่ใช้คลอโรฟอร์มและเมทานอล
ในอัตราส่วน 2 : 1 ภายใต้สนามแม่เหล็กกวนสำหรับ
สองชั่วโมงที่ 60  C pH ด้วย NaOH ดังนี้ ตัวอย่าง ,
1 g , รวมกับ 25 มิลลิลิตรเอทานอล 1 มิลลิลิตร
น้อยหน้า .