Results and discussion Influence of

Results and discussion
Influence of co-cultivation periods for transformation of garlic calluses
We had previously developed a highly efficient regen- eration of the apical from calluses(Hasegawa et al. 1996). With this regeneration system, we obtained an average regeneration frequency of 70%. In studying various garlic we observed that the culture periods and temperature of co-cultivation were important factors. The periods of co-cultivation dif- fered according to plant species in the literature. Longer periods of co-cultivation seem effective for efficient transfer of the Ti plasmid to plant cells. In citrange explants, the numbers of spots stained with GUS increased sharply from days 1 to 5 Cervera al. Cao that low effi ciency of transformation in earlier work on et(James and Dandekar 1991) was due to an insufficient length of co-cultivation, since a prolonged period of co-cultivation from 2 to 4 days increased GUS expres sion by almost 100-fold(De Bondt et al. 1994)However, it was more difficult to eliminate Agro- bacterium after longer periods of co-cultivation. Cer vera et al. (1998) reported that the 5-day culture period resulted in overgrowth of Agrobacterium and a subsequent decrease in the frequency of transformed shoots, although 5-day co-cultivation was the most effective for increasing the frequency of tran- sient GUS expression in citrange explants. Therefore, the period of co-cultivation should be optimized. We investigated the effect of varying the periods of co-cul- tivation with transient expression of the uid A gene. Co-cultivation for 3 days showed much higher GUS expression compared with 1- or 2-day co-cultivations(Fig. 1). However, transient GUS exprssion did not vary significantly over 3- to 6-day co-cultivation. Agro bacterium could be substantially eliminated from the co-culture medium of the 3-day co-cultivation in garlic calluses. Thus, we used a 3-day co-cultivation rou tinely
Influence of temperature on the transformation of garlic calluses Dillen et al. (1997) indicated that temperature plays an important role in transformation with A. tumefa- ciens. In their results, the best transformation effi- ciency was obtained at 22 oC in both Phaseolus acuti- folius callus and tobacco leaves, irrespective of the type of helper plasmids. Although 25 oC is commonly

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผลและการอภิปราย อิทธิพลของระยะเวลาเพาะปลูกร่วมสำหรับการเปลี่ยนแปลงของตาปลากระเทียมก่อนหน้านี้เราได้พัฒนาขึ้นมีประสิทธิภาพอัตราฟื้นฟู-eration ของ apical จากตาปลา (อดีต et al. 1996) มีระบบการฟื้นฟูนี้ เรารับความถี่ฟื้นฟูเฉลี่ย 70% ในการศึกษาต่าง ๆ กระเทียม เราสังเกตที่วัฒนธรรมรอบระยะเวลา และอุณหภูมิการเพาะปลูกร่วมเป็นปัจจัยสำคัญ ระยะเวลาการเพาะปลูกร่วม dif fered ตามชนิดพืชในวรรณคดี ระยะเวลานานร่วมปลูกดูเหมือนมีประสิทธิภาพสำหรับการ Ti plasmid โอนมีประสิทธิภาพเซลล์พืช ใน citrange เฌล หมายเลขของจุดที่ย้อม ด้วยกัสเพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็วจาก 1 ถึง 5 Cervera al. Cao ที่ต่ำ effi ไฟฟ้าทั้งของการเปลี่ยนแปลงในงานร้อยเอ็ด (เจมส์และ Dandekar 1991) ก่อนหน้านี้ ได้เนื่องจากมีความยาวไม่เพียงพอของการเพาะปลูกร่วม เนื่องจากเป็นเวลานานร่วมปลูกจาก 2 เป็น 4 วันเพิ่ม GUS นิยมของเหล่า sion โดยเกือบ 100-fold(De Bondt et al. 1994) อย่างไรก็ตาม มันเป็นยากต่อการกำจัดแบคทีเรียที่เกษตรหลังจากระยะเวลานานของการเพาะปลูกร่วมกัน Cer จระเข้ et al. (1998) รายงานว่า ระยะเวลา 5 วันวัฒนธรรมส่งผลให้ overgrowth ของอโกรแบคทีเรียมและลดลงตามมาในความถี่ของการแปรรูปหน่อไม้ แม้ว่าการเพาะปลูกร่วม 5 วันมากที่สุดมีประสิทธิภาพสำหรับการเพิ่มความถี่ของทราน sient กัสนิพจน์ใน citrange explants ดังนั้น ควรปรับระยะเวลาของการเพาะปลูกร่วม เราตรวจสอบผลของระยะ co-cul-tivation กับนิพจน์ชั่วคราวของ uid ยีนที่แตกต่างกัน ร่วมเพาะ 3 วันแสดงนิพจน์กัสมากสูงขึ้นเมื่อเทียบกับ co-cultivations(Fig. 1) 1 หรือ 2 วัน อย่างไรก็ตาม exprssion กัสชั่วคราวได้ไม่มากมากกว่า 3-6-วันร่วมปลูกแตกต่างกันไป อะโกรแบคทีเรียอาจจะตัดออกจากสื่อวัฒนธรรมร่วมของการเพาะปลูกร่วม 3 วันในยากระเทียมมาก ดังนั้น เราใช้หรูการเพาะปลูกร่วม 3 วัน tinelyอิทธิพลของอุณหภูมิในการเปลี่ยนแปลงของตาปลากระเทียม Dillen et al. (1997) ระบุว่า อุณหภูมิมีบทบาทสำคัญในการเปลี่ยนแปลงกับ A. tumefa-ciens ในผล การเปลี่ยนแปลงที่ดีที่สุด effi-ไฟฟ้าได้รับที่ 22 oC ทั้งถั่ว acuti folius แคลลัสและยาสูบใบ โดยไม่คำนึงถึงชนิดของ plasmids ผู้ช่วย แม้ว่าบ่อย 25 oC

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผลการค้นหาและการอภิปราย
อิทธิพลของระยะเวลาร่วมการเพาะปลูกสำหรับการเปลี่ยนแปลงของแคลลัสกระเทียม
เราได้รับการพัฒนาก่อนหน้านี้ eration regen- มีประสิทธิภาพสูงของยอดจากแคลลัส (เซกาวา et al. 1996) ด้วยระบบการฟื้นฟูนี้เราได้รับการฟื้นฟูความถี่เฉลี่ย 70% ในการศึกษากระเทียมต่างๆที่เราตั้งข้อสังเกตว่างวดวัฒนธรรมและอุณหภูมิของผู้ร่วมการเพาะปลูกเป็นปัจจัยสำคัญ ระยะเวลาของการเพาะปลูกร่วมต่าง fered ตามชนิดของพืชในวรรณคดี เป็นเวลานานร่วมปลูกดูเหมือนมีประสิทธิภาพสำหรับการถ่ายโอนที่มีประสิทธิภาพของพลาสมิด Ti ไปยังเซลล์พืช ในชิ้น citrange ตัวเลขของจุดที่ย้อมด้วยสี GUS เพิ่มขึ้นอย่างมากจากวันที่ 1 ถึง 5 Cervera อัล เฉาที่ ciency Effi ต่ำของการเปลี่ยนแปลงในการทำงานก่อนหน้านี้เมื่อเอต (เจมส์และ Dandekar 1991) เป็นผลมาจากความยาวไม่เพียงพอของผู้ร่วมการเพาะปลูกเนื่องจากเป็นระยะเวลานานร่วมปลูก 2-4 วันเพิ่มขึ้น GUS Expres ไซออนโดยเกือบ 100 พับ (เดอ Bondt et al. 1994) แต่มันเป็นเรื่องที่ยากมากที่จะกำจัดแบคทีเรียเกษตรหลังจากระยะเวลานานของผู้ร่วมการเพาะปลูก Cer หางจระเข้, et al (1998) รายงานว่าระยะเวลาการเลี้ยง 5 วันส่งผลให้ overgrowth ของอะโกรแบคทีเรียและลดลงตามมาในความถี่ของหน่อเปลี่ยนแม้ว่า 5 วันร่วมการเพาะปลูกเป็นที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดสำหรับการเพิ่มความถี่ของการแสดงออก tran- GUS sient ใน citrange ชิ้น ดังนั้นระยะเวลาของการร่วมปลูกควรจะเพิ่มประสิทธิภาพ เราตรวจสอบผลกระทบของการเปลี่ยนแปลงระยะเวลาของการ tivation ร่วม cul- กับการแสดงออกชั่วคราวของ UID เอยีน ร่วมปลูกเป็นเวลา 3 วันแสดงให้เห็นว่าการแสดงออก GUS สูงขึ้นมากเมื่อเทียบกับ 1 หรือ 2 วันร่วมปลูก (รูปที่ 1). อย่างไรก็ตาม exprssion GUS ชั่วคราวไม่ได้แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญในช่วง 3- 6 วันร่วมการเพาะปลูก เกษตรแบคทีเรียอาจจะตัดออกอย่างมากจากสื่อร่วมวัฒนธรรมของ 3 วันร่วมในการเพาะปลูกกระเทียมแคลลัส ดังนั้นเราจึงใช้เวลา 3 วันร่วมปลูก Rou tinely
อิทธิพลของอุณหภูมิที่มีต่อการเปลี่ยนแปลงของแคลลัสกระเทียม Dillen et al, (1997) ชี้ให้เห็นว่าอุณหภูมิมีบทบาทสำคัญในการเปลี่ยนแปลงกับเอ tumefa- ciens ในผลของพวกเขาที่ดีที่สุด ciency เปลี่ยนแปลงประสิทธิภาพการได้รับวันที่ 22 องศาทั้งใน Phaseolus acuti- folius แคลลัสและยาสูบใบโดยไม่คำนึงถึงประเภทของพลาสมิดผู้ช่วย แม้ว่า 25 องศาเซลเซียสเป็นปกติ