2. Materials and methods
2.1. Rice seeds
The commercially available mature rice used in this study was from black and red rices grown in different districts of Japan during the summer of 2008. These rices were selected for uniformity, based on seed weights of 54.5–55.0 mg for black and 63.8–64.9 mg for red. The rices were hand-selected to eliminate those that were cracked or otherwise damaged. Rices of each cultivar were packed in polyethylene bags under nitrogen gas and held at −20 °C before further analysis.
2.2. Reagents and standards
All chemicals and solvents used were of analytical grade (Nacalai Tesque, Kyoto, Japan), but diethyl ether was further purified to remove peroxides. TLC plates (silica-gel 60 G, 20 × 20 cm, 0.25 mm thickness) were obtained from Merck (Darmstadt, Germany). Vitamin E homologues (α, β, γ and δ) were acquired from Sigma–Aldrich Co. (St. Louis, MO, USA). All tocopherols were of the D-form (RRR-), and their purities were better than 98.5% as found by HPLC using 2,2,5,7,8-pentamethyl-6-hydroxychroman as the internal standard and described in a later section. The TLC standard mixture, containing monoacylglycerols (MAG), diacylglycerols (DAG), free fatty acids (FFA), triacylglycerols (TAG), steryl esters (SE) and hydrocarbons (HC), was purchased from Nacalai Tesque (Kyoto, Japan). Standard TAG (glycerol trimyristate, glycerol tripalmitate, glycerol tristearate, glycerol trioleate, glycerol trilinoleate and glycerol trilinolenate) were procured from Sigma–Aldrich Co. (St. Louis, MO, USA).
FA methyl ester (FAME) standards (F & OR mixture #3) were obtained from Altech-Applied Science (State College, PA, USA). Methyl pentadecanoate (C15:0, 100 mg; Merck, Darmstadt, Germany) was dissolved in n-hexane (20 ml) and used as the internal standard. Boron trifluoride (BF3) in methanol (14%; Wako Pure Chemical Inc., Osaka, Japan) was used to prepare FAME.
2. วัสดุและวิธีการ2.1. ข้าวเมล็ดข้าวผู้ใหญ่จำหน่ายทั่วไปที่ใช้ในการศึกษานี้มาจาก rices สีดำ และสีแดงที่ปลูกในอำเภอต่าง ๆ ของญี่ปุ่นในช่วงฤดูร้อน 2008 Rices เหล่านี้ถูกเลือกสำหรับความสม่ำเสมอ อิงเมล็ดน้ำหนัก 54.5-55.0 มิลลิกรัมสำหรับสีดำและ 63.8 – 64.9 มิลลิกรัมสำหรับสีแดง Rices ถูกเลือกเพื่อกำจัดผู้ที่แตก หรือเสีย หาย Rices ของแต่ละพันธุ์มีบรรจุในถุงโพลีเอภายใต้ก๊าซไนโตรเจน และจัดขึ้นที่ −20 ° C ก่อนวิเคราะห์เพิ่มเติม2.2. reagents และมาตรฐานสารเคมีและตัวทำละลายที่ใช้ทั้งหมดถูกวิเคราะห์เกรด (Nacalai Tesque เกียวโต ญี่ปุ่น), แต่เพิ่มเติม diethyl อีเทอร์บริสุทธิ์เพื่อเอาเปอร์ออกไซด์ แผ่น TLC (ซิลิก้าเจล 60 กรัม 20 × 20 ซม. หนา 0.25 มม.) ได้รับจากเมอร์ค (ดาร์มสตัดท์ เยอรมัน) วิตามินอี homologues (α β γ และδ) ได้รับมาจาก บริษัทซิกม่า-Aldrich (เซนต์หลุยส์ MO สหรัฐอเมริกา) Tocopherols ทั้งหมดของฟอร์ม D (RRR-), และ purities ตนมีดีกว่า 98.5% เป็นโดย HPLC ที่ใช้ 2,2,5,7,8-pentamethyl-6-hydroxychroman เป็นการภายในมาตรฐาน และอธิบายไว้ในส่วนหลัง TLC มาตรฐานผสม ที่ประกอบด้วย monoacylglycerols (MAG), diacylglycerols (DAG), กรดไขมันอิสระ (FFA), triacylglycerols (แท็ก), เอสเท steryl (SE) และไฮโดรคาร์บอน (HC), ซื้อจาก Nacalai Tesque (เกียวโต ญี่ปุ่น) แท็กมาตรฐาน (กลีเซอร trimyristate กลีเซอร tripalmitate กลีเซอร tristearate กลีเซอร trioleate กลีเซอร trilinoleate และกลีเซอร trilinolenate) ถูกจัดหาจาก บริษัทซิกม่า-Aldrich (เซนต์หลุยส์ MO สหรัฐอเมริกา)FA เมทิลเอสเทอร์ (ชื่อเสียง) มาตรฐาน (F & ส่วนผสมหรือ #3) ได้รับจาก Altech-Applied วิทยาศาสตร์ (วิทยาลัยรัฐ PA สหรัฐอเมริกา) Pentadecanoate เมธิล (C15:0, 100 มก. ละลายในเอ็นเฮกเซน (20 มิลลิลิตร) และใช้เป็นมาตรฐานภายในเมอร์ค ดาร์มสตัดท์ เยอรมนี) โบรอน trifluoride (BF3) ในเมทานอล (14% Wako เพียวเคมี Inc. โอซาก้า ญี่ปุ่น) ถูกใช้เพื่อจัดเตรียมชื่อเสียง
การแปล กรุณารอสักครู่..

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 เมล็ดข้าวข้าวผู้ใหญ่ใช้ได้ในเชิงพาณิชย์ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้มาจากข้าวสีดำและสีแดงที่ปลูกในเขตต่าง ๆ ของญี่ปุ่นในช่วงฤดูร้อนของปี 2008 ข้าวเหล่านี้ได้รับการคัดเลือกสม่ำเสมอขึ้นอยู่กับน้ำหนักของเมล็ด 54.5-55.0 มิลลิกรัมสำหรับสีดำและ 63.8- 64.9 มก. สีแดง ข้าวถูกมือที่เลือกที่จะกำจัดผู้ที่ถูกแตกหรือเกิดความเสียหายเป็นอย่างอื่น ข้าวแต่ละพันธุ์ได้รับการบรรจุในถุงพลาสติกชนิดภายใต้ก๊าซไนโตรเจนและจัดขึ้นที่ -20 ° C ก่อนที่จะวิเคราะห์ต่อไป. 2.2 รีเอเจนต์และมาตรฐานสารเคมีและตัวทำละลายที่ใช้เป็นของเกรดวิเคราะห์ (Nacalai Tesque เกียวโตประเทศญี่ปุ่น) แต่อีเทอร์เป็นอีกบริสุทธิ์เพื่อลบเปอร์ออกไซด์ TLC แผ่น (ซิลิกาเจล 60 G, 20 × 20 ซม., 0.25 มมหนา) ที่ได้รับจากเมอร์ค (ดาร์มสตัด, เยอรมนี) homologues วิตามินอี (α, β, γและδ) ได้มาจาก Sigma-Aldrich จำกัด ( St. Louis, มิสซูรี, สหรัฐอเมริกา) tocopherols ทุกคนของ D-Form (RRR-) และ purities ของพวกเขาได้ดีกว่า 98.5% ขณะที่พบได้โดยการใช้วิธี HPLC-2,2,5,7,8 pentamethyl-6-hydroxychroman เป็นมาตรฐานภายในและอธิบายไว้ในภายหลัง มาตรา. ส่วนผสมมาตรฐาน TLC มี monoacylglycerols (MAG) diacylglycerols (DAG), กรดไขมันอิสระ (FFA) triacylglycerols (แท็ก), เอสเทอ steryl (SE) และไฮโดรคาร์บอน (HC) ซื้อมาจาก Nacalai Tesque (เกียวโตญี่ปุ่น) TAG มาตรฐาน (กลีเซอรอล trimyristate กลีเซอรอล tripalmitate กลีเซอรอล tristearate กลีเซอรอล trioleate, trilinoleate กลีเซอรอลและกลีเซอรอล trilinolenate) ได้รับการจัดหาจาก Sigma-Aldrich จำกัด ( St. Louis, มิสซูรี, สหรัฐอเมริกา). เอฟเอเมทิลเอสเตอร์ (FAME) มาตรฐาน (F & หรือ ส่วนผสม # 3) ที่ได้รับจาก Altech-วิทยาศาสตร์ประยุกต์ (วิทยาลัยรัฐ, PA, สหรัฐอเมริกา) Methyl pentadecanoate (C15: 0, 100 มิลลิกรัม; เมอร์ค, ดาร์มสตัด, เยอรมนี) ถูกละลายใน N-เฮกเซน (20 มล.) และใช้เป็นมาตรฐานภายใน โบรอน trifluoride (BF3) ในเมทานอล (14%; Wako เพียวเคมีอิงค์โอซาก้าประเทศญี่ปุ่น) ถูกใช้ในการเตรียมความพร้อม FAME
การแปล กรุณารอสักครู่..

2 . วัสดุและวิธีการ2.1 . เมล็ดพันธุ์ข้าวการใช้ในเชิงพาณิชย์เป็นข้าวที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ คือ สีดำ และสีแดงจากข้าวที่ปลูกในเขตอื่นของญี่ปุ่นในช่วงฤดูร้อนของปี 2008 ข้าวเหล่านี้เลือกเสมอ ขึ้นอยู่กับน้ำหนักเมล็ดจาก– 55.0 มิลลิกรัมสำหรับดำและ 8 ตามลำดับและระดับสีแดง ส่วนข้าวที่เป็นมือเลือกที่จะกำจัดผู้ที่แตกหรือเสียหายหรือไม่ ข้าวแต่ละพันธุ์ถูกบรรจุในถุงโพลีเอทธิลีนภายใต้ก๊าซไนโตรเจนและจัดขึ้นที่ 20 °− C ก่อนการวิเคราะห์ต่อไป2.2 . สารเคมี และ มาตรฐานทั้งหมดเคมีภัณฑ์และตัวทำละลายที่ใช้คือของอิตเทอร์เบียม ( nacalai tesque , เกียวโต , ญี่ปุ่น ) แต่อีเทอร์ยังบริสุทธิ์เพื่อลบ peroxides . แผ่น TLC ซิลิกาเจล 60 กรัม , 20 × 20 ซม. ความหนา 0.25 มม. ) ที่ได้รับจากเมอร์ค ( ดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี ) วิตามินอีใน ( αบีตาγ , และ , δ ) ได้มาจากซิกม่า – อัลดริช จำกัด ( St . Louis , MO , USA ) ทั้งหมดของโทโคฟีรอล d-form ( แง่ง ) และความบริสุทธิ์ของพวกเขาดีกว่าที่ 98.5 % เท่าที่พบโดย HPLC โดยใช้ 2,2,5,7,8-pentamethyl-6-hydroxychroman เป็นมาตรฐานภายในและอธิบายในส่วนในภายหลัง โดย TLC มาตรฐานส่วนผสมที่มี monoacylglycerols ( แม็ก ) , diacylglycerols ( วันที่ ) , กรดไขมันอิสระ ( FFA ) , ไตรกลีเซอรอล ( แท็ก ) , steryl เอสเทอร์ ( SE ) และไฮโดรคาร์บอน ( HC ) ซื้อมาจาก nacalai tesque ( โตเกียว , ญี่ปุ่น ) แท็กมาตรฐาน ( trimyristate กลีเซอรีนกลีเซอรอล tripalmitate กลีเซอรอล tristearate กลีเซอรอล trioleate กลีเซอรอล trilinoleate และกลีเซอรอล trilinolenate ) จัดหาจากซิกม่า Aldrich และบริษัท ( St . Louis , MO , USA )ฟ้าเมทิลเอสเทอร์ ( ชื่อเสียง ) มาตรฐาน ( F & หรือส่วนผสม # 3 ) ที่ได้รับจาก altech วิทยาศาสตร์ประยุกต์ ( State College , PA , USA ) เมทิล pentadecanoate ( c15:0 100 มิลลิกรัม ; เมอร์คดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี ) ละลายในบีบ ( 20 มิลลิลิตร ) และใช้เป็นมาตรฐานภายใน โบรอนไตรฟลูออไรด์ ( BF3 ) เมทานอล ( 14 % ; Wako บริสุทธิ์เคมี Inc . , โอซาก้า , ญี่ปุ่น ) ถูกใช้เพื่อเตรียมชื่อเสียง
การแปล กรุณารอสักครู่..
