2.3. Measurement of urease activity

2.3. Measurement of urease activity and calcite production
Experimental conditions were the same as for the bacterial mixtures
growth described above. To establish the bacterial mixtures,
first, a bacterial culture was added to the experimental flasks and
incubated at 30 ◦C for 24 h with continuous agitation at 200 rpm.
Urease activity was determined using the phenol-hypochlorite
assay (Natarajan, 1995). The bacterial suspension (250 L) was
added to 250 L of 0.1 M sodium phosphate buffer containing
500 L of 3 M urea solution. The mixture was incubated at
37 ◦C with regular time intervals. Subsequently, 2 mL of phenol
nitroprusside solution were added to an alkaline hypochlorite solution
and, then, incubated at 50 ◦C for 40 min. After incubation,
absorbance was measured at 626 nm with ammonium chloride
(0–10 M) as a standard. One unit of urease activity was defined
as the amount of enzyme that catalyzed the hydrolysis of 1 M
urea per min.
To produce calcite,the isolates were cultured inYAbrothfor 24 h
and subcultured onto BPU broth (3 g/L beef extract, 5 g/L peptone,
and 20 g/Lurea at pH 7) at 30 ◦Cfor 72 h withcontinuous agitationat
200 rpm. The bacterial suspension (500 L) was added to 500 L of
350 m

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3. การวัดเอนไซม์การผลิตกิจกรรมและแคลไซต์ได้ทดลองสภาวะเหมือนกับผสมแบคทีเรียเจริญเติบโตที่อธิบายข้างต้น การสร้างส่วนผสมแบคทีเรียครั้งแรก วัฒนธรรมแบคทีเรียถูกเพิ่มลงในขวดทดลอง และรับการกกที่ 30 ◦C 24 ชั่วโมงกับความปั่นป่วนต่อเนื่องที่ 200 รอบต่อนาทีกำหนดกิจกรรมของเอนไซม์โดยใช้ฟีนอลไฮโปคลอไรต์assay (Natarajan, 1995) แก้ไขระงับแบคทีเรีย (250 L)ลง L 250 ของ 0.1 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ประกอบด้วยL 500 ยูเรียของ 3 M ส่วนผสมมี incubated ที่◦C 37 ด้วยช่วงเวลาปกติ ต่อมา 2 mL ของฟีนอลเพิ่มโซลูชัน nitroprusside ไรต์มีอัลคาไลน์และ แล้ว รับการกกที่ 50 ◦C 40 นาที หลังจากบ่มโดยวัดค่าที่ 626 nm กับแอมโมเนียมคลอไรด์(0-10 M) เป็นมาตรฐาน กำหนดหน่วยของกิจกรรมเอนไซม์จำนวนเอนไซม์ที่กระบวนการย่อยสลายของ 1 เมตรยูเรียต่อนาทีในการผลิตแคลไซต์ แยกถูกล้าง inYAbrothfor 24 ชมและ subcultured ลงในน้ำซุป BPU (สารสกัดจากเนื้อวัว 3 g/L, 5 แยก peptoneและ 20 กรัม/Lurea ที่ pH 7) ที่ 30 ◦Cfor 72 h withcontinuous agitationat200 รอบต่อนาที 500 L ถูกระงับแบคทีเรีย (500 ลิตร)350 m

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 วัดของกิจกรรม urease และการผลิตแคลเซียมคาร์บอเนต
เงื่อนไขการทดลองเป็นเช่นเดียวกับการผสมของเชื้อแบคทีเรีย
เจริญเติบโตที่อธิบายข้างต้น เพื่อสร้างผสมแบคทีเรีย
แรกวัฒนธรรมแบคทีเรียถูกเพิ่มลงในขวดทดลองและ
บ่มที่ 30 ◦Cเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่มีการกวนอย่างต่อเนื่องที่ 200 รอบต่อนาที.
กิจกรรมยูรีเอสถูกกำหนดโดยใช้ฟีนอลไฮโปคลอไรต์
ทดสอบ (Natarajan, 1995) การระงับแบคทีเรีย (250 ลิตร) ถูก
เพิ่มถึง 250 ลิตรฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 0.1 M โซเดียมที่มี
500 L ของการแก้ปัญหา 3 เมตรยูเรีย ส่วนผสมที่ถูกบ่มที่
37 ◦Cกับช่วงเวลาปกติ ต่อมา 2 มลฟีนอล
แก้ปัญหา nitroprusside ถูกเพิ่มเข้าไปในสารละลายด่างไฮโปคลอไรต์
และแล้วบ่มที่ 50 ◦Cเป็นเวลา 40 นาที หลังจากการบ่ม
การดูดกลืนแสงวัดที่ 626 นาโนเมตรที่มีแอมโมเนียมคลอไร
(0-10 M) เป็นมาตรฐาน หนึ่งหน่วยของกิจกรรม urease ถูกกำหนด
เป็นปริมาณของเอนไซม์ที่เร่งการย่อยสลายของ 1 เอ็ม
ยูเรียต่อนาที.
เพื่อผลิตแคลเซียมคาร์บอเนตเชื้อเพาะเลี้ยง inYAbrothfor 24 ชั่วโมง
และเลี้ยงบนสารสกัด BPU น้ำซุป (3 กรัม / ลิตรเนื้อวัว, 5 กรัม / L เปปโตน,
และ 20 กรัม / Lurea ที่ pH 7) วันที่ 30 ◦Cfor 72 ชั่วโมง withcontinuous agitationat
200 รอบต่อนาที การระงับแบคทีเรีย (500 ลิตร) ถูกบันทึกอยู่ใน 500 ลิตร
350 เมตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 วัดที่มีกิจกรรมการผลิต และแคลไซต์สภาพทดลองเหมือนผสมแบคทีเรียการเจริญเติบโตที่อธิบายข้างต้น สร้างผสมแบคทีเรียแรก , แบคทีเรียที่ถูกเพิ่มเข้าไปในขวดทดลองบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 24 ชั่วโมง◦อย่างต่อเนื่องด้วยการกวน 200 รอบต่อนาทีกิจกรรมที่มีกำหนดใช้ฟีนอล ไฮโปคลอไรท์( ( natarajan , 1995 ) ระงับเชื้อแบคทีเรีย ( 250 ลิตร )เพิ่ม 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่มี 250 ลิตร500 ล. 3 สารละลายยูเรีย M . ส่วนผสมจะถูกบ่มที่37 ◦ C กับช่วงเวลาปกติ ต่อมา 2 ml ของฟีนอลไนโตรปรัสไซด์ โซลูชั่น มีการเพิ่มโซลูชั่นไฮโป ด่างและ แล้ว บ่มที่อุณหภูมิ 50 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 40 นาที หลังจากบ่ม◦ ,วัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 578 nm กับแอมโมเนียมคลอไรด์( 0 – 10 เมตร ) เป็นมาตรฐาน หน่วยหนึ่งของกิจกรรมที่มีคือนิยามตามปริมาณของเอนไซม์ที่เร่งปฏิกิริยาการย่อยสลายของ 1 เมตรยูเรียต่อนาทีเพื่อผลิตแร่แคลไซต์ , เชื้อเพาะเลี้ยง inyabrothfor 24 ชั่วโมงsubcultured ลงและน้ำซุป bpu ( 3 กรัมต่อลิตรและสารสกัดจากเนื้อ 5 กรัมต่อลิตรตามลำดับ ,และ 20 กรัม / lurea ที่ pH 7 ) ที่ 30 ◦ C เป็นเวลา 72 ชั่วโมง - agitationatความเร็วรอบ 200 รอบต่อนาที ระงับเชื้อแบคทีเรีย ( 500 ลิตร ) เพิ่ม 500 ล.350 เมตร