Carbohydrate-protein interactions p

Carbohydrate-protein interactions play important biological roles in living organisms. For the most part, biophysical and biochemical methods have been used for studying these biomolecular interactions. Less attention has been given to the development of high-throughput methods to elucidate recognition events between carbohydrates and proteins. In the current effort to develop a novel high-throughput tool for monitoring carbohydrate-protein interactions, we prepared carbohydrate microarrays by immobilizing maleimide-linked carbohydrates on thiol-derivatized glass slides and carried out lectin binding experiments by using these microarrays. The results showed that carbohydrates with different structural features selectively bound to the corresponding lectins with relative binding affinities that correlated with those obtained from solution-based assays. In addition, binding affinities of lectins to carbohydrates were also quantitatively analyzed by determining IC50 values of soluble carbohydrates with the carbohydrate microarrays. To fabricate carbohydrate chips that contained more diverse carbohydrate probes, solutionphase parallel and enzymatic glycosylations were performed. Three model disaccharides were in parallel synthesized in solution-phase and used as carbohydrate probes for the fabrication of carbohydrate chips. Three enzymatic glycosylations on glass slides were consecutively performed to generate carbohydrate microarrays that contained the complex oligosaccharide, sialyl Lex. Overall, these works demonstrated that carbohydrate chips could be efficiently prepared by covalent immobilization of maleimide-linked carbohydrates on the thiol-coated glass slides and applied for the high-throughput analyses of carbohydrateprotein interactions.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

คาร์โบไฮเดรตโปรตีนโต้เล่นบทบาททางชีวภาพที่สำคัญในชีวิต ส่วนใหญ่ biophysical และชีวเคมีได้ถูกใช้สำหรับการศึกษาเหล่านี้โต้วทคร ๕๐๘ ให้ความสนใจน้อยกว่าการพัฒนาอัตราความเร็วสูงวิธีการ elucidate เหตุการณ์การรับรู้ระหว่างคาร์โบไฮเดรตและโปรตีน ในปัจจุบันพยายามพัฒนาเครื่องมือที่สามารถประมวลผลได้สูงนวนิยายสำหรับตรวจสอบโต้ตอบคาร์โบไฮเดรตโปรตีน เราเตรียม microarrays คาร์โบไฮเดรต โดย immobilizing คาร์โบไฮเดรตที่ลิงค์ maleimide บน thiol derivatized กระจกสไลด์ และดำเนินการศึกษาทดลองผูกโดย microarrays เหล่านี้ ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่า คาร์โบไฮเดรต มีลักษณะโครงสร้างที่แตกต่างกันเลือกกับ lectins สอดคล้องกับ affinities ผูกสัมพันธ์ที่กับผู้ที่ได้รับจากใช้โซลูชัน assays correlated นอกจากนี้ affinities รวมของ lectins คาร์โบไฮเดรตถูก quantitatively ยังวิเคราะห์ โดยกำหนดค่า IC50 ของคาร์โบไฮเดรตละลายกับ microarrays คาร์โบไฮเดรต จะปั้นเศษคาร์โบไฮเดรตที่ประกอบด้วยคาร์โบไฮเดรตมากหลากหลาย probes ดำเนินคู่ขนาน และเอนไซม์ในระบบ glycosylations solutionphase สามรุ่น disaccharides ขนานสังเคราะห์ในขั้นตอนการแก้ปัญหา และใช้เป็นคาร์โบไฮเดรต probes สำหรับการผลิตของชิปคาร์โบไฮเดรตได้ Glycosylations เอนไซม์ในระบบสามบนกระจกสไลด์ได้ดำเนินการอย่างต่อเนื่องเพื่อสร้างคาร์โบไฮเดรต microarrays ที่ประกอบด้วยซับซ้อน oligosaccharide, sialyl เล็กซ์ทัวร์ โดยรวม งานเหล่านี้แสดงว่า คาร์โบไฮเดรตชิสามารถเป็นได้อย่างมีประสิทธิภาพโดยตรึงโป covalent คาร์โบไฮเดรต maleimide ลิงค์บนภาพนิ่ง thiol เคลือบแก้ว และใช้สำหรับวิเคราะห์อัตราความเร็วสูงของ carbohydrateprotein โต้ตอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ปฏิสัมพันธ์คาร์โบไฮเดรตโปรตีนมีบทบาททางชีวภาพที่สำคัญในชีวิต ส่วนใหญ่วิธีชีวฟิสิกส์และชีวเคมีได้ถูกนำมาใช้สำหรับการศึกษาการโต้ตอบเหล่านี้ชีวโมเลกุล ความสนใจน้อยได้รับการพัฒนาวิธีการส่งผ่านสูงเพื่ออธิบายเหตุการณ์ที่เกิดขึ้นได้รับการยอมรับระหว่างคาร์โบไฮเดรตและโปรตีน ในความพยายามที่จะพัฒนาในปัจจุบันเครื่องมือที่สูงผ่านนวนิยายสำหรับการตรวจสอบการมีปฏิสัมพันธ์คาร์โบไฮเดรตโปรตีนเราเตรียม microarrays คาร์โบไฮเดรตโดยตรึงคาร์โบไฮเดรต maleimide เชื่อมโยงใน thiol-derivati​​zed สไลด์แก้วและดำเนินการทดลองเลคตินที่มีผลผูกพันโดยใช้ microarrays เหล่านี้ ผลการศึกษาพบว่าคาร์โบไฮเดรตที่มีคุณสมบัติที่แตกต่างกันของโครงสร้างการคัดเลือกผูกพันกับเลคตินที่สอดคล้องกับความพอใจที่มีผลผูกพันญาติที่มีความสัมพันธ์กับผู้ที่ได้รับจากการตรวจที่ใช้วิธีการแก้ปัญหา นอกจากนี้ยังมีความพอใจที่มีผลผูกพันของเลคตินที่จะคาร์โบไฮเดรตก็ยังวิเคราะห์เชิงปริมาณโดยการกำหนดค่า IC50 ของคาร์โบไฮเดรตที่ละลายกับ microarrays คาร์โบไฮเดรต เพื่อสานชิปคาร์โบไฮเดรตที่มีคาร์โบไฮเดรตยานสำรวจความหลากหลายมากขึ้นและขนาน solutionphase glycosylations เอนไซม์ได้ดำเนินการ สาม disaccharides อยู่ในรูปแบบขนานสังเคราะห์ในขั้นตอนวิธีการแก้ปัญหาและใช้เป็นยานสำรวจคาร์โบไฮเดรตสำหรับการผลิตชิปคาร์โบไฮเดรต สาม glycosylations เอนไซม์บนสไลด์แก้วได้ดำเนินการอย่างต่อเนื่องในการสร้าง microarrays คาร์โบไฮเดรตที่มีอยู่ oligosaccharide ซับซ้อน sialyl ไฟแนนเชี่ โดยรวม, ผลงานเหล่านี้แสดงให้เห็นว่าชิปคาร์โบไฮเดรตสามารถเตรียมได้อย่างมีประสิทธิภาพโดยการตรึงโควาเลนต์ของคาร์โบไฮเดรต maleimide เชื่อมโยงใน thiol เคลือบกระจกสไลด์และนำไปใช้สำหรับสูง throughput วิเคราะห์ปฏิสัมพันธ์ carbohydrateprotein

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

คาร์โบไฮเดรตโปรตีนปฏิสัมพันธ์เล่นบทบาททางชีวภาพที่สำคัญในสิ่งมีชีวิต ส่วนใหญ่ ทางชีวกายภาพและวิธีการทางชีวเคมีที่ได้ถูกใช้เพื่อศึกษาปฏิกิริยาชีวโมเลกุล เหล่านี้ สนใจมีไว้เพื่อพัฒนาวิธีช่วยทำให้การรับรู้เหตุการณ์ระหว่างคาร์โบไฮเดรตและโปรตีน ในความพยายามในปัจจุบันเพื่อพัฒนาเครื่องมือช่วยสำหรับการตรวจสอบของนวนิยายโปรตีน , คาร์โบไฮเดรตที่เราเตรียมการแสดงโดยตรึง maleimide เชื่อมโยงคาร์โบไฮเดรตใน derivatized ขนาดกระจกสไลด์และดำเนินการทดลองโดยใช้ปฏิกิริยาการจับการแสดงเหล่านี้ ผลการศึกษาพบว่า คาร์โบไฮเดรตที่มีโครงสร้างคุณสมบัติเลือกผูกพันกับเลคตินที่สอดคล้องกันกับญาติผูก affinities ที่มีความสัมพันธ์กับผู้ที่ได้จากการแก้ปัญหาโดยวิธี . นอกจากนี้ affinities การจับของเลคตินมีปริมาณคาร์โบไฮเดรต วิเคราะห์ข้อมูลโดยการค่าของคาร์โบไฮเดรตที่ละลายน้ำได้ ic50 กับคาร์โบไฮเดรติ . การสร้างชิปที่มีคาร์โบไฮเดรตคาร์โบไฮเดรตและหลากหลายมากขึ้น , เอนไซม์ glycosylations solutionphase ขนานและการวิจัย 3 รูปแบบ คือน้ำตาลโมเลกุลคู่ขนานสังเคราะห์ในเฟส และโซลูชั่นที่ใช้สำหรับการผลิตของคาร์โบไฮเดรต คาร์โบไฮเดรตและชิป 3 glycosylations เอนไซม์บนกระจกสไลด์ คือการสร้างคาร์โบไฮเดรตที่มีการแสดงที่มีโอลิโกแซคคาไรด์เชิงซ้อน sialyl เล็กซ์ โดยรวมแล้ว ผลงานเหล่านี้แสดงให้เห็นว่าคาร์โบไฮเดรตชิปอาจจะเตรียมการได้อย่างมีประสิทธิภาพโดยการตรึงของ maleimide เชื่อมโยงคาร์โบไฮเดรตในขนาดเคลือบกระจกสไลด์และประยุกต์เพื่อช่วยวิเคราะห์ carbohydrateprotein การโต้ตอบ