Despite the success of Betzig´s wor

Despite the success of Betzig´s work on near-field fluorescence microscopy (e.g. Betzig et al., 1992; 1993) it was becoming increasingly clear that the confinement to surface studies and the cumbersome implementation limited the use of these methods. Betzig decided to leave academic science, but continued to think about super-resolved fluorescence microscopy. He eventually perceived a new way to achieve super-resolution without the shortcomings of near-field microscopy (Betzig, 1995). The solution, he suggested, was to determine the positions of a large number of point sources with distinguishable spectral properties in two steps. In a first step the PSF of each spectral class was determined separately. Making sure that each spectral class formed a sparse set in space, it would be possible to determine the positions of their members with super resolution by estimating the centers of their PSFs with the precision of Eq. 5. By considering the positions of all classes together, a super-resolution image of a densely sampled structure could be obtained. A particular implementation of this method was subsequently used in experiments by G.J. Brakenhoff and collaborators (van Oijen et al., 1998), but an optimal way to experimentally realize Betzig’s vision was still lacking.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แม้ความสำเร็จของ Betzig´s ทำงานใกล้กับฟิลด์ fluorescence microscopy (เช่น Betzig และ al., 1992, 1993) ก็ได้กลายเป็นชัดเจนมากขึ้นที่เข้าการศึกษาพื้นผิวและการใช้งานยุ่งยากจำกัดการใช้วิธีการเหล่านี้ Betzig ตัดสินใจไปศึกษาวิทยาศาสตร์ แต่ยังคงคิดแก้ไขเตอร์รุ่น fluorescence microscopy เขาก็มองเห็นรูปแบบใหม่เพื่อให้ได้ความละเอียดที่ซุปเปอร์ไม่ มีของ microscopy ใกล้ฟิลด์ (Betzig, 1995) โซลูชั่น เขาแนะนำ มีการ กำหนดตำแหน่งของจุดแหล่งมีคุณสมบัติแตกต่างสเปกตรัมจำนวนมากในสองขั้นตอน ในครั้งแรกเป็น PSF ระดับสเปกตรัมแต่ละขั้นตอนถูกกำหนดแยกต่างหาก ทำให้แน่ใจว่า แต่ละชั้นสเปกตรัมเกิดขึ้นชุดบ่อในพื้นที่ มันจะสามารถกำหนดตำแหน่งของสมาชิกของซุปเปอร์ความละเอียด โดยประมาณศูนย์ PSFs ของพวกเขากับความแม่นยำของ Eq. 5 โดยพิจารณาตำแหน่งของชั้นเรียนทั้งหมดเข้าด้วยกัน รูปซุปเปอร์ความละเอียดของโครงสร้างตัวอย่างหนาแน่นไปอาจได้รับ ดำเนินการเฉพาะของวิธีการนี้มาใช้ในการทดลอง โดย G.J. Brakenhoff และผู้ร่วมงาน (van Oijen และ al., 1998), แต่ทางที่ดีที่สุด experimentally ตระหนักถึงวิสัยทัศน์ของ Betzig ยังขาด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อย่างไรก็ตามความสำเร็จของการทำงาน Betzig's บนกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงที่อยู่ใกล้เขต (เช่น Betzig et al, 1992;. 1993) มันก็กลายเป็นที่ชัดเจนมากขึ้นว่าการคุมขังไปยังพื้นผิวการศึกษาและการใช้งานยุ่งยาก จำกัด การใช้วิธีการเหล่านี้ Betzig ตัดสินใจที่จะทิ้งวิทยาศาสตร์วิชาการ แต่ยังคงคิดเกี่ยวกับกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงซุปเปอร์มติ ในที่สุดเขาก็รับรู้ด้วยวิธีการใหม่เพื่อให้บรรลุความละเอียดสุดโดยไม่มีข้อบกพร่องของกล้องจุลทรรศน์ที่อยู่ใกล้เขต (Betzig, 1995) วิธีการแก้ปัญหาที่เขาแนะนำคือเพื่อตรวจสอบตำแหน่งของจำนวนมากของแหล่งที่มาของจุดที่มีคุณสมบัติแตกต่างสเปกตรัมในสองขั้นตอน ในขั้นตอนแรก PSF ของแต่ละชั้นสเปกตรัมถูกกำหนดแยกต่างหาก ให้แน่ใจว่าแต่ละชั้นสเปกตรัมจัดตั้งชุดเบาบางในพื้นที่ก็จะมีความเป็นไปได้ในการกำหนดตำแหน่งของสมาชิกของพวกเขาที่มีความละเอียดสุดโดยประมาณศูนย์ PSFs ของพวกเขาที่มีความแม่นยำของสมการ 5. โดยพิจารณาตำแหน่งของชั้นเรียนทั้งหมดเข้าด้วยกันเป็นภาพซุปเปอร์ความละเอียดของโครงสร้างตัวอย่างหนาแน่นอาจจะได้รับ โดยเฉพาะอย่างยิ่งการดำเนินงานของวิธีการนี​​้ถูกนำมาใช้ในการทดลองโดย GJ Brakenhoff และทำงานร่วมกัน (รถตู้ Oijen et al., 1998) แต่วิธีที่ดีที่สุดที่จะทดลองตระหนักถึงวิสัยทัศน์ Betzig ก็ยังขาด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แม้จะมีความสำเร็จของงาน betzig ใหม่ใกล้กล้องจุลทรรศน์ ( เช่น betzig et al . , 1992 ; 1993 ) มันก็กลายเป็นที่ชัดเจนมากขึ้นว่า การศึกษาพื้นผิว และการจำกัดการใช้ที่ยุ่งยากของวิธีการเหล่านี้ betzig ตัดสินใจทิ้งวิชาวิทยาศาสตร์ แต่ยังคงคิดถึงซุปเปอร์แก้ไขกล้องจุลทรรศน์ .ในที่สุดเขาก็รับรู้เป็นวิธีใหม่เพื่อให้บรรลุ super-resolution โดยไม่บกพร่องของกล้องจุลทรรศน์ใกล้ ( betzig , 1995 ) โซลูชั่นที่เขาแนะนำ เพื่อกำหนดตำแหน่งของตัวเลขขนาดใหญ่ของแหล่งจุดด้วยการแยกแยะสเปกตรัมคุณสมบัติในสองขั้นตอน ในขั้นตอนแรกของการเรียนแต่ละ PSF ตั้งใจต่างหากทำให้แน่ใจว่า แต่ละสเปกตรัมชั้นเรียนรูปชุดกระจัดกระจายอยู่ในพื้นที่ ก็จะสามารถกำหนดตำแหน่งของสมาชิกของพวกเขากับซุปเปอร์ความละเอียดโดยประเมินศูนย์ psfs กับความแม่นยำของอีคิว 5 โดยพิจารณาจากตำแหน่งของชั้นทั้งหมดร่วมกัน super-resolution ภาพของหนาแน่นตัวอย่างโครงสร้างอาจจะได้รับการดำเนินงานเฉพาะของวิธีนี้คือสามารถใช้ในการทดลองโดย brakenhoff g.j. และผู้ร่วมงาน ( รถตู้ oijen et al . , 1998 ) แต่วิธีที่เหมาะสมเพื่อตระหนักถึงวิสัยทัศน์ของ betzig ยังขาด