tested using the above procedure to

tested using the above procedure to confirm that no naturally occurring bacterial pathogens under test, or organisms giving similar colonial morphologies to those added to the inoculated products, were present.
2.6. Sampling, incubation and enumeration of bacterial strains
In Southern Africa mutandabota is consumed within 24 h after prep- aration. Therefore the survival of pathogens in both traditional and yoba mutandabota was determined over a potential consumption time of 24 h at 25 °C, to simulate the average ambient temperature in Southern Africa where the product is consumed. For traditional mutandabota, sampling was immediately done after mixing of ingredients and the in- oculum (defined as t = 0), and at approximately 3 h intervals until the end of the 24 h storage at t = 24. For yoba mutandabota (Fig. 1), sam- pling was immediately after mixing of ingredients and the inoculum (defined as t = −24), and at approximately 3 h intervals throughout the 24 h fermentation time and the subsequent 24 h storage time until t = 24. Sequential serial dilutions were made in PPS and plating was done on selective media followed by incubation under appropriate conditions. For L. monocytogenes, plating was on Agar Listeria Ottavani & Agosti (bioMerieux, Marcy I'Etoile, France) and incubation was aerobic at 37 °C for 24 h. For Salmonella spp., plating was on Xylose–Lysine– Desoxycholate Agar (Oxoid) and incubation was aerobic at 37 °C for 24 h. For E. coli O157:H7, plating was on MacConkey agar (Oxoid) and incubation was aerobic at 37 °C for 24 h. For B. cereus plating was on
Mannitol Egg Yolk Polymyxin Agar (Oxoid) and incubation was aerobic at 30 °C for 24 h. For C. jejuni plating was on Campy Food Agar (bioMerieux) and incubation was microaerobic at 41.5 °C for 48 h. For L. rhamnosus yoba, plating was on de Man, Rogosa and Sharpe Agar [MRSA: 12 g agar bacteriological (Oxoid), added to 52.2 g de Man, Rogosa and Sharpe broth (Merck, Darmstadt, Germany) in 1 L distilled water] and incubation was under microaerobic conditions at 37 °C for 24 h. Colonies were enumerated and results were expressed in log cfu/mL of either traditional or yoba mutandabota. The detection limit of the plating method was 100 cfu/mL.
2.7. Lactic acid determination
Lactic acid was determined by HPLC. Briefly, samples of traditional and yoba mutandabota were deproteinated by adding 0.25 mL cold Carrez A solution (42.2 g K4Fe(CN)6·3H2O per 1 L demineralized water) (Sigma-Aldrich, Steinheim, Germany) to 0.5 mL sample of tradi- tional or yoba mutandabota in an Eppendorf tube and mixed, then 0.25 mL of cold Carrez B solution (57.5 g ZnSO4·7H2O per 1 L demineralized water) (Sigma-Aldrich, Steinheim, Germany) was added and mixed. The Eppendorf tubes with samples were centrifuged and the supernatant was taken for HPLC analysis (Ultimate 3000, Dionex), using an Aminex HPX-87 H 300 × 7.8 mm column with a pre-column (Biorad). The eluent was 5 mM H2SO4 at a flow rate of 0.6

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทดสอบโดยใช้ขั้นตอนข้างต้นเพื่อยืนยันว่า ไม่โรคแบคทีเรียธรรมชาติที่เกิดขึ้นภายใต้การทดสอบ หรือให้โคโลเนียล morphologies คล้ายกับเพิ่มสินค้า inoculated สิ่งมีชีวิตมีอยู่2.6 การสุ่ม คณะทันตแพทยศาสตร์และการแจงนับของแบคทีเรียสายพันธุ์แอฟริกาใต้ mutandabota ใช้ภายใน 24 ชมหลังจากเตรียม-aration ดังนั้น ความอยู่รอดของโรคทั้งแบบดั้งเดิมและ yoba mutandabota ได้กำหนดช่วงเวลาการใช้ศักยภาพของ 24 ชมที่ 25 ° C การจำลองอุณหภูมิเฉลี่ยในแอฟริกาใต้ที่มีใช้ผลิตภัณฑ์ สำหรับ mutandabota แบบดั้งเดิม สุ่มตัวอย่างทันทีภายหลังจากการผสมของส่วนผสมและที่ใน-oculum (กำหนดเป็น t = 0), และในช่วงเวลาประมาณ 3 h จนจบเก็บ 24 ชมที่ t = 24 สำหรับ mutandabota yoba (Fig. 1), สาม pling ได้ทันทีหลังจากผสมส่วนผสมและ inoculum (กำหนดเป็น t = −24), และในช่วงเวลาประมาณ 3 h ตลอดเวลาหมัก 24 ชมและระยะเวลาเก็บ 24 ชมต่อมาจนถึง t = 24 ทำ dilutions ลำดับอนุกรมใน PPS และชุบทำสื่อเลือกตาม ด้วยการบ่มเพาะวิสาหกิจภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสม สำหรับ L. monocytogenes ชุบอยู่ Agar ออลิ Ottavani และ Agosti (bioMerieux, Marcy I'Etoile ฝรั่งเศส) และคณะทันตแพทยศาสตร์เป็นแอโรบิกที่ 37 ° C ใน 24 ชม สำหรับโอซัล ชุบอยู่ Xylose – ไลซีน-Desoxycholate Agar (Oxoid) และฟักตัวเป็นแอโรบิกที่ 37 ° C ใน 24 ชม สำหรับ E. coli O157:H7 ชุบอยู่ MacConkey agar (Oxoid) และฟักตัวเป็นแอโรบิกที่ 37 ° C ใน 24 ชม สำหรับ cereus เกิด ชุบอยู่Mannitol ไข่แดง Polymyxin Agar (Oxoid) และฟักตัวเป็นแอโรบิกที่ 30 ° C ใน 24 ชม สำหรับ C. jejuni ชุบอยู่ Campy Agar อาหาร (bioMerieux) และฟักตัวเป็น microaerobic ที่ 41.5 ° C สำหรับ 48 h สำหรับ L. rhamnosus yoba ชุบอยู่เดอแมน Rogosa และ Sharpe Agar [MRSA: 12 g agar bacteriological (Oxoid), เพิ่ม 52.2 g เดอแมน Rogosa และ Sharpe ซุป (เมอร์ค ดาร์มส เยอรมนี) ในน้ำกลั่น L 1] และฟักตัวเป็นสภาวะ microaerobic ที่ 37 ° C 24 h. อาณานิคมได้ระบุ และผลลัพธ์ถูกแสดงในบันทึก cfu/mL ของทั้งแบบดั้งเดิม หรือ yoba mutandabota ตรวจสอบจำนวนวิธีการชุบ 100 cfu/mL2.7 กำหนดกรดแลกติกกรดแลกติกที่ถูกกำหนด โดย HPLC สั้น ๆ ตัวอย่างดั้งเดิมและ yoba mutandabota ถูก deproteinated โดยเพิ่ม 0.25 มลเย็น Carrez A โซลูชัน (42.2 กรัม 6·3H2O K4Fe (CN) ต่อน้ำ 1 L demineralized) (Aldrich ซิก เยอรมนี Steinheim) อย่าง 0.5 mL ของ tradi tional หรือ yoba mutandabota ใน Eppendorf เป็นหลอด และ ผสม แล้ว 0.25 mL ของเย็น Carrez B (57.5 g ZnSO4·7H2O ต่อน้ำ 1 L demineralized) (Aldrich ซิกมา , Steinheim เยอรมนี) เพิ่ม และผสม มี centrifuged หลอด Eppendorf ด้วยตัวอย่าง และ supernatant ถูกใช้สำหรับวิเคราะห์ HPLC (สูงสุด 3000, Dionex), ใช้การซื้อ 300 H Aminex HPX 87 7.8 มม.คอลัมน์คอลัมน์ก่อน (Biorad) Eluent มี 5 มม.กำมะถันในอัตรา 0.6 กระแส

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ทดสอบโดยใช้ขั้นตอนข้างต้นเพื่อยืนยันว่าไม่เกิดขึ้นตามธรรมชาติแบคทีเรียภายใต้การทดสอบหรือการให้สิ่งมีชีวิตรูปร่างลักษณะโคโลเนียลที่คล้ายกับที่เพิ่มให้กับสินค้าเชื้อที่อยู่ในปัจจุบัน.
2.6 การสุ่มตัวอย่างและการแจกแจงฟักตัวของเชื้อแบคทีเรียสายพันธุ์ใน mutandabota ภาคใต้ของแอฟริกามีการบริโภคภายใน 24 ชั่วโมงหลังจาก prep- aration
ดังนั้นการอยู่รอดของเชื้อโรคในทั้งแบบดั้งเดิมและ yoba mutandabota ถูกกำหนดช่วงเวลาของการบริโภคที่มีศักยภาพ 24 ชั่วโมงที่ 25 ° C เพื่อจำลองอุณหภูมิโดยเฉลี่ยในภาคใต้ของแอฟริกาที่สินค้าที่มีการบริโภค สำหรับ mutandabota แบบดั้งเดิมสุ่มตัวอย่างได้ทำทันทีหลังจากการผสมของส่วนผสมและ oculum ห (หมายถึง t = 0) และในช่วงเวลาประมาณ 3 ชั่วโมงจนกว่าจะสิ้นสุดของการจัดเก็บ 24 ชั่วโมงที่ t = 24 สำหรับ yoba mutandabota (รูป 1), ปลิง sam- ทันทีหลังจากผสมของวัตถุดิบและเชื้อ (หมายถึง t = -24) และในช่วงเวลาประมาณ 3 ชั่วโมงตลอดเวลาในการหมัก 24 ชั่วโมงและต่อมา 24 ชั่วโมงระยะเวลาการเก็บจนกว่า t = 24 ลำดับอนุกรม เจือจางได้ทำใน PPS และชุบทำในสื่อเลือกตามด้วยการบ่มภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสม สำหรับ monocytogenes ลิตร, ชุบวุ้นอยู่บน Listeria Ottavani และ Agosti (bioMerieux ร์ซี่ I'Etoile ฝรั่งเศส) และบ่มเป็นแอโรบิกที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง สำหรับเชื้อ Salmonella spp., ชุบอยู่ในไซโลส-Lysine- Desoxycholate วุ้น (Oxoid) และบ่มเป็นแอโรบิกที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง สำหรับเชื้อ E. coli O157: H7, ชุบอยู่บน MacConkey agar (Oxoid) และบ่มเป็นแอโรบิกที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง สำหรับชุบเชื้อ B. cereus อยู่บน
Mannitol ไข่แดง polymyxin วุ้น (Oxoid) และแอโรบิกเป็นบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง สำหรับชุบ C. jejuni อยู่บนอาหารวุ้นเปิน (bioMerieux) และบ่มเป็น microaerobic ที่ 41.5 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง สำหรับ L. rhamnosus yoba, ชุบเป็นบนผู้ชาย, Rogosa และชาร์ปวุ้น [MRSA: 12 กรัมวุ้นแบคทีเรีย (Oxoid) เพิ่ม 52.2 กรัมเดผู้ชาย, Rogosa และน้ำซุปชาร์ป (เมอร์ค, ดาร์มสตัด, เยอรมนี) ใน 1 ลิตรน้ำกลั่น ] และฟักตัวอยู่ภายใต้เงื่อนไข microaerobic ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง อาณานิคมถูกแจกแจงและผลการวิจัยที่แสดงในบันทึกของโคโลนี / มิลลิลิตรทั้งแบบดั้งเดิมหรือ yoba mutandabota ขีด จำกัด ของการตรวจสอบวิธีการชุบคือ 100 cfu / มล.
2.7 ความมุ่งมั่นของกรดแลคติกกรดแลคติกถูกกำหนดโดยวิธี HPLC
สั้น ๆ , ตัวอย่าง mutandabota แบบดั้งเดิมและ yoba ถูก deproteinated โดยการเพิ่ม 0.25 มิลลิลิตรเย็น Carrez วิธีการแก้ปัญหา (42.2 กรัม K4Fe (CN) 6 · 3H2O ต่อ 1 ลิตรน้ำปราศจากแร่ธาตุ) (Sigma-Aldrich, Steinheim, เยอรมนี) ตัวอย่าง 0.5 มิลลิลิตร tradi- tional หรือ yoba mutandabota ในหลอด Eppendorf และผสมแล้ว 0.25 มิลลิลิตรของสารละลายเย็น Carrez B (57.5 กรัม ZnSO4 · 7H2O ต่อ 1 ลิตรน้ำปราศจากแร่ธาตุ) (Sigma-Aldrich, Steinheim, เยอรมนี) ถูกบันทึกและผสม หลอด Eppendorf กับกลุ่มตัวอย่างได้รับการหมุนเหวี่ยงใสและถูกนำสำหรับการวิเคราะห์ HPLC (ที่ดีที่สุด 3000, Dionex) โดยใช้ Aminex HPX-87 H 300 × 7.8 มมคอลัมน์ที่มีคอลัมน์ก่อน (Biorad) ตัวชะที่ 5 มิลลิ H2SO4 ที่อัตราการไหล 0.6

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ทดสอบการใช้ขั้นตอนข้างต้นเพื่อยืนยันว่าไม่เกิดขึ้นตามธรรมชาติแบคทีเรียก่อโรคภายใต้การทดสอบ หรือสิ่งมีชีวิตให้โครงสร้างอาณานิคมที่คล้ายคลึงกับที่เพิ่มให้กับผลิตภัณฑ์ที่ใส่อยู่ปัจจุบัน
2.6 ตัวอย่างและบ่มเพาะการ
สายพันธุ์แบคทีเรียในแอฟริกาตอนใต้ mutandabota การบริโภคภายใน 24 ชั่วโมงหลังจากเตรียม - aration .ดังนั้นความอยู่รอดของเชื้อโรคทั้งในแบบดั้งเดิมและ yoba mutandabota ตั้งใจกว่าเวลาใช้ศักยภาพของ 24 ชั่วโมง ที่ 25 ° C , จำลองอุณหภูมิเฉลี่ยในแอฟริกาตอนใต้ ซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์ที่ใช้ สำหรับ mutandabota แบบสุ่มทันทีทำหลังจากการผสมของวัสดุและใน - oculum ( เช่น t = 0 )และในช่วงเวลาประมาณ 3 ชั่วโมง จนกว่าจะสิ้นสุดของกระเป๋า 24 ชั่วโมง ที่ T = 24 สำหรับ yoba mutandabota ( รูปที่ 1 ) , แซม - ปลิงได้ทันทีหลังจากการผสมของส่วนผสมและปริมาณ ( เช่น t = − 1 ) และในช่วงเวลาประมาณ 3 ชั่วโมง ตลอด 24 ชั่วโมง เวลาหมัก และต่อมา 24 H กระเป๋าเวลาจนถึง t = 24เจือจางเป็นลำดับต่อเนื่องอยู่ใน PPS ชุบและทำงานตามสื่อบ่มเพาะภายใต้สภาวะที่เหมาะสม สำหรับผม monocytogenes ชุบเป็นวุ้น Listeria ottavani &สิงหาคม ( biomerieux มาร์ซี่ i'etoile , ฝรั่งเศส ) และบ่มที่ 37 ° C เป็นแอโรบิกตลอด 24 ชั่วโมงสำหรับเชื้อ Salmonella spp .ชุบบน 6 – 4 – desoxycholate ( oxoid ) และบ่มที่ 37 ° C เป็นแอโรบิกเป็นเวลา 24 ชั่วโมงสำหรับเชื้อ E . coli เป็นสมาชิก ) ชุบเป็น Lynx ( oxoid ) และบ่มที่ 37 ° C เป็นแบบ 24 ชั่วโมง สำหรับ B . cereus ใน
5 ชุบไข่แดง polymyxin ( oxoid ) และ บ่มเพาะเป็นแอโรบิก 30 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง สำหรับ Cใช้ชุบบนวุ้นอาหาร campy ( biomerieux ) และบ่มเพาะเป็น microaerobic ที่ 41.5 องศา C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง สำหรับ แอล rhamnosus yoba ชุบคือ เดอ ชาย rogosa ชาร์ปและวุ้น [ 1 : 12 กรัมต่อแบคทีเรีย ( oxoid ) เป็น 52.2 กรัม เดอ ชาย rogosa เมอร์คชาร์ป , และน้ำซุป ( ดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี 1 ) ในน้ำกลั่น ] และบ่มเพาะอยู่ภายใต้เงื่อนไข microaerobic 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงอาณานิคมได้ถูกระบุและผลที่แสดงออกใน log CFU / ml ทั้งแบบดั้งเดิมหรือ yoba mutandabota . มีขีดจำกัดของการชุบแบบ 100 CFU / มล.
2.7 . ปริมาณกรดแลคติกกรดแลกติก
ถูกกำหนดโดย HPLC สั้น , ตัวอย่างของแบบดั้งเดิมและ yoba mutandabota เป็น deproteinated โดยเพิ่ม 0.25 ml เย็น carrez โซลูชั่น ( 422 G k4fe ( CN ) 3h2o 6 ต่อ 1 เปอร์เซนต์ด้วยน้ำ ) ( ซิกม่า Aldrich steinheim , เยอรมนี ) 0.5 มล. จำนวน Tradi - tional หรือ yoba mutandabota ในเพนดอร์ฟ หลอดและ 0.25 มิลลิลิตร ผสม แล้วเย็น carrez บีโซลูชั่น ( 57.5 กรัมต่อลิตร znso4 ด้วย 7h2o เปอร์เซนต์น้ำ ) ( ซิกม่า Aldrich steinheim , เยอรมนี ) คือการเพิ่มและผสมที่เพนดอร์ฟหลอดที่มีจำนวนสูงระดับและถ่ายสำหรับการวิเคราะห์ HPLC ( สูงสุด 3000 DIONEX ) โดยใช้คอลัมน์× 7.8 มิลลิเมตร aminex hpx-87 H 300 กับ pre คอลัมน์ ( biorad ) ส่วนนี้คือ 5 มม. ที่อัตราการ ไหลของกรดซัลฟิวริก