MATERIALS AND METHODSSampling sites

MATERIALS AND METHODS
Sampling sites and isolation of amoebae. Samples were
collected during low tide from Fort Lauderdale Beach (26" 07'
17.35"N, 80" 06' 14.24" W), Hollywood Beach (26" 02'
02.56"N, 80" 06' 50.36" W), and Hobe Beach (25" 44' 22.5" N,
80" 10' 18.7" W) (southeastern Florida, USA) over a sevenmonth
period (August 2001 to February 2002). On each outing,
three samples were processed from each beach. Water was collected
at 5 m from shore, wet sand was collected from the top
10 cm of sand located halfway between the high-tide mark and
current water level, and dry sand was sampled from the top 10
cm of sand 5 m above the high-tide mark. Water samples (100
ml) were concentrated to 1 ml by centrifugation for 15 min at
300 g. Sand samples (200 g) were shaken vigorously for 1 min
with 500 ml of phosphate-buffered saline and 50 ml of the
suspension was concentrated by centrifugation as described
above. Drops (ca. 100 ~1) of concentrate were placed at the end
of a 1-mm-wide Escherichia coli streak spread across the diameter
of a 100 X 15 mm Petri dish containing non-nutrient
agar ("A: 15 g agar in 1 liter amoeba saline, Page 1988).
After incubating for 2 wk at room temperature (ca. 23 "C)
amoebae were harvested by flushing the agar surface with
amoeba saline and the amoebae that grew were observed at
600X using phase contrast microscopy. Where possible, amoebae
were identified by light microscopical features using the
keys of Page (1983, 1988). In many cases, identification to species,
or even genus, was impossible without electron microscopy
so some isolates are listed as morphotypes (presumed different
species).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการ
สุ่มตัวอย่างเว็บไซต์และการแยกของอะมีบา ตัวอย่าง
ที่เก็บรวบรวมได้ในช่วงน้ำลงจากฟลบีช (26 "07 '
17.35 "N, 80" 06 '14.24 "W) ใน Hollywood Beach (26" 02'
02,56 "N, 80" 06 '50.36 "W) และ Hobe บีช (25 "44" 22.5 "N,
80 "10 '18.7" W) (ตะวันออกเฉียงใต้ของฟลอริด้า, สหรัฐอเมริกา) มากกว่า sevenmonth
ระยะเวลา (สิงหาคม 2001 ถึงเดือนกุมภาพันธ์ 2002) ในแต่ละการออกนอกบ้าน,
สามตัวอย่างที่ถูกประมวลผลจากชายหาดแต่ละ น้ำที่ถูกเก็บรวบรวม
5 เมตรจากฝั่งทรายเปียกที่ถูกเก็บรวบรวมมาจากด้านบน
10 ซมทรายตั้งอยู่กึ่งกลางระหว่างเครื่องหมายสูงน้ำและ
ระดับน้ำในปัจจุบันและทรายแห้งเป็นตัวอย่างจากด้านบน 10
ซม. ทราย 5 เมตรเหนือสูง เครื่องหมาย -tide ตัวอย่างน้ำ (100
มล.) มีความเข้มข้นถึง 1 มล. โดยการหมุนเหวี่ยงเป็นเวลา 15 นาทีที่
300 กรัม ตัวอย่างทราย (200 กรัม) ถูกเขย่าอย่างจริงจังเป็นเวลา 1 นาที
500 มล. น้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์และ 50 มล
ระงับเป็นความเข้มข้นโดยการหมุนเหวี่ยงตามที่อธิบายไว้
ข้างต้น หยด (ประมาณ 100 ~ 1) ของสมาธิที่ถูกวางไว้ในตอนท้าย
ของ 1 มิลลิเมตรกว้างแนวการแพร่กระจายเชื้อ Escherichia coli ทั่วเส้นผ่าศูนย์กลาง
100 X 15 มมจานเลี้ยงเชื้อที่มีสารอาหารที่ไม่ใช่
อาหารเลี้ยงเชื้อ (": 15 กรัมในอาหารเลี้ยงเชื้อ 1 ลิตรน้ำเกลืออะมีบา, หน้า 1988).
หลังจากฟักเป็นเวลา 2 สัปดาห์ที่อุณหภูมิห้อง (แคลิฟอร์เนีย 23 "C)
อะมีบาถูกเก็บเกี่ยวโดยการล้างพื้นผิววุ้นด้วย
น้ำเกลือและอะมีบาอะมีบาที่ขยายตัวที่ถูกตั้งข้อสังเกต
600X โดยใช้กล้องจุลทรรศน์เฟสตรงกันข้าม ที่เป็นไปได้อะมีบา
ถูกระบุโดยคุณสมบัติจุลแสงโดยใช้
คีย์ของหน้า (1983, 1988) ในหลายกรณีการระบุสายพันธุ์,
หรือแม้กระทั่งพืชและสัตว์เป็นไปไม่ได้โดยไม่ต้องใช้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน
ดังนั้นบางสายพันธุ์มีการระบุไว้ morphotypes (สันนิษฐานที่แตกต่างกัน
ชนิด)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการ
ตัวอย่างเว็บไซต์และแยกอะมีบา . จำนวน
เก็บช่วงโลว์ ไทด์ จาก ฟอร์ท ลอเดอร์เดล บีช ( 26 " 07 '
17.35 n " 80 " 06 ' 12.05 " W ) , หาดใหญ่ ( 26 " 02.56 02 '
" N 80 " 06 ' 50.36 " W ) และ Hobe บีช ( 25 " 44 ' 22.5 " N ,
80 " 10 ' 18.7 " W ) Southeastern Florida , USA ) กว่า sevenmonth
งวด ( สิงหาคม 2544 ถึงกุมภาพันธ์ 2545 ) ในแต่ละกิจกรรม
,สามจำนวนที่ผลิตจากแต่ละหาด น้ำบริโภค
5 เมตรจากฝั่ง ทรายเปียก รวบรวมจากด้านบน
10 ซม. ทรายตั้งอยู่ครึ่งทางระหว่างน้ำขึ้นสูง มาร์ค และ
ระดับน้ำในปัจจุบัน และทรายแห้งตัวอย่างจากด้านบน 10
ซม. ทราย 5 เมตรเหนือระดับน้ำสูงมาร์ค ตัวอย่างน้ำ ( 100
มิลลิลิตรเข้มข้น 1 มิลลิลิตร โดยปั่น 15 นาทีที่
300 กรัมตัวอย่างทราย ( 200 กรัม ) สั่นสะเทือนอย่างแรงเป็นเวลา 1 นาที
กับ 500 มิลลิลิตร ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ และ 50 มิลลิลิตร สามารถระงับได้ด้วย

ปั่นเข้มข้นตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ลดลง ( ประมาณ 100 ~ 1 ) มุ่งอยู่ที่ปลาย
ของ 1-mm-wide Escherichia coli ริ้วกระจายทั่วเส้นผ่าศูนย์กลาง
ของ 100 x 15 มม. จานเพาะเชื้อที่มี NUMB3RS
ไม่ใช่ ( " : 15 กรัมวุ้นในน้ำเกลือ 1 ลิตรอะมีบา ,หน้า 1988 ) .
หลังจากการแช่เป็นเวลา 2 สัปดาห์ที่อุณหภูมิห้อง ( ประมาณ 23 " C )
อะมีบาถูกเก็บเกี่ยวโดยการล้างผิววุ้นกับ
อะมีบาน้ำเกลือและอะมีบาที่โตขึ้นจากที่
600x ใช้กล้องจุลทรรศน์เฟสคอน . ที่เป็นไปได้ , อะมีบา
กลุ่มคุณสมบัติทางกล้องจุลทรรศน์แสงใช้
แป้นของหน้า ( 1983 , 1988 ) ในหลายกรณี , การจำแนกชนิด ,
หรือแม้แต่สกุล ,เป็นไปไม่ได้โดยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน
ดังนั้นบางสายพันธุ์ที่แสดงเป็น morphotypes ( สันนิษฐานว่าแตกต่างกัน
ชนิด )