To evaluate relative growth efficie

To evaluate relative growth efficiency, the wild-type (WCFS1) and mutant strains NZ3410CM (ctsR::cat), NZ 3425CM (hrc::cat). and NZ3421CM (ctsR hrcA: cat) were inoculated at an OD600 of 0.1 in 96-well plates and incubated in MRS with or without 8% (vol/vol) ethanol at 20°C. The OD600 of the cultures was monitored spectophotomctrically (Safirc2: Tecan Austria GmbH, Grodig, Austria) in a robotic setup (Gencsis Workstation 150/8: Tecan Austria GmbH, Grodig. Austria). The significance of differences in growth rales of wild type and mutants was evaluated by analysis of variance (ANOVA) using R (http:/Awww.R-project.org). Differences were considered significant if P value was

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เพื่อประเมินประสิทธิภาพการเจริญเติบโตสัมพัทธ์ ป่าชนิด (WCFS1) และกลายพันธุ์สายพันธุ์ NZ3410CM (ctsR::cat), NZ 3425 ซม. (hrc::cat) และ NZ3421CM (ctsR hrcA: แมว) inoculated ในการ OD600 ของ 0.1 ในจาน 96 หลุม และได้รับการกกใน MRS มี หรือไม่ มีเอทานอล 8% (vol/vol) ที่อุณหภูมิ 20 องศาเซลเซียส OD600 ของวัฒนธรรมถูก spectophotomctrically ตรวจสอบ (Safirc2: Tecan GmbH ประเทศออสเตรีย Grodig ออสเตรีย) ในการตั้งค่าหุ่นยนต์ (สเต Gencsis 150/8: Tecan GmbH ประเทศออสเตรีย Grodig ประเทศออสเตรีย) ความสำคัญของความแตกต่างใน rales เจริญเติบโตของป่าชนิดและสายพันธุ์ถูกประเมิน โดยการวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) โดยใช้ R (http:/A www.R-project.org) ความแตกต่างของการพิจารณาว่าสำคัญถ้าค่า P < 0.05 การศึกษาการป้องกันข้าม ป่าชนิด L. บาซิลลัส woFS1 ถูกปลูกในนางในการขาดงานหรือการปรากฏตัวของเอทานอล 8% (vol/vol) จนการ OD600 1.0 ที่ 20๐ c เซลล์ถูกล้างใน PBS ก่อนที่จะสัมผัสกับความเครียดต่าง ๆ สำหรับทั้งหมดเครียดเผื่อ assays อนุกรมเจือจางตัวอย่างวจัดทันทีหลังจากสัมผัสต้นไม้ และเจือจางอนุกรมเหล่านี้ทันทีที่ชุบบนอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS Plales ได้รับการกกอัล 30๐ C 2 วันสำหรับการแจงนับ CFU ตามเทคนิคอธิบายไว้โดย Sieuwerts et al. (46) ยอมรับเครียดถูกกำหนดเมื่อระงับเซลล์ plantanum L. ใน PBS ที่ประกอบด้วย 40 มม.ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ความเข้มข้นซึ่งตายไป L. plantonun WCFS1 (52) เซลล์ที่ถูกเก็บรวบรวมทุก 5 นาทีสำหรับการแจงนับ CFU tor 60 นาที จะรอดบาซิลลัส L. ที่ pH ต่ำ ปริมาณเซลล์ที่เติบโตในนางหรือนาง with(vol/vol) เอทานอลถูกระงับใน PBS กับค่า pH (กรด โดย 5 M HCl) 2.4 การปรับปรุง และตัวอย่างต่อมาในช่วงเวลา 5 นาที ตาม ด้วยการประเมินจำนวนของเซลล์ทำงานได้ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น รับการประเมินความต้านทานความร้อนของป่า-ty กลายพันธุ์ L. plantanum วัฒนธรรมปลูกในนางในมีหรือไม่ของเอทานอล 8% (vol/vol) จนถึง OD600 1.0 หลังระงับเซลล์ใน PBS หรือ PBS ที่ประกอบด้วยเอทานอล 8% (vol/vol) ตาม ด้วยในเครื่อง thermocycler (Biometra Themocycler Westburg ประเทศเนเธอร์แลนด์) ที่อุณหภูมิต่อไปนี้: 37.0, 37.5, 39.1, 41.7, 44.4, 47.1, 49.9 และ 52.6๐ c ความอยู่รอดของเซลล์มีพิจารณาทุก 10 นาทีสำหรับ 60 นาที โดยการแจงนับ CFU การวิเคราะห์ระดับความอดทนความร้อนของ L. plantanum ถูกพล็อตค่า log10 ของเวลาและอุณหภูมิเมื่ออาณานิคมถึง 1% ของประชากรเดิม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อประเมินประสิทธิภาพการเจริญเติบโตของญาติป่าชนิด (WCFS1) และสายพันธุ์ที่กลายพันธุ์ NZ3410CM (ctsR :: แมว), NZ 3425CM (HRC :: แมว) และ NZ3421CM (ctsR hrcA: แมว) ถูกเชื้อที่ OD600 0.1 ในแผ่น 96 หลุมและบ่มใน MRS มีหรือไม่มี 8% (ปริมาตร / ปริมาตร) เอทานอลที่ 20 ° C OD600 ของวัฒนธรรมที่ได้รับการตรวจสอบ spectophotomctrically (Safirc2: Tecan Austria GmbH, โกรดิก, ออสเตรีย) ในการติดตั้งหุ่นยนต์ (Gencsis เวิร์คสเตชั่ 150/8. Tecan Austria GmbH, โกรดิกออสเตรีย) ความสำคัญของความแตกต่างใน rales การเจริญเติบโตของป่าประเภทกลายพันธุ์และการได้รับการประเมินโดยการวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) โดยใช้ R (http: /Awww.R-project.org) ความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญได้รับการพิจารณาว่าค่า P เป็น <0.05 การศึกษาข้ามการป้องกัน ป่าชนิด L. plantarum woFS1 ถูกปลูกใน MRS ในกรณีที่ไม่มีหรือการปรากฏตัวของเอทานอล 8% (ปริมาตร / ปริมาตร) จนกระทั่ง OD600 เป็น 1.0 200C เซลล์ที่ถูกล้างในพีบีเอสก่อนที่จะสัมผัสกับความเครียดต่างๆ สำหรับทุกการตรวจความทนทานต่อความเครียด, เจือจางอนุกรมของกลุ่มตัวอย่างได้จัดทำทันทีหลังจากได้รับปอยผมและเจือจางอนุกรมเหล่านี้ถูกชุบทันทีบน MRS agar Plales ถูกบ่มอั 300C เป็นเวลา 2 วันสำหรับการแจงนับ CFU ตามเทคนิคการอธิบายโดย Sieuwerts et al, (46) ความทนทานต่อความเครียด oxidative ถูกกำหนดเมื่อระงับลิตร plantanum เซลล์ในพีบีเอสที่มีขนาด 40 มมไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ความเข้มข้นซึ่งเป็นตายลิตร plantonun WCFS1 A (52) เซลล์ที่ถูกเก็บรวบรวมทุก 5 นาที 60 นาที Tor CFU แจงนับ ปริมาณ L. plantarum การอยู่รอดที่ pH ต่ำเซลล์ที่ปลูกใน MRS หรือ MRS กับ (ปริมาตร / ปริมาตร) เอทานอลที่ถูกระงับในพีบีเอสด้วยการปรับพีเอช 2.4 (กรด 5 M HCl) และต่อมาชิมในช่วงเวลา 5 นาทีตาม โดยการประเมินปริมาณของเซลล์ที่มีชีวิตตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ความต้านทานความร้อนของป่ากลายพันธุ์ TY ลิตรวัฒนธรรม plantanum ปลูกใน MRS ในการมีหรือไม่มีของ 8% (ปริมาตร / ปริมาตร) เอทานอลจน OD600 ถึง 1.0 ได้รับการประเมินหลังจากระงับเซลล์ในพีบีเอสหรือพีบีเอสที่มี 8% (ที่ปริมาตร / ปริมาตร) เอทานอลตามด้วยการบ่มใน thermocycler (Biometra Themocycler; Westburg, เนเธอร์แลนด์) ที่อุณหภูมิต่อไปนี้: 37.0, 37.5, 39.1, 41.7, 44.4, 47.1, 49.9 และ 52.60C การอยู่รอดของเซลล์ถูกกำหนดทุก 10 นาทีเป็นเวลา 60 นาทีโดย CFU แจงนับ การวิเคราะห์ระดับความอดทนความร้อนของแอล plantanum ที่ log10 คุณค่าของเวลาและอุณหภูมิเมื่อ 1% ของประชากรเดิมก็สามารถที่จะสร้างอาณานิคมถูกพล็อต

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อประเมินประสิทธิภาพของการเจริญเติบโตสัมพัทธ์ ของ ( wcfs1 ) และกลายพันธุ์สายพันธุ์ nz3410cm ( ctsr : : แมว ) , นิวซีแลนด์ 3425cm ( HRC : : แมว ) และ nz3421cm ( ctsr hrca : แมว ) เป็นเชื้อที่ od600 0.1 ใน 96 ดีแผ่น และบ่มในคุณมี หรือ ไม่มี 8 % ( ปริมาตร / ปริมาตร ) เอทานอล 20 ° C od600 ของวัฒนธรรมการ spectophotomctrically ( safirc2 : TECAN Austria GmbH , grodig ออสเตรีย ) ในการติดตั้งหุ่นยนต์ ( gencsis เวิร์กสเตชัน 150 / 8 : TECAN Austria GmbH , grodig . ออสเตรีย ) ความสำคัญของความแตกต่างใน rales การเจริญเติบโตของชนิดป่าและพันธ์ที่ประเมินโดยการวิเคราะห์ความแปรปรวน ( ANOVA ) โดยใช้ R ( http : / / ว้าย r-project . org ) ความแตกต่างที่สำคัญคือ หากพิจารณาค่า P < 0.05 การศึกษาการป้องกันข้าม ป่าชนิด L . plantarum wofs1 ปลูกในคุณในการขาดหรือการปรากฏตัวของเอทานอลร้อยละ 8 ( Vol / Vol ) จน od600 คือ 1.0 ที่ 20 ๐ C เซลล์มีการล้างใน PBS ก่อนที่แสงแรงๆ ให้สามารถทนความเครียดต่อเนื่อง วิธีการนำไปทันทีหลังจากการม้วนผมและเจือจางอนุกรมเหล่านี้ทันที นางชุบกับวุ้น plales ถูกบ่ม 30 ล ๐ C 2 วันสำหรับ CFU แจกแจงตามเทคนิคที่อธิบายไว้โดย sieuwerts et al . ( 46 ) ความอดทนความเครียดออกซิเดชันมุ่งมั่น เมื่อระงับล. plantanum เซลล์ใน PBS ที่มีไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ความเข้มข้น 40 มิลลิเมตร ซึ่งทำให้ผม plantonun wcfs1 ( 52 ) เซลล์มีการรวบรวมทุก 5 นาที 60 นาทีต่อเซลล์การแจกแจง ปริมาณ L . plantarum การอยู่รอดที่ pH ต่ำ เซลล์ที่ปลูกในนาง หรือนาง ( Vol / Vol ) เอทานอลหยุดชั่วคราวใน PBS ที่มีการปรับ pH 2.4 ( ปรับ 5 M HCl ) และต่อมาในที่ช่วงเวลา 5 นาที ตามด้วยการประเมินปริมาณเซลล์ได้ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น การต้านทานความร้อนของป่าไทกลายพันธุ์ . plantanum วัฒนธรรมปลูกคุณนายในการแสดงตนหรือขาด 8 % ( ปริมาตร / ปริมาตร ) เอทานอล จน od600 ถึง 1.0 ประเมินหลังจากระงับเซลล์ใน PBS หรือ PBS ที่มี 8 % ( ปริมาตร / ปริมาตร ) เอทานอล ตามด้วยการบ่มในเทอร์มอไซเคล ์ ( biometra westburg themocycler ; , เนเธอร์แลนด์ ) ที่อุณหภูมิ 35 37.5 , ดังต่อไปนี้ , 41.7 / ตามสินค้า , 49.9 และ 52.6 , ๐ C เซลล์รอดชีวิตกำหนดทุก 10 นาที 60 นาทีโดย CFU การแจกแจง เพื่อวิเคราะห์ระดับความอดทนความร้อนของ L . plantanum , LN ค่าของเวลาและอุณหภูมิเมื่อ 1% ของประชากรเดิม ก็สามารถฟอร์มอาณานิคมถูกวางแผน