selected and repeated to confirm po

selected and repeated to confirm polymorphisms. Bands were excised from polyacrylamide gel
and re-amplified using the following conditions: 94°C for 60 s, 35 cycles of 30 s denaturing at
94°C, 30 s annealing at 55°C and 60 s extension at 72°C, and finally 10 min at 72°C to complete
extension. The PCR products were purified using a HiYield Gel PCR DNA Fragment Extraction
Kit (RBC, Taiwan) and ligated to pGEM-T easy vector (Promega, USA). Ligated plasmids were
transformed with Escherichia coli XL1-blue competent cells. Recombinant clones were selected
and plasmid extraction performed using a High-Speed Plasmid Mini Kit (Geneaid, Taiwan), after
which, the plasmid was sent for sequencing at Bio-Basic (Canada). Sequence data were then edited
and searched for homology using BLAST (available at http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เลือก และทำซ้ำเพื่อยืนยัน polymorphisms วงถูก excised จาก polyacrylamide เจลและการขยายโดยใช้เงื่อนไขต่อไปนี้: 94 ° C 60 s รอบ 35 ของ denaturing s 30 ที่94° C, 30 s การอบเหนียวที่ 55° C และ 60 s ขยายที่ 72° C และสุดท้าย 10 นาทีที่ 72° C ให้เสร็จสมบูรณ์นามสกุล ผลิตภัณฑ์ PCR ได้บริสุทธิ์โดยใช้การ HiYield เจ PCR ดีเอ็นเอส่วนสกัดKit (RBC ไต้หวัน) และควบกับเวกเตอร์ง่าย pGEM T (Promega สหรัฐอเมริกา) Plasmids ควบได้แปลง ด้วย Escherichia coli XL1 บลูเซลล์มีอำนาจ เลือกโคลน recombinantและใช้ชุด Plasmid ขนาดเล็กความเร็วสูง (Geneaid ไต้หวัน), หลังจากสกัด plasmidซึ่ง plasmid ที่ส่งสำหรับลำดับที่ไบ-Basic (แคนาดา) ลำดับข้อมูลที่แก้ไขแล้วและค้นหา homology ใช้ระเบิด (มี http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เลือกและทำซ้ำเพื่อยืนยันความหลากหลาย คลื่นที่ถูกตัดจากเจลอะคริเลต
และขยายอีกครั้งโดยใช้เงื่อนไขต่อไปนี้: 94 ° C เป็นเวลา 60 วินาที, 35 รอบ 30 วินาที denaturing ที่
94 ° C, 30 วินาทีอบที่ 55 องศาเซลเซียสและ 60 S นามสกุลที่ 72 ° C และ ในที่สุด 10 นาทีที่ 72 องศาเซลเซียสเพื่อให้
การขยาย ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ถูกทำให้บริสุทธิ์โดยใช้เจล HiYield DNA PCR ส่วนสกัด
Kit (RBC ไต้หวัน) และ ligated เพื่อ pGEM-T ง่ายเวกเตอร์ (Promega, ประเทศสหรัฐอเมริกา) พลาสมิด ligated ถูก
เปลี่ยนด้วย Escherichia coli XL1 ฟ้าเซลล์ที่มีความสามารถ โคลน recombinant ได้รับการคัดเลือก
และการสกัดพลาสมิดดำเนินการโดยใช้ความเร็วสูงพลาสมิดมินิ Kit (Geneaid ไต้หวัน) หลังจาก
ที่พลาสมิดที่ถูกส่งสำหรับลำดับที่ Bio-ขั้นพื้นฐาน (แคนาดา) ข้อมูลลำดับถูกแก้ไขแล้ว
และค้นหาที่คล้ายคลึงกันโดยใช้ระเบิด (ใช้ได้ที่ http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เลือกซ้ำเพื่อยืนยันความหลากหลาย . วงดนตรีที่ถูกตัดจาก
เจลอะคริลาไมด์และขยายการใช้เงื่อนไขต่อไปนี้ : 94 ° C เป็นเวลา 60 วินาที , 3 รอบ 30 s ี่ที่ 94 ° C
30 S อบอ่อนที่อุณหภูมิ 55 องศา C และ 60 72 ° C ) , และสุดท้าย 10 นาทีที่ 72 ° C เพื่อให้
นามสกุล ผลิตภัณฑ์ทั้งหมดจะถูกใช้ hiyield เจลบริสุทธิ์โดยการสกัดดีเอ็นเอ
Kit ( RBC ,ไต้หวัน ) และผูกกับ pgem-t เวกเตอร์ที่ง่าย ( promega , USA ) ผูกพลาสมิดเป็น
เปลี่ยนกับเชื้อ Escherichia coli xl1 สีฟ้าที่มีเซลล์ โคลนยีนคัดเลือก
และการสกัดพลาสมิด โดยใช้ความเร็วสูง ใน Mini Kit ( geneaid , ไต้หวัน ) หลังจาก
ที่ พลาสมิดมาจัดลำดับที่ Bio พื้นฐาน ( แคนาดา ) ลำดับข้อมูลและแก้ไข
และการค้นหาที่มีการใช้ระเบิด ( ระเบิดได้ที่ http : / / ncbi . nlm . NIH . gov / ระเบิด CGI )