2.3. Extraction procedure for aflat

2.3. Extraction procedure for aflatoxins
The extraction of AFs from meat and egg samples was performed according to the method with some modifications. About 15 g sample was blended (20 min) with 50 ml of acetonitrileewater (45:05) and then sample was centrifuged for 5 min at 3000 rpm at the room temperature. Then 10 ml filtratewas diluted with 10 ml of deionized water and purified using an immunoaffinity column at a rate of 3e4 drops/s and washed with water (2 ml) twice at the same flow rate. Final elution was accomplished by passing 1.0 ml of methanol. Finally, the residue was evaporated with nitrogen stream at 40 C. After evaporation 100 ml TFA was added to derivatize AFB1 and AFG1. The samples were placed in the dark place (15 min) at room temperature with caps were on the vials. Then, 400 ml of acetonitrileewater (1:9, v/v) mixture was added to the vials. A 20 ml portion of the solution was subjected to LC analysis. The HPLC system used in present study was a Shimadzu (LC-10A series, Kyoto, Japan) equipped with fluorescence detector (RF-530). The chromatographic column was C18 Supelco Column (4.6  250 mm, 5 mm; Discovery, HS, Bellefonte,USA). The reverse phase mode with a mobile phase of acetonitrilee methanolewater (20:20:60, v/v/v) was used at a flow rate of 1 ml/
min. The wavelength of fluorescence detector was set at 360 (excitation) and 440 nm (emission).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3 การสกัดขั้นตอน aflatoxins
สกัดไปศึกษาจากตัวอย่างเนื้อและไข่ถูกดำเนินการตามวิธีการที่มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง ประมาณ 15 g อย่างถูกผสม (20 นาที) กับ 50 ml ของ acetonitrileewater (45:05) แล้ว มี centrifuged อย่างใน 5 นาทีที่ 3000 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิห้อง Filtratewas 10 ml ผสมกับ 10 ml น้ำ deionized และบริสุทธิ์ที่ใช้เป็นคอลัมน์ immunoaffinity ในอัตรา หยด/s 3e4 แล้วล้าง ด้วยน้ำ (2 ml) ที่อัตราการไหลเดียวกันสองครั้ง Elution สุดท้ายได้สำเร็จ โดยผ่าน 1.0 ml ของเมทานอล สุดท้าย สารตกค้างมีหายไปกับกระแสไนโตรเจนที่ 40 เซลเซียส หลังจากระเหย 100 มล TFA ถูกเพิ่มใน derivatize AFB1 และ AFG1 ตัวอย่างถูกเก็บไว้ในมืดมาเพลส (15 นาที) ที่อุณหภูมิห้องกับหมวก vials , 400 ml ส่วนผสม acetonitrileewater (1:9, v/v) ถูกเพิ่มเข้าไป vials ส่วน 20 ml ของการแก้ปัญหาถูกต้องวิเคราะห์ LC ระบบ HPLC ที่ใช้ในการศึกษาปัจจุบันถูกกับ Shimadzu (ชุด LC-10A เกียวโต ญี่ปุ่น) พร้อมกับจับ fluorescence (RF-530) คอลัมน์ chromatographic ถูกคอลัมน์ Supelco C18 (4.6 250 mm, 5 mm ค้นพบ HS, Bellefonte สหรัฐอเมริกา) โหมดย้อนขั้นตอนที่ มีระยะเคลื่อนที่ของ acetonitrilee methanolewater (20: 20:60, v/v/v) ใช้อัตราไหลของมล. 1 /
min มีการตั้งค่าความยาวคลื่นของเครื่องตรวจจับ fluorescence 360 (ในการกระตุ้น) และ 440 nm (มลพิษ)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 ขั้นตอนการสกัด AFLATOXINS
สกัด AFS จากตัวอย่างเนื้อสัตว์และไข่ที่ได้รับการดำเนินการตามวิธีการด้วยการปรับเปลี่ยนบางอย่าง ประมาณ 15 กรัมตัวอย่างได้รับการผสม (20 นาที) 50 มิลลิลิตร acetonitrileewater (45:05) และจากนั้นกลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการหมุนเหวี่ยงเวลา 5 นาทีที่ 3000 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิห้อง แล้ว 10 ml filtratewas เจือจางด้วย 10 ml ของน้ำกลั่นปราศจากไอออนและบริสุทธิ์โดยใช้คอลัมน์ immunoaffinity ในอัตรา 3E4 หยด / วินาทีและล้างด้วยน้ำ (2 มิลลิลิตร) สองครั้งที่อัตราการไหลเดียวกัน ชะสุดท้ายก็ประสบความสำเร็จโดยผ่าน 1.0 มิลลิลิตรของเมทานอล สุดท้ายที่เหลือได้รับการระเหยที่มีกระแสไนโตรเจนที่ 40 องศาเซลเซียส หลังจากการระเหย 100 ml TFA ถูกบันทึกอยู่ใน derivatize AFB1 และ AFG1 กลุ่มตัวอย่างที่อยู่ในที่มืด (15 นาที) ที่อุณหภูมิห้องที่มีหมวกอยู่บนขวด จากนั้น 400 มิลลิลิตร acetonitrileewater (1: 9 v / v) ส่วนผสมถูกบันทึกอยู่ในขวด ส่วน 20 มิลลิลิตรของการแก้ปัญหาที่ถูกยัดเยียดให้การวิเคราะห์ LC เป็นระบบ HPLC ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ (ชุด LC-10A, เกียวโต, ญี่ปุ่น) Shimadzu พร้อมกับเครื่องตรวจจับแสง (RF-530) คอลัมน์โครมาเป็นคอลัมน์ C18 Supelco (4.6 250 มม, 5 มม? ค้นพบ HS, เบลลาฟอน, USA) โหมดขั้นตอนการย้อนกลับกับเฟสเคลื่อนที่ของ methanolewater acetonitrilee (20:20:60, v / v / v) ถูกนำมาใช้ในอัตราการไหล 1 มล /
นาที ความยาวคลื่นของเครื่องตรวจจับแสงตั้งอยู่ที่ 360 (การกระตุ้น) และ 440 นาโนเมตร (ปล่อย)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 ขั้นตอนการสกัดสำหรับซิน
การสกัด AFS จากเนื้อและไข่ตัวอย่างการปฏิบัติตามวิธีการ มีการปรับเปลี่ยน ตัวอย่างประมาณ 15 กรัม ผสม ( 20 นาที ) กับ 50 มิลลิลิตร acetonitrileewater ( 45:05 ) จากนั้นศึกษาระดับ 5 นาทีที่ 3 , 000 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิห้อง .แล้ว 10 filtratewas มล. เจือจางด้วย 10 ml ของน้ำบริสุทธิ์คล้ายเนื้อเยื่อประสานและใช้ immunoaffinity คอลัมน์ในอัตรา 3e4 หยด / s และล้างด้วยน้ำ ( 2 มล. ) สองครั้งที่อัตราการไหลเท่ากัน ( สุดท้ายได้ โดยผ่าน 1.0 มิลลิลิตรของเมทานอล สุดท้ายที่เหลือคือระเหยกับกระแสไนโตรเจน 40  C หลังจากการระเหย 100 มล. เติม derivatize กรดไขมันและสาร afg1 .ตัวอย่างถูกวางไว้ในที่มืด ( 15 นาที ) ที่อุณหภูมิห้องด้วยตัวพิมพ์ใหญ่ในขวดนั่น แล้ว acetonitrileewater 400 มิลลิลิตร ( 1 : 9 V / V ) ส่วนผสมก็เพิ่มยามา ส่วน 20 มิลลิลิตรของสารละลายภายใต้การวิเคราะห์ของ LC . พบระบบที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ คือ ชิมัตสึ ( lc-10a ชุด , เกียวโต , ญี่ปุ่น ) อุปกรณ์ตรวจจับการเรืองแสง ( rf-530 )คอลัมน์ คือ คอลัมน์โครมาโตก c18 supelco ( 4.6  250 มม. 5 มม. ; การค้นพบ , HS bellefonte , USA ) กลับเฟสด้วยโหมดระยะเคลื่อนที่ของ acetonitrilee methanolewater ( 20:20:60 , V / V / V ) คือใช้ที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาที เครื่องตรวจจับการเรืองแสง
แสงไว้ที่ 360 ( กระตุ้น ) และ nm 440 ( มลพิษ )