For recombinant protein purificatio

For recombinant protein purification, the bacteria resulting from a large-scale culture (500 mL) were pelleted by centrifugation and resuspended in a washing buffer (200 mM NaH2PO4; 500 mM NaCl, 5 mM Imidazole; 8 M Urea pH 8.0) with 100 mg/mL lysozyme, sonicated five times for fifteen seconds (20 KHz) and maintained under agitation at 4°C for 16 h. The recombinant protein was purified using the HisTrapTM HP (GE Healthcare, USA) affinity chromatography column followed by dialysis in a cellulose tube-based system (Sigma, USA).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สำหรับฟอก recombinant โปรตีน แบคทีเรียที่เกิดจากวัฒนธรรมขนาดใหญ่ (500 มล.) ได้ pelleted โดย centrifugation resuspended ในล้างบัฟเฟอร์ (200 mM NaH2PO4; 500 มม. NaCl, 5 มม.อิมิดาโซล 8 M Urea pH 8.0) มี lysozyme 100 mg/mL, sonicated ห้าครั้งใน 15 วินาที (20 KHz) และยังคงอยู่ภายใต้อาการกังวลต่อที่ 4° C สำหรับ 16 h Recombinant โปรตีนที่บริสุทธิ์โดยใช้คอลัมน์ความสัมพันธ์ HisTrapTM HP (GE แพทย์ สหรัฐอเมริกา) chromatography ตามหน่วยในเซลลูโลสตามท่อระบบ (ซิก สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สำหรับการทำให้บริสุทธิ์โปรตีนแบคทีเรียที่เกิดจากวัฒนธรรมขนาดใหญ่ (500 มิลลิลิตร) ถูกเม็ดโดยการหมุนเหวี่ยงและ resuspended ในบัฟเฟอร์ซักผ้า (ไม่เกิน 200 มิลลิ NaH2PO4 500 มิลลิโซเดียมคลอไรด์, 5 มิลลิ Imidazole 8 M ยูเรียมีค่า pH 8.0) 100 มิลลิกรัม / mL lysozyme, sonicated ครั้งที่ห้าสิบห้าวินาที (20 KHz) และการบำรุงรักษาภายใต้การกวนที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 16 ชั่วโมง โปรตีนบริสุทธิ์โดยใช้ HisTrapTM กับเอชพี (GE Healthcare, ประเทศสหรัฐอเมริกา) คอลัมน์โครมาเป็นพี่น้องกันตามด้วยการล้างไตในระบบที่ใช้หลอดเซลลูโลส (Sigma, ประเทศสหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สำหรับ รีคอมบิแนนท์โปรตีนบริสุทธิ์ แบคทีเรียที่เกิดจากวัฒนธรรมขนาดใหญ่ ( 500 มล. ) โดยปั่นเม็ดและใน resuspended ล้างบัฟเฟอร์ ( 200 มม. nah2po4 ; 500 mM NaCl , 5 มม. อิมิดาโซล ; 8 M ยูเรีย pH 8.0 ) 100 มก. / มล. และไลโซไซม์ sonicated ห้าครั้ง , 15 วินาที ( 20 kHz ) และรักษา 4 ° C ในการกวนที่ 16 ชั่วโมงโปรตีนรีคอมบิแนนท์โปรตีนโดยใช้ histraptm HP ( GE Healthcare , USA ) คอลัมน์ขี้รังแคตามด้วยหลอดไตในเซลลูโลสที่ใช้ระบบ ( Sigma , USA )