Flow cytometry analysis with annexi

Flow cytometry analysis with annexin V–FITC/PI double
staining showed that acrolein 50 mM increased apoptosis and
necrosis in HMEECs. Cells were incubated in the absence of
acrolein for 24 h (control) or in the presence of 10 mM acrolein for
24 h and 50 mM acrolein for 24 h. Undamaged cells were stained
with negative annexin V–FITC/PI (bottom left quadrant). After
incubation with 50 mM acrolein for 24 h, circa three-fold more
apoptotic cells compared to controls were stained positively with
annexin V–FITC and negatively with PI (bottom right quadrant),
and advanced apoptotic cells were stained by annexin V–FITC and
PI (upper right quadrant). At 100 mM acrolein, the cells were no
longer viable (Fig. 2).
The loss of viability of HMEECs was determined by evaluating
the nuclear morphology using Hoechst 33342 staining. The nuclei
of normal control cells were round with homogeneous intensity
(Fig. 3A). However, addition of 50 mM acrolein resulted in nuclei

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โฟวิเคราะห์ด้วย Annexin v-fitc/pi คู่
แสดงให้เห็นว่าการย้อมสี acrolein 50 มม. และการตายของเซลล์เนื้อร้าย
ที่เพิ่มขึ้นใน hmeecs เซลล์ที่ถูกบ่มในกรณีที่ไม่มี
acrolein เวลา 24 ชั่วโมง (ควบคุม) หรือในที่ที่มี 10 มม. สำหรับ acrolein
24 ชั่วโมงและ 50 มม. acrolein เวลา 24 ชั่วโมง เซลล์ที่เสียหายมีการย้อมด้วย
v-fitc/pi Annexin ลบ (ด้านล่างซ้าย) หลังจาก
บ่มกับ 50 มม. acrolein เวลา 24 ชั่วโมงประมาณสามเท่าเซลล์ apoptotic เพิ่มเติม
เทียบกับการควบคุมมีการย้อมบวกกับ Annexin
v-fitc และลบกับปี่ (ด้านล่างขวา)
และเซลล์ apoptotic ขั้นสูงมีการย้อมด้วย Annexin วี ปี่ fitc และ
(ด้านขวาบน) ที่ 100 มิลลิเมตร acrolein เซลล์ไม่มี
ทำงานได้อีกต่อไป (รูปที่ 2).
การสูญเสียของชีวิตของ hmeecs ถูกกำหนดโดยการประเมิน
สัณฐานนิวเคลียร์ใช้ Hoechst 33342 การย้อมสี นิวเคลียสของเซลล์
ควบคุมปกติอยู่ล้อมรอบด้วยเหมือนกันความเข้ม
(รูปที่ 3a) แต่นอกเหนือจาก 50 มม. acrolein ผลในนิวเคลียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ขั้นตอนการวิเคราะห์เซลล์ ด้วย annexin คู่ V–FITC/PI
ย้อมสีพบว่า acrolein apoptosis 50 มม.เพิ่ม และ
การตายเฉพาะส่วนใน HMEECs เซลล์ถูก incubated ของ
acrolein ใน 24 h (ควบคุม) หรือในต่อหน้า ของ acrolein 10 มม.สำหรับ
สี 24 ชมและ 50 mM acrolein สำหรับเซลล์ที่ไม่เสียหาย 24 h.
ด้วย annexin PI V–FITC (ล่างควอดร้อนท์การซ้ายคอนโซล) ลบ หลังจาก
บ่ม มี acrolein 50 มม.สำหรับ 24 ชม เซอร์กาเพิ่มเติม three-fold
apoptotic เซลล์เปรียบเทียบกับตัวควบคุมถูกสีบวกกับ
annexin V–FITC และส่งผลเสีย กับ PI ควอด (ล่างขวาร้อนท์),
และเซลล์ apoptotic ขั้นสูงมีสี ด้วย annexin V–FITC และ
PI (ควอดร้อนท์ขวาด้านบน) ได้ที่ 100 มม. acrolein เซลล์ไม่
อีกต่อไปได้ (Fig. 2) .
กำหนด โดยประเมินการสูญเสียชีวิตของ HMEECs
สัณฐานวิทยานิวเคลียร์ที่ใช้อย่างไร Hoechst 33342 ย้อมสี แอลฟา
ปกติควบคุม เซลล์ถูกกับ
(Fig. 3A) ความเข้มเหมือนกัน อย่างไรก็ตาม แห่ง acrolein 50 มม.ให้แอลฟา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวิเคราะห์ cytometry ไหล annexin V - fitc / PI แบบเตียงนอนเดี่ยวขนาดใหญ่หนึ่งเตียง
เกิดรอยเปื้อนควรแสดงให้เห็นว่า 50 มม. acrolein apoptosis เพิ่มขึ้นและ
necrosis ใน hmeecs เซลล์เป็น incubated ในกรณีที่
acrolein สำหรับ 24 ชั่วโมง(ควบคุม)หรือในการมีอยู่ของ acrolein 10 มม.สำหรับ
acrolein 24 ชั่วโมงและ 50 มม.สำหรับ 24 ชั่วโมง เซลล์ไม่ชำรุดเสียหายมีแต้มสี
ด้วยด้านลบ annexin V - fitc / PI (บริเวณด้านซ้ายด้านล่าง) หลังจาก
ตามมาตรฐานอบพร้อมด้วย 50 มม. acrolein สำหรับ 24 ชั่วโมง,ราวๆสามเท่า
apoptotic มากขึ้นเซลล์เมื่อเทียบกับการควบคุมการมีแต้มสีในเชิงบวกด้วย
annexin V - fitc และส่งผลกระทบในทางลบกับ PI (บริเวณด้านล่างขวา),
และขั้นสูง apoptotic เซลล์มีแต้มสีโดย annexin V - fitc และ
PI (ขวาบนหนึ่งในสี่ของเส้นรอบวงกลม) 100 มม.ที่ acrolein เซลล์ที่ไม่มี
ซึ่งจะช่วยแก้ปัญหาได้อีกต่อไป(รูปที่ 2 )..
การสูญเสียความอยู่รอดของ hmeecs ก็ถูกกำหนดโดยการประเมิน
รูปร่างลักษณะของหินนิวเคลียร์โดยใช้ 33342 เกิดรอยเปื้อนควร hoechst
ซึ่งจะช่วยเป็นแกนกลางของเซลล์ปกติการควบคุมเป็นไปด้วยความเข้มข้นเป็นเนื้อเดียวกัน
(รูปที่ 3 A ) อย่างไรก็ตามการเพิ่ม 50 acrolein มม.ส่งผลให้ในจุดศูนย์กลาง