b-Galactosidase assays. b-Galactosi

b-Galactosidase assays. b-Galactosidase activity was measured at
30 uC as previously described (Trotochaud & Wassarman, 2004), and
activity is expressed in Miller units (DOD420 min21 per OD600 unit)
(Miller, 1972). Briefly, cultures inoculated from a single colony were
grown for 18 h in RDM, diluted approximately 1 : 100 in fresh
medium (to OD600 0.04) and grown for 24 h, at which time they were
analysed (24 h time point) or rediluted into fresh medium (1 : 100)
and grown for an additional 6 h prior to analysis (6 h time point).
Cell growth was at 37 uC for all strain backgrounds except those
containing the hisG–lacZ reporter, which was at 30 uC as it is a
‘system I’ lysogen that is temperature-sensitive (Rao et al., 1994). For
b-galactosidase assays, cells were lysed with SDS and chloroform. At
least three independent cultures per strain were used per experiment,
and experiments were repeated at least three times.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

b-Galactosidase assays กิจกรรม b-Galactosidase โดยวัดที่30 uC ตามที่เคยอธิบายไว้ (Trotochaud & Wassarman, 2004), และกิจกรรมจะแสดงในหน่วยมิลเลอร์ (DOD420 min21 ต่อ OD600 หน่วย)(Miller, 1972) สั้น ๆ วัฒนธรรม inoculated จากอาณานิคมเดียวได้ปลูกสำหรับ h 18 ใน RDM เจือจางประมาณ 1:100 ในสดปานกลาง (ไป OD600 0.04) และเติบโตใน 24 ชม ในขณะที่พวกเขาได้วิเคราะห์ (จุดของเวลา 24 ชั่วโมง) หรือ rediluted ในกลางสด (1:100)และปลูกสำหรับการเพิ่มเติม 6 h ก่อนวิเคราะห์ (จุดเวลา 6 ชม.)เติบโตของเซลล์คือเวลา 37 uC สำหรับพันธุ์พื้นหลังทั้งหมดยกเว้นที่ประกอบด้วยผู้รายงาน hisG – lacZ ซึ่งที่ 30 uC ก็มี' ระบบฉัน ' lysogen ที่ไวต่ออุณหภูมิ (Rao et al. 1994) สำหรับb-galactosidase assays เซลล์ได้นาทีที่ 37uc SDS และคลอโรฟอร์ม ที่ใช้ต่อทดลอง วัฒนธรรมอิสระอย่างน้อยสามต่อสายพันธุ์และการทดลองซ้ำกันอย่างน้อยสามครั้ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

B-Galactosidase ตรวจ กิจกรรม B-Galactosidase วัดที่
30 UC ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Trotochaud & Wassarman, 2004) และ
กิจกรรมที่จะแสดงในหน่วยมิลเลอร์ (DOD420 min21 ต่อ OD600 หน่วย)
(มิลเลอร์ 1972) สั้น ๆ , วัฒนธรรมเชื้อจากการเป็นอาณานิคมเดี่ยว
ปลูก 18 ชั่วโมงใน RDM เจือจางประมาณ 1: 100 ในผลไม้สด
ขนาดกลาง (เพื่อ OD600 0.04) และเติบโตขึ้นเป็นเวลา 24 ชั่วโมงเวลาที่พวกเขาได้รับ
การวิเคราะห์ (จุดเวลา 24 ชั่วโมง) หรือ rediluted เข้า กลางสด (1: 100)
. และปลูกเพิ่มอีก 6 ชั่วโมงก่อนที่จะมีการวิเคราะห์ (6 ชั่วโมงจุดเวลา)
การเจริญเติบโตของเซลล์ที่ 37 UC สำหรับทุกพื้นหลังความเครียดยกเว้นผู้
ที่มีนักข่าว hisG-lacZ ซึ่งเป็นวันที่ 30 UC เป็นมัน เป็น
ระบบ I 'lysogen ที่มีความไวต่ออุณหภูมิ (ราว et al., 1994) สำหรับ
การตรวจ B-galactosidase เซลล์ถูก lysed ระบบ SDS และคลอโรฟอร์ม ที่
อย่างน้อยสามวัฒนธรรมที่เป็นอิสระต่อสายพันธุ์ถูกนำมาใช้ต่อการทดสอบ
และทดลองซ้ำแล้วซ้ำอีกอย่างน้อยสามครั้ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

b-galactosidase ) . กิจกรรม b-galactosidase วัดที่30 UC ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( trotochaud & wassarman , 2004 )กิจกรรมจะแสดงในหน่วย มิลเลอร์ ( dod420 min21 ต่อ od600 หน่วย )( มิลเลอร์ , 1972 ) สั้น ๆ วัฒนธรรม เชื้อจากกลุ่มเดียวคือโต 18 H ใน rdm , เจือจางประมาณ 1 : 100 ใน สดขนาดกลาง ( od600 0.04 ) และเติบโตขึ้นใน 24 ชั่วโมง ในเวลาที่พวกเขาวิเคราะห์ ( จุดที่เวลา 24 ชั่วโมง ) หรือ rediluted ลงในสื่อสด ( 1 : 100 )และเติบโตในอีก 6 ชั่วโมงก่อนการวิเคราะห์ ( 6 ชม. เวลาจุด )การเจริญเติบโตของเซลล์ อยู่ที่ 37 เป็นต้น ทุกสายพันธุ์ ยกเว้นผู้ภูมิหลังที่มี hisg – lacz นักข่าวซึ่งอยู่ที่ 30 UC เป็น" ระบบ " lysogen ที่มีความไวต่ออุณหภูมิ ( Rao et al . , 1994 ) สำหรับb-galactosidase ) เซลล์มี lysed กับ SDS และคลอโรฟอร์ม ที่อย่างน้อยสามอิสระวัฒนธรรมต่อสายพันธุ์ที่ใช้ต่อทดลองและการทดลองเป็นเวลาอย่างน้อยสามครั้ง