In the present study alkaline prote

In the present study alkaline proteases were precipitated with
ethanol at concentrations of 0–30% (v/v) and 30–70% (v/v) to partial
purification. The highest enzymatic recovery was observed in Fraction
F2 (30–70%, v/v, of ethanol concentration), presenting purification
and yield of 2.6-fold and 74.9%, respectively. The result of the
purification procedure was a clear preparation, which allowed the
concentration of the enzyme, with no trace of the typical fish smell.
Furthermore, the 30–70% ethanol precipitate (Fraction 2) contained
about 75% of specific activity (2926 U/g of tissue) when compared
to the crude extract (3906 U/g of tissue). The ethanol is known as
an important protein industrial precipitant (Cortez & Pessoa,
1999) and when used in this way its residue may be easily industrially
recovery by simple techniques such as flash evaporator (Gosh &
Ghose, 2003).
The electrophoresis and zymogram of the crude extract and
Fraction F2 are presented in Fig. 1. The standard protein markers
of different molecular weights and the proteins of the crude extract
and Fraction F2 are displayed in lane 1, 2 and 3, respectively. Their
proteolytic activities on casein are also shown (zymogram) in lane
4 (crude extract) and 5 (Fraction F2). As can be observed in this figure,
the ethanol precipitation protocol was partially able to purify
and concentrate three major proteins with proteolytic activity
from the crude extract. They presented molecular weights of
40.8, 35.5 and 22.7 kDa and two other smaller proteases presented
molecular weights of between 14 kDa and 22.7 kDa. In fact, a mixture
of proteases rather than purified preparations is usually employed
in the food and detergent industries (Rao et al., 1998).
The effect of pH on the proteolytic enzyme is shown in Fig. 2a.
The proteases of the ethanol Fraction F2 obtained from the tambaqui
pyloric caeca and intestine displayed maximum activities at
a pH range of 10 to 12. The tambaqui proteases were also stable
over a pH range of 10–12.5 (Fig. 2b). One of the most important
parameters for selecting proteases for detergents is the optimum
pH. The desired pH of a detergent solution in which proteases
work should be approximately the same as the optimum pH
for the enzyme (Gupta et al., 2002). Since the pH of laundry detergents
is commonly alkaline (Banerjee et al., 1999), protease and
other enzymes currently used in detergent compositions should
be alkaline in nature with a high optimum pH. These properties
were displayed by the tambaqui proteases purified by ethanol
precipitation.
Fig. 3a shows the effect of temperature on the tambaqui protease
activities. An optimum activity was encountered at 60 C. Furthermore,
they remained thermally stable as they retained about 86%
of the activity after being incubated at the optimum temperature
(60 C), for 30 min (Fig. 3b). This result is similar to that described
for proteases from Bacillus brevis (Banerjee et al., 1999). Moreover,
about 60% of the maximum activity was retained after incubation
for 30 min at 30 C which is desirable for laundry purposes and from
the ecological and economical point of view, mainly, because saving
of energy.
All detergent-compatible enzymes are alkaline with a high optimum
pH and are thermally stable. These are important characteristics
because the pH of laundry detergent generally ranges between 9.0 and 12.0 and the thermal stability of these alkaline enzymes
usually varies between 50 and 60 C (Moreira et al., 2002).
Specific substrate and protease inhibitors were employed to
identify the presence of trypsin-like and chymotrypsin-like enzymes
in the ethanol-precipitated proteases from the tambaqui
pyloric caeca and intestines. Proteases acting on BApNA
(1.59 mU mL–1) were strongly inhibited by Benzamidine (100%)
and TLCK (98%), classical trypsin-like inhibitors, whereas those
hydrolyzing Suc-Phe-p-Nan (0.04 mU mL–1) were strongly inhibited
by TPCK (100%), a typical chymotrypsin inhibitor. However,
the results suggest that the trypsin-like enzyme is the major protease
in the preparation (about 40 times higher). The BApNA and
Suc-Phe-p-Nan proteolysis were, respectively, inhibited 54% and
96% by PMSF, a serine protease inhibitor. Similar results are frequently
observed for other tropical fish proteases (Alencar et al.,
2003; Bezerra et al., 2005).
Many parameters are involved in selecting a protease for detergents,
such as compatibility with detergent components, e.g., surfactants,
perfumes and bleaches (Gupta, Gupta, Saxena, & Khan,
1999; Kumar, Malik, & Tiwari, 1998). Tambaqui proteases were assayed
in the presence of non-ionic (Tween 20 and Tween 80) and ionic surfactants (saponin and sodium choleate) using azocasein
as substrate.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในการศึกษาปัจจุบัน proteases ด่างถูกตกตะกอนด้วยเอทานอลที่ความเข้มข้น 0-30% (v/v) และ 30 – 70% (v/v) ไปบางส่วนทำให้บริสุทธิ์ การกู้คืนเอนไซม์สูงสุดถูกตรวจสอบในส่วนF2 (30 – 70%, v/v ของความเข้มข้นของเอทานอล), นำเสนอทำให้บริสุทธิ์และผลผลิตของ 2.6-fold และ 74.9% ตามลำดับ ผลของการกระบวนการทำให้บริสุทธิ์เป็นการเตรียมล้าง ซึ่งได้รับอนุญาตการความเข้มข้นของเอนไซม์ น้ำคาวปลาปกติไม่นอกจากนี้ การมีอยู่ของตะกอนเอทานอล 30 – 70% (2 ส่วน)ประมาณ 75% ของกิจกรรมเฉพาะ (2926 U/g ของเนื้อเยื่อ) เมื่อเปรียบเทียบการดิบแยก (3906 U/g ของเนื้อเยื่อ) เอทานอลที่เรียกว่าprecipitant อุตสาหกรรมเป็นโปรตีนที่สำคัญในการตรวจสอบ (Cortez & Pessoaปี 1999) และเมื่อใช้วิธีนี้ อาจมีสารตกค้างของได้ทัดกู้คืน โดยเทคนิคง่าย ๆ เช่นแฟลชระเหย (Gosh &Ghose, 2003)อิและ zymogram ของสารสกัดหยาบ และส่วน F2 จะแสดงในรูปที่ 1 หมายของโปรตีนมาตรฐานของน้ำหนักโมเลกุลที่แตกต่างและโปรตีนของสารสกัดหยาบและเศษส่วน F2 จะแสดงในช่อง 1, 2 และ 3 ตามลำดับ ของพวกเขากิจกรรมได้ในส่วนที่แสดง (zymogram) ในเลน4 (แยกน้ำมันดิบ) และ 5 (เศษส่วน F2) เป็นจะสังเกตได้จากรูปนี้โพรโทคอลฝนเอทานอลได้บางส่วนทำให้บริสุทธิ์และเข้มข้นโปรตีนหลักสามกับกิจกรรมได้สารสกัดหยาบจาก ปรากฏน้ำหนักโมเลกุลของ40.8, 35.5 และ 22.7 kDa และ proteases เล็กสองอื่น ๆ นำเสนอน้ำหนักโมเลกุลของระหว่าง 14 kDa และ 22.7 kDa ในความเป็นจริง ส่วนผสมของ proteases มากกว่าบริสุทธิ์เตรียมจะมักใช้ในอุตสาหกรรมอาหารและผงซักฟอก (Rao et al. 1998)ผลของการวัดค่า pH บนเอนไซม์ได้แสดงในรูป 2aProteases ของเอทานอลส่วน F2 ที่ได้รับจากการ tambaquiแสดงกิจกรรมสูงสุดที่ pyloric caeca และลำไส้ช่วงการวัด 10 กับ 12 Tambaqui proteases ก็มั่นคงผ่านช่วงค่า pH 10-12.5 (รูปที่ 2b) หนึ่งสำคัญที่สุดพารามิเตอร์สำหรับการเลือก proteases สำหรับผงซักฟอกมีประสิทธิภาพสูงสุดpH ค่า pH ที่ต้องการของโซลูชันใน proteases ซึ่งผงซักฟอกงานควรจะประมาณเหมือนกับ pH ที่เหมาะสมสำหรับเอนไซม์ (Gupta et al. 2002) ตั้งแต่ pH ของผงซักฟอกซักรีดมีอัลคาไลน์ทั่วไป (Banerjee et al. 1999), รติเอส และอื่น ๆ เอนไซม์ที่ใช้ในองค์ประกอบผงซักฟอกควรเป็นด่างในธรรมชาติมีค่า pH ที่เหมาะสมสูง คุณสมบัติเหล่านี้ถูกแสดง โดย proteases tambaqui ที่บริสุทธิ์ โดยเอทานอลฝนรูป 3a แสดงผลอุณหภูมิรติเอส tambaquiกิจกรรม พบกิจกรรมที่เหมาะสมที่ 60 c นอกจากนี้พวกเขายังคงอย่างพวกเขาสะสมประมาณ 86%กิจกรรมหลังจากการได้รับการกกที่อุณหภูมิที่เหมาะสม(60 C), สำหรับผู้เดินทางคนเดียว (รูปที่ 3b) ผลลัพธ์นี้เป็นเหมือนกับที่อธิบายไว้สำหรับ proteases จากบาซิลลัสเอกซ์เทนเซอร์ (Banerjee et al. 1999) นอกจากนี้ประมาณ 60% ของกิจกรรมสูงสุดถูกเก็บไว้หลังจากบ่ม30 นาทีที่ 30 C ซึ่งเป็นสิ่งที่ต้องประสงค์ซัก และจากระบบนิเวศ และประหยัดจุดของมุมมอง ส่วนใหญ่ เนื่องจากบันทึกพลังงานทั้งหมดเข้ากันได้กับผงซักฟอกเอนไซม์มีอัลคาไลน์ด้วยความสูงค่า pH และอย่างมี มีลักษณะสำคัญเนื่องจากค่า pH ของผงซักฟอกโดยทั่วไปช่วงระหว่าง 9.0 และ 12.0 และความร้อนเสถียรภาพของเอนไซม์อัลคาไลน์เหล่านี้มักจะแตกต่างกันระหว่าง 50 และ 60 C (Moreira et al. 2002)น้ำยาป้องกันพื้นผิวและรติเอสเฉพาะถูกจ้างระบุสถานะของเอนไซม์ทริปซินเหมือน และ chymotrypsin เหมือนใน proteases นอตกตะกอนจากการ tambaquipyloric caeca และลำไส้ Proteases ใน BApNA(1.59 หมู่มล. – 1) ขอถูกยับยั้ง โดย Benzamidine (100%)และ TLCK (98%), น้ำยาป้องกันเช่นทริปซินคลาสสิก ในขณะที่hydrolyzing Suc-เพ-p-น่าน (หมู่ 0.04 mL-1) ได้ยับยั้งขอโดย TPCK (100%), ยับยั้ง chymotrypsin ทั่วไป อย่างไรก็ตามผลลัพธ์แนะนำเอนไซม์ทริปซินเหมือนว่ารติเอสสำคัญในการเตรียมการ (สูงประมาณ 40 ครั้ง) BApNA และSuc เพ p น่าน proteolysis ได้ ตามลำดับ ยับยั้ง 54% และ96% โดย PMSF ยับยั้งการรติเอสรอบเส้นใยประสาท ผลคล้ายเป็นบ่อยสังเกตเห็น proteases ปลาอื่น ๆ (Alencar et al.,2003 Bezerra et al. 2005)หลายพารามิเตอร์เกี่ยวข้องในการเลือกรติเอสสำหรับผงซักฟอกเช่นความเข้ากันได้กับส่วนประกอบผงซักฟอก เช่น surfactantsน้ำหอมและสารฟอกขาว (Gupta, Gupta, Saxena และ คานปี 1999 Kumar มาลิค & Tiwari, 1998) มี assayed Tambaqui proteasesในปัจจุบันไม่ใช่ไอออน (20 แต่ถึงแต่ 80) และ surfactants ไอออน (choleate ซาโปนิและโซเดียม) โดยใช้ azocaseinเป็นพื้นผิว

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในปัจจุบันการศึกษาโปรตีเอสอัลคาไลน์ที่ถูกตกตะกอนด้วย
เอทานอลที่ความเข้มข้น 0-30% (v / v) และ 30-70% (v / v) บางส่วน
ทำให้บริสุทธิ์ การฟื้นตัวของเอนไซม์สูงสุดพบว่าในเศษส่วน
F2 (30-70% v / V ของความเข้มข้นของเอทานอล) นำเสนอการทำให้บริสุทธิ์
และผลผลิตของ 2.6 เท่าและ 74.9% ตามลำดับ ผลของ
ขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์เป็นการเตรียมความพร้อมที่ชัดเจนซึ่งได้รับอนุญาตให้
มีความเข้มข้นของเอนไซม์ที่มีร่องรอยของกลิ่นปลาทั่วไปไม่มี.
นอกจากนี้ตะกอนเอทานอล 30-70% (เศษ 2) ที่มีอยู่
ประมาณ 75% ของกิจกรรมโดยเฉพาะ (2,926 U / กรัมของเนื้อเยื่อ) เมื่อเปรียบเทียบ
กับสารสกัดหยาบ (3906 U / กรัมของเนื้อเยื่อ) เอทานอลเป็นที่รู้จักกันเป็น
โปรตีนที่สำคัญอุตสาหกรรมใจเร็วด่วน (คอร์เตซ & Pessoa,
1999) และเมื่อใช้วิธีนี้ตกค้างของมันอาจจะเป็นอุตสาหกรรมได้อย่างง่ายดาย
กู้คืนโดยเทคนิคง่ายๆเช่นแฟลชระเหย (เอ้ &
Ghose, 2003).
electrophoresis และ zymogram ของ สารสกัดหยาบและ
เศษส่วน F2 จะถูกนำเสนอในรูป 1. เครื่องหมายโปรตีนมาตรฐาน
ของน้ำหนักโมเลกุลที่แตกต่างกันและโปรตีนของสารสกัดจากน้ำมันดิบ
และเศษส่วน F2 จะแสดงในช่องทางที่ 1, 2 และ 3 ตามลำดับ ของพวกเขา
กิจกรรมโปรตีนเคซีนบนจะแสดงยัง (zymogram) ในช่องทาง
ที่ 4 (สารสกัดหยาบ) และ 5 (เศษ F2) ในฐานะที่สามารถสังเกตได้ในรูปนี้
โปรโตคอลเอทานอลเป็นบางส่วนตกตะกอนสามารถในการชำระล้าง
และมีสมาธิสามโปรตีนสำคัญกับกิจกรรมโปรตีน
จากสารสกัดหยาบ พวกเขานำเสนอน้ำหนักโมเลกุลของ
40.8, 35.5 และ 22.7 กิโลดาลตันและสองโปรตีเอสขนาดเล็กอื่น ๆ ที่นำเสนอ
น้ำหนักโมเลกุลของระหว่างวันที่ 14 กิโลดาลตันและ 22.7 กิโลดาลตัน ในความเป็นจริงที่มีส่วนผสม
ของโปรตีเอสมากกว่าการเตรียมบริสุทธิ์มักจะถูกนำมาใช้
ในอาหารและผงซักฟอกอุตสาหกรรม (ราว et al., 1998).
ผลกระทบของค่า pH ในเอนไซม์จะถูกแสดงในรูป 2a.
โปรตีเอสของเอทานอล F2 เศษที่ได้จากปลาคู้ดำ
caeca กระเพาะอาหารและลำไส้แสดงกิจกรรมสูงสุดใน
ช่วงค่า pH จาก 10 ถึง 12 โปรตีเอสปลาคู้ดำก็มีความมั่นคง
ในช่วงที่ค่า pH ของ 10-12.5 (รูป. 2B) หนึ่งในสิ่งที่สำคัญที่สุด
พารามิเตอร์สำหรับการเลือกโปรตีเอสสำหรับผงซักฟอกเป็นที่เหมาะสม
ค่า pH ค่าพีเอชที่ต้องการของสารละลายผงซักฟอกในการที่โปรตีเอส
ทำงานควรจะอยู่ที่ประมาณเช่นเดียวกับค่า pH ที่เหมาะสม
สำหรับเอนไซม์ (Gupta et al., 2002) ตั้งแต่ค่า pH ของผงซักฟอกซักผ้า
เป็นปกติอัลคาไลน์ (Banerjee et al., 1999), โปรติเอสและ
เอนไซม์อื่น ๆ ที่ใช้ในการเขียนเรียงความผงซักฟอกในขณะนี้ควร
จะเป็นอัลคาไลน์ในลักษณะที่มีค่า pH ที่เหมาะสมสูง คุณสมบัติเหล่านี้
ถูกแสดงโดยโปรตีเอสปลาคู้ดำเอทานอลบริสุทธิ์โดย
การตกตะกอน.
รูป 3a แสดงให้เห็นถึงผลของอุณหภูมิในน้ำย่อยปลาคู้ดำ
กิจกรรม เป็นกิจกรรมที่ดีที่สุดพบที่ 60 องศาเซลเซียส นอกจากนี้
พวกเขายังคงมีเสถียรภาพความร้อนขณะที่พวกเขายังคงอยู่ประมาณ 86%
ของกิจกรรมหลังจากที่ถูกบ่มที่อุณหภูมิที่เหมาะสม
(60 องศาเซลเซียส) เป็นเวลา 30 นาที (รูป. 3b) ผลที่ได้นี้จะคล้ายกับที่อธิบายไว้
สำหรับโปรตีเอสจาก Bacillus brevis (Banerjee et al., 1999) นอกจากนี้
ประมาณ 60% ของกิจกรรมสูงสุดไว้หลังจากการบ่ม
เป็นเวลา 30 นาทีวันที่ 30 องศาเซลเซียสซึ่งเป็นที่พึงประสงค์สำหรับวัตถุประสงค์ในการซักรีดและจาก
จุดของระบบนิเวศและเศรษฐกิจของมุมมองส่วนใหญ่เป็นเพราะการประหยัด
พลังงาน.
ทั้งหมดเอนไซม์ผงซักฟอกที่เข้ากันได้เป็นอัลคาไลน์ ที่เหมาะสมกับสูง
ค่า pH และมีความเสถียรความร้อน เหล่านี้เป็นลักษณะที่สำคัญ
เพราะค่า pH ของน้ำยาซักผ้าโดยทั่วไปในช่วงระหว่าง 9.0 และ 12.0 และเสถียรภาพทางความร้อนของเอนไซม์อัลคาไลน์เหล่านี้
มักจะแตกต่างกันไประหว่าง 50 และ 60 องศาเซลเซียส (อิ et al., 2002).
เฉพาะพื้นผิวและน้ำย่อยโปรตีนถูกใช้ในการ
ระบุ การปรากฏตัวของ trypsin เหมือนและ chymotrypsin เหมือนเอนไซม์
ในโปรตีเอสเอทานอลตกตะกอนจากปลาคู้ดำ
caeca กระเพาะอาหารและลำไส้ โปรตีเอสทำหน้าที่ใน BApNA
(1.59 mU ML-1) ถูกยับยั้งโดย Benzamidine (100%)
และ TLCK (98%), คลาสสิก trypsin เหมือนยับยั้งในขณะที่บรรดา
ไฮโดรไลซ์ Suc เพ-P-น่าน (0.04 mU ML-1) ถูกยับยั้ง
โดย TPCK (100%), ยับยั้ง chymotrypsin ทั่วไป อย่างไรก็ตาม
ผลการชี้ให้เห็นว่าการทำงานของเอนไซม์ทริปซิเหมือนเป็นน้ำย่อยที่สำคัญ
ในการจัดทำ (ประมาณ 40 เท่าสูงกว่า) BApNA และ
Suc เพ-P-น่าน proteolysis เป็นตามลำดับยับยั้ง 54% และ
96% โดย PMSF, ยับยั้งซีรีนโปรติเอส ผลที่คล้ายกันมักจะ
ตั้งข้อสังเกตอื่น ๆ โปรตีเอสปลาเขตร้อน (โลคอน, et al.,
2003. Bezerra et al, 2005).
ปัจจัยหลายประการที่มีส่วนเกี่ยวข้องในการเลือกน้ำย่อยสำหรับผงซักฟอกเป็น
เช่นเข้ากันได้กับส่วนประกอบผงซักฟอกเช่นลดแรงตึงผิว,
น้ำหอมและ สารฟอกขาว (แคนด์แคนด์ Saxena และข่าน
ปี 1999 มาร์มาลิกและ Tiwari, 1998) โปรตีเอสปลาคู้ดำและนำไปวิเคราะห์
ในที่ที่ไม่มีไอออน (Tween 20 กับ Tween 80) และลดแรงตึงผิวอิออน (ซาโปนินและโซเดียม choleate) โดยใช้ azocasein
เป็นสารตั้งต้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในการศึกษาทางถูกตกตะกอนด้วยด่างเอทานอลที่ความเข้มข้น 0 – 30 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) และ 30 - 70 % ( v / v ) บางส่วนบริสุทธิ์ การกู้คืนข้อมูลสูงสุด พบว่าเอนไซม์ เศษส่วนF2 ( 30 - 70 % v / v , ความเข้มข้นของเอทานอลบริสุทธิ์ ) , เสนอและผลผลิตของ 2.6-fold และ 74.9 ตามลำดับ ผลของกระบวนการบำบัดน้ำเสีย คือ การเตรียมการล้าง ซึ่งอนุญาตให้ความเข้มข้นของเอนไซม์ ไม่มีร่องรอยของกลิ่นปลาทั่วไปนอกจากนี้ 30 – 70% เอทานอล ( ส่วนที่ 2 ) ประกอบด้วยประมาณ 75% ของกิจกรรมที่เฉพาะเจาะจง ( 3006 U / g ของเนื้อเยื่อ ) เมื่อเปรียบเทียบเพื่อสกัด ( 3807 U / g ของเนื้อเยื่อ ) เอทานอลเป็นที่รู้จักกันเป็นโปรตีนที่สำคัญอุตสาหกรรมหุนหันพลันแล่น ( Cortez & เปสโซ ,1999 ) และเมื่อใช้วิธีนี้มันกาก อาจได้อย่างง่ายดาย ทางอุตสาหกรรมการกู้คืนโดยเทคนิคง่ายๆเช่น เครื่องระเหย ( ก๊อด & แฟลชghose , 2003 )โดยวิธีทดลอง สกัด และส่วน F2 จะแสดงในรูปที่ 1 เครื่องหมายโปรตีนมาตรฐานของน้ำหนัก โมเลกุลที่แตกต่างกัน และโปรตีนของสารสกัดหยาบส่วน F2 และจะแสดงในช่องที่ 1 , 2 และ 3 ตามลำดับ ของพวกเขาโปรตีนเคซีนเป็นกิจกรรมที่แสดงด้วย ( ทดลอง ) เลน4 ( สารสกัด ) และ 5 ( ส่วน F2 ) ที่สามารถสังเกตได้ในรูปนี้การใช้โปรโตคอลสามารถชำระบางส่วนและสมาธิ 3 โปรตีนหลักกับกิจกรรมจำเพาะจากสารสกัด . พวกเขานำเสนอน้ำหนักโมเลกุลของและหลอดเลือด , 35.5 / กิโลดาลตันและสองขนาดเล็กอื่น ๆเพื่อนำเสนอน้ำหนักโมเลกุลของระหว่าง 14 กิโลดาลตันและ 22.7 กิโลดาลตัน ในความเป็นจริง , ส่วนผสมของทางบริสุทธิ์การเตรียมมักจะใช้มากกว่าในอุตสาหกรรมอาหารและผงซักฟอก ( Rao et al . , 1998 )ผลของ pH ต่อเอนไซม์จะแสดงในรูปที่ 2A .ในทางของสัดส่วนเอทานอล F2 ที่ได้จากสาโทไพโลริกซีคาและลำไส้แสดงกิจกรรมสูงสุดที่มี pH ในช่วง 10 ถึง 12 ทางที่สาโทยังมั่นคงเหนือระดับ pH 10 และ 12.5 ( รูปที่ 2B ) หนึ่งที่สำคัญที่สุดพารามิเตอร์สำหรับการเลือกที่เหมาะสมเพื่อให้ผงซักฟอกคือเมื่อ pH ของสารละลายผงซักฟอกตามที่ต้องการซึ่งในทางงานน่าจะประมาณเดียวกันกับพีเอชที่เหมาะสมสำหรับเอนไซม์ ( Gupta et al . , 2002 ) เนื่องจาก pH ของผงซักฟอกซักรีดเป็นด่างโดยทั่วไป ( Banerjee et al . , 1999 ) และโปรติเอสเอนไซม์อื่น ๆ ที่ใช้ในปัจจุบันในส่วนประกอบของผงซักฟอกควรเป็นด่างในธรรมชาติที่มีคุณภาพสูงสุด . คุณสมบัติเหล่านี้กำลังแสดงผลโดยสาโททางบริสุทธิ์ โดยเอทานอลการตกตะกอนรูปที่ 3 แสดงผลของอุณหภูมิต่อสาโทและเอนไซม์กิจกรรม เป็นกิจกรรมที่เหมาะสม คือ พบใน 60 C นอกจากนี้พวกเขายังคงมีเสถียรภาพในขณะที่พวกเขายังคงได้รับประมาณร้อยละ 86ของกิจกรรมหลังการ บ่มที่อุณหภูมิที่เหมาะสม( 60 C ) เป็นเวลา 30 นาที ( รูปที่ 3B ) ผลที่ได้นี้จะคล้ายกับที่อธิบายไว้สำหรับโปรติเนสจาก Bacillus เบรวิส ( Banerjee et al . , 1999 ) นอกจากนี้เกี่ยวกับ 60% ของเอนไซม์สูงสุดถูกเก็บไว้หลังจากบ่ม30 นาที ที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส ซึ่งเป็นที่พึงปรารถนา มีบริการซักรีดและจากระบบนิเวศและชี้เศรษฐกิจในมุมมองของ ส่วนใหญ่ เพราะ ประหยัดของพลังงานผงซักฟอกเอนไซม์ทั้งหมดเข้ากันได้เป็นด่างสูงที่เหมาะสมพีเอชและปริมาณคงที่ เหล่านี้เป็นลักษณะสำคัญเพราะ pH ผงซักฟอกทั่วไปช่วงระหว่างเท่ากับ 9.0 และ 12.0 และเสถียรภาพทางความร้อนของเอนไซม์อัลคาไลน์เหล่านี้มักจะแตกต่างกันระหว่าง 50 และ 60 องศาเซลเซียส ( โมไรร่า et al . , 2002 )พื้นผิวและ protease inhibitors ( เฉพาะ )ระบุการปรากฏตัวของเอนไซม์และเอนไซม์ไคโมทริปซินชอบชอบในเอทานอลตกตะกอน proteases จากสาโทpyloric และพยาธิลำไส้ เพื่อทำ bapna( 4 ) หมู่ที่ 1 มิลลิลิตร ) ขอยับยั้งโดย benzamidine ( 100 % )และ tlck ( 98% ) , คลาสสิกและชอบการเปลี่ยนแปลง ,การย่อย suc-phe-p-nan ( 0.04 มูมล ( 1 ) ถูกขอยับยั้งโดย tpck ( 100 % ) ยับยั้งเอนไซม์ไคโมทริปซินทั่วไป อย่างไรก็ตามพบว่าเอนไซม์เอนไซม์ คือ โปรตีนที่สำคัญเช่นในการเตรียมการ ( ประมาณ 40 เท่า ) การ bapna และsuc-phe-p-nan โปรตีโ ลซิส , ตามลำดับ , 54 และยับยั้ง96% โดย PMSF , เอนไซม์ protease inhibitor . ผลที่คล้ายกันอยู่บ่อย ๆลักษณะทางปลาเขตร้อนอื่น ๆ ( alencar et al . ,2003 ; bezerra et al . , 2005 )พารามิเตอร์หลายส่วนร่วมในการเลือกโปรสำหรับผงซักฟอกเช่นความเข้ากันได้กับส่วนประกอบของผงซักฟอก , เช่น , สารลดแรงตึงผิว ,น้ำหอมและฟอกขาว ( Gupta Gupta , บริการ , และ ประจวบคีรีขันธ์2542 ; คูมาร์ มาลิค และ ทิวา , 1998 ) ปลาคู้ดำ proteases เป็นซีรั่มในการแสดงตนของแคลเซียม ( Tween 20 และสารลดแรงตึงผิว ( Tween 80 ) และไอออนอิเล็กตรอนและโซเดียม choleate ) ใช้ azocaseinเป็นสับสเตรท